செயின்ட் ஜான்ஸ் வோர்ட் தாவரத்தில், ஆய்வக உறுப்பு உருவாக்கம் மற்றும் உயிரியல் செயல்பாடுள்ள சேர்மங்களின் உற்பத்தி ஆகியவற்றின் மீது தாவர வளர்ச்சி சீராக்கிகள் மற்றும் இரும்பு ஆக்சைடு நானோ துகள்களின் ஒருங்கிணைந்த விளைவுகள்.

இந்த ஆய்வில், ஒருங்கிணைந்த சிகிச்சையின் தூண்டுதல் விளைவுகள்தாவர வளர்ச்சி சீராக்கிகள்*ஹைபெரிகம் பெர்ஃபோரேட்டம்* எல். தாவரத்தின் இன் விட்ரோ உருவ வளர்ச்சி மற்றும் இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்ற உற்பத்தி மீது (2,4-D மற்றும் கைனெடின்) மற்றும் இரும்பு ஆக்சைடு நானோ துகள்களின் (Fe₃O₄-NPs) தாக்கம் ஆராயப்பட்டது. உகந்த சிகிச்சை [2,4-D (0.5 மி.கி/லி) + கைனெடின் (2 மி.கி/லி) + Fe₃O₄-NPs (4 மி.கி/லி)] தாவர வளர்ச்சி அளவுருக்களைக் குறிப்பிடத்தக்க அளவில் மேம்படுத்தியது: கட்டுப்பாட்டுக் குழுவுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​தாவர உயரம் 59.6%, வேர் நீளம் 114.0%, மொட்டுகளின் எண்ணிக்கை 180.0% மற்றும் திசு வளர்ப்பின் ஈர எடை 198.3% அதிகரித்தது. இந்த ஒருங்கிணைந்த சிகிச்சையானது மீளுருவாக்கத் திறனையும் (50.85%) மேம்படுத்தி, ஹைபெரிசின் உள்ளடக்கத்தை 66.6% அதிகரித்தது. GC-MS பகுப்பாய்வில், ஹைபரோசைடு, β-பத்தோலீன் மற்றும் செட்டில் ஆல்கஹால் ஆகியவற்றின் அதிக உள்ளடக்கங்கள் கண்டறியப்பட்டன. இவை மொத்த சிகரப் பரப்பில் 93.36% ஆக இருந்தன. அதே நேரத்தில், மொத்த ஃபீனாலிக்ஸ் மற்றும் ஃபிளாவனாய்டுகளின் உள்ளடக்கங்கள் 80.1% வரை அதிகரித்திருந்தன. இந்த முடிவுகள், தாவர வளர்ச்சி சீராக்கிகளும் (PGRs) Fe₃O₄ நானோ துகள்களும் (Fe₃O₄-NPs) உறுப்பு உருவாக்கத்தையும் உயிரியல் செயல்பாட்டுக் கலவைகளின் திரட்சியையும் தூண்டுவதன் மூலம் ஒரு கூட்டு விளைவை ஏற்படுத்துகின்றன என்பதைக் காட்டுகின்றன. இது மருத்துவத் தாவரங்களின் உயிரித் தொழில்நுட்ப மேம்பாட்டிற்கான ஒரு நம்பிக்கைக்குரிய உத்தியாக அமைகிறது.
செயின்ட் ஜான்ஸ் வோர்ட் (Hypericum perforatum L.), செயின்ட் ஜான்ஸ் வோர்ட் என்றும் அழைக்கப்படுகிறது, இது ஹைபரிகேசி குடும்பத்தைச் சேர்ந்த ஒரு பல்லாண்டு கால மூலிகைச் செடியாகும், இது பொருளாதார மதிப்பைக் கொண்டுள்ளது.[1] அதன் சாத்தியமான உயிரியல் செயல்பாட்டுக் கூறுகளில் இயற்கை டானின்கள், சாந்தோன்கள், ஃப்ளோரோகுளுசினோல், நாப்தலீன்டியான்ட்ரோன் (ஹைபரின் மற்றும் சூடோஹைபரின்), ஃபிளாவனாய்டுகள், ஃபீனாலிக் அமிலங்கள் மற்றும் அத்தியாவசிய எண்ணெய்கள் ஆகியவை அடங்கும்.[2,3,4] செயின்ட் ஜான்ஸ் வோர்ட்டை பாரம்பரிய முறைகள் மூலம் இனப்பெருக்கம் செய்யலாம்; இருப்பினும், பாரம்பரிய முறைகளின் பருவகாலத் தன்மை, குறைந்த விதை முளைப்பு மற்றும் நோய்களுக்கு எளிதில் பாதிக்கப்படுதல் ஆகியவை பெரிய அளவிலான சாகுபடி மற்றும் இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்றங்களின் தொடர்ச்சியான உருவாக்கத்திற்கான அதன் திறனைக் கட்டுப்படுத்துகின்றன.[1,5,6]
எனவே, இன் விட்ரோ திசு வளர்ப்பு, விரைவான தாவரப் பெருக்கம், மரபணு வளங்களைப் பாதுகாத்தல் மற்றும் மருத்துவ சேர்மங்களின் மகசூலை அதிகரித்தல் ஆகியவற்றிற்கு ஒரு பயனுள்ள முறையாகக் கருதப்படுகிறது [7, 8]. தாவர வளர்ச்சி சீராக்கிகள் (PGRs) உருவ உருவாக்கத்தை ஒழுங்குபடுத்துவதில் முக்கிய பங்கு வகிக்கின்றன, மேலும் திசு வளர்ப்பு மற்றும் முழு உயிரினங்களுக்கு இன் விட்ரோ சாகுபடிக்கு அவசியமானவை. இந்த வளர்ச்சி செயல்முறைகளை வெற்றிகரமாக நிறைவு செய்வதற்கு அவற்றின் செறிவுகள் மற்றும் கலவைகளை உகந்ததாக்குவது முக்கியமானது [9]. எனவே, செயின்ட் ஜான்ஸ் வோர்ட் (H. perforatum) இன் வளர்ச்சி மற்றும் மீளுருவாக்கத் திறனை மேம்படுத்துவதற்கு, சீராக்கிகளின் பொருத்தமான கலவை மற்றும் செறிவைப் புரிந்துகொள்வது முக்கியம் [10].
இரும்பு ஆக்சைடு நானோ துகள்கள் (Fe₃O₄) என்பவை திசு வளர்ப்புக்காக உருவாக்கப்பட்ட அல்லது உருவாக்கப்பட்டு வரும் ஒரு வகை நானோ துகள்கள் ஆகும். Fe₃O₄ குறிப்பிடத்தக்க காந்தப் பண்புகள், நல்ல உயிரியல் இணக்கத்தன்மை, மற்றும் தாவர வளர்ச்சியை ஊக்குவித்தல் மற்றும் சுற்றுச்சூழல் அழுத்தத்தைக் குறைக்கும் திறன் ஆகியவற்றைக் கொண்டுள்ளது, எனவே இது திசு வளர்ப்பு வடிவமைப்புகளில் கணிசமான கவனத்தை ஈர்த்துள்ளது. இந்த நானோ துகள்களின் சாத்தியமான பயன்பாடுகளில் செல் பிரிவை ஊக்குவிக்க இன் விட்ரோ வளர்ப்பை மேம்படுத்துதல், ஊட்டச்சத்து உறிஞ்சுதலை மேம்படுத்துதல் மற்றும் ஆக்ஸிஜனேற்ற நொதிகளை செயல்படுத்துதல் ஆகியவை அடங்கும் [11].
நானோ துகள்கள் தாவர வளர்ச்சியை ஊக்குவிப்பதில் நல்ல விளைவுகளைக் காட்டியிருந்தாலும், *H. perforatum* தாவரத்தில் Fe₃O₄ நானோ துகள்கள் மற்றும் மேம்படுத்தப்பட்ட தாவர வளர்ச்சி சீராக்கிகளின் ஒருங்கிணைந்த பயன்பாடு குறித்த ஆய்வுகள் குறைவாகவே உள்ளன. இந்த அறிவு இடைவெளியை நிரப்புவதற்காக, மருத்துவத் தாவரங்களின் பண்புகளை மேம்படுத்துவதற்கான புதிய கண்ணோட்டங்களை வழங்கும் பொருட்டு, இந்த ஆய்வு அவற்றின் ஒருங்கிணைந்த விளைவுகளை ஆய்வக உருவமைப்பு மற்றும் இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்ற உற்பத்தியின் மீது மதிப்பீடு செய்தது. எனவே, இந்த ஆய்வுக்கு இரண்டு நோக்கங்கள் உள்ளன: (1) ஆய்வகத்தில் திசுக்கட்டி உருவாக்கம், தண்டு மீளுருவாக்கம் மற்றும் வேரூன்றுதலை திறம்பட ஊக்குவிக்க தாவர வளர்ச்சி சீராக்கிகளின் செறிவை மேம்படுத்துதல்; மற்றும் (2) ஆய்வகத்தில் வளர்ச்சி அளவுருக்களின் மீது Fe₃O₄ நானோ துகள்களின் விளைவுகளை மதிப்பீடு செய்தல். எதிர்காலத் திட்டங்களில், சூழலுக்கு ஏற்ப பழக்கப்படுத்தப்படும்போது (ஆய்வகத்தில்) மீளுருவாக்கம் செய்யப்பட்ட தாவரங்களின் உயிர்வாழும் விகிதத்தை மதிப்பீடு செய்வதும் அடங்கும். இந்த ஆய்வின் முடிவுகள் *H. perforatum* தாவரத்தின் நுண் பெருக்கத் திறனை கணிசமாக மேம்படுத்தும் என்றும், அதன் மூலம் இந்த முக்கியமான மருத்துவத் தாவரத்தின் நீடித்த பயன்பாடு மற்றும் உயிரி தொழில்நுட்பப் பயன்பாடுகளுக்குப் பங்களிக்கும் என்றும் எதிர்பார்க்கப்படுகிறது.
இந்த ஆய்வில், வயலில் வளர்க்கப்பட்ட ஓராண்டு செயின்ட் ஜான்ஸ் வோர்ட் தாவரங்களிலிருந்து (தாய் தாவரங்கள்) இலைத் துண்டுகளைப் பெற்றோம். இந்தத் துண்டுகள், ஆய்வக வளர்ப்புச் சூழலை மேம்படுத்துவதற்காகப் பயன்படுத்தப்பட்டன. வளர்ப்பதற்கு முன்பு, இலைகள் சில நிமிடங்களுக்கு ஓடும் காய்ச்சி வடிகட்டிய நீரில் நன்கு அலசப்பட்டன. பின்னர், அந்தத் துண்டுகளின் மேற்பரப்புகள் 30 வினாடிகளுக்கு 70% எத்தனாலில் மூழ்கவைக்கப்பட்டு கிருமி நீக்கம் செய்யப்பட்டன. அதனைத் தொடர்ந்து, சில துளிகள் ட்வீன் 20 கலந்த 1.5% சோடியம் ஹைப்போகுளோரைட் (NaOCl) கரைசலில் 10 நிமிடங்களுக்கு மூழ்கவைக்கப்பட்டன. இறுதியாக, அடுத்த வளர்ப்பு ஊடகத்திற்கு மாற்றுவதற்கு முன்பு, அந்தத் துண்டுகள் கிருமியழிக்கப்பட்ட காய்ச்சி வடிகட்டிய நீரில் மூன்று முறை அலசப்பட்டன.
அடுத்த நான்கு வாரங்களில், மீளுருவாக்க விகிதம், ஒரு எக்ஸ்பிளான்ட்டிற்கான தளிர்களின் எண்ணிக்கை மற்றும் தளிரின் நீளம் உள்ளிட்ட தளிர் மீளுருவாக்க அளவுருக்கள் அளவிடப்பட்டன. மீளுருவாக்கம் செய்யப்பட்ட தளிர்கள் குறைந்தபட்சம் 2 செ.மீ. நீளத்தை அடைந்தவுடன், அவை பாதி செறிவுள்ள MS ஊடகம், 0.5 மி.கி/லி இண்டோல்பியூட்ரிக் அமிலம் (IBA) மற்றும் 0.3% குவார் கம் ஆகியவற்றைக் கொண்ட ஒரு வேரூன்றல் ஊடகத்திற்கு மாற்றப்பட்டன. வேரூன்றல் வளர்ப்பு மூன்று வாரங்களுக்குத் தொடர்ந்தது, இந்தக் காலகட்டத்தில் வேரூன்றல் விகிதம், வேர்களின் எண்ணிக்கை மற்றும் வேரின் நீளம் ஆகியவை அளவிடப்பட்டன. ஒவ்வொரு சிகிச்சையும் மூன்று முறை மீண்டும் செய்யப்பட்டது, ஒவ்வொரு பிரதிக்கும் 10 எக்ஸ்பிளான்ட்கள் வளர்க்கப்பட்டன, இதன் மூலம் ஒரு சிகிச்சைக்கு தோராயமாக 30 எக்ஸ்பிளான்ட்கள் கிடைத்தன.
செடியின் அடிப்பகுதியிலிருந்து மிக உயரமான இலையின் நுனி வரை, ஒரு அளவுகோலைப் பயன்படுத்தி செடியின் உயரம் சென்டிமீட்டரில் (செ.மீ) அளக்கப்பட்டது. நாற்றுகளைக் கவனமாக அகற்றி, வளர்ப்பு ஊடகத்தையும் நீக்கிய உடனேயே, வேரின் நீளம் மில்லிமீட்டரில் (மி.மீ) அளக்கப்பட்டது. ஒவ்வொரு செடியிலும் உள்ள மொட்டுகளின் எண்ணிக்கை நேரடியாக எண்ணப்பட்டது. இலைகளில் உள்ள முடிச்சுகள் எனப்படும் கருப்புப் புள்ளிகளின் எண்ணிக்கை கண்ணால் பார்த்து அளக்கப்பட்டது. இந்தக் கருப்பு முடிச்சுகள், ஹைபெரிசின் கொண்ட சுரப்பிகள் அல்லது ஆக்சிஜனேற்றப் புள்ளிகள் என்று நம்பப்படுகிறது, மேலும் இவை சிகிச்சைக்கு செடியின் பதிலளிப்பைக் காட்டும் ஒரு உடலியல் குறிகாட்டியாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. அனைத்து வளர்ப்பு ஊடகத்தையும் நீக்கிய பிறகு, நாற்றுகளின் ஈர எடை மில்லிகிராம் (மி.கி) துல்லியத்தன்மை கொண்ட ஒரு மின்னணு தராசைக் கொண்டு அளக்கப்பட்டது.
திசுக்கட்டி உருவாக்கும் வீதத்தைக் கணக்கிடுவதற்கான முறை பின்வருமாறு: பல்வேறு வளர்ச்சி சீராக்கிகளை (கைனேஸ்கள், 2,4-D, மற்றும் Fe3O4) கொண்ட ஒரு ஊடகத்தில், திசுத்துண்டுகளை நான்கு வாரங்களுக்கு வளர்த்த பிறகு, திசுக்கட்டியை உருவாக்கும் திறன் கொண்ட திசுத்துண்டுகளின் எண்ணிக்கை எண்ணப்படுகிறது. திசுக்கட்டி உருவாக்கும் வீதத்தைக் கணக்கிடுவதற்கான சூத்திரம் பின்வருமாறு:
ஒவ்வொரு சிகிச்சையும் மூன்று முறை மீண்டும் செய்யப்பட்டது, ஒவ்வொரு முறையும் குறைந்தது 10 திசுத்துண்டுகள் பரிசோதிக்கப்பட்டன.
மீளுருவாக்க விகிதமானது, திசுக்கட்டி உருவாக்கும் நிலைக்குப் பிறகு, மொட்டு வேறுபாட்டுச் செயல்முறையை வெற்றிகரமாக நிறைவுசெய்யும் திசுக்கட்டியின் விகிதத்தைப் பிரதிபலிக்கிறது. இந்தக் காட்டி, திசுக்கட்டியானது வேறுபடுத்தப்பட்ட திசுவாக மாறி, புதிய தாவர உறுப்புகளாக வளரும் திறனை வெளிப்படுத்துகிறது.
வேரூன்றல் குணகம் என்பது, வேரூன்றக்கூடிய கிளைகளின் எண்ணிக்கைக்கும் மொத்தக் கிளைகளின் எண்ணிக்கைக்கும் உள்ள விகிதமாகும். இந்தக் காட்டி, வேரூன்றல் கட்டத்தின் வெற்றியைப் பிரதிபலிக்கிறது. நுண் இனப்பெருக்கம் மற்றும் தாவர இனப்பெருக்கத்தில் இது மிகவும் முக்கியமானதாகும், ஏனெனில் நல்ல வேரூன்றல், வளரும் சூழல்களில் நாற்றுகள் சிறப்பாக உயிர்வாழ உதவுகிறது.
ஹைபெரிசின் சேர்மங்கள் 90% மெத்தனால் கொண்டு பிரித்தெடுக்கப்பட்டன. 50 மி.கி உலர்ந்த தாவரப் பொருள் 1 மி.லி மெத்தனாலுடன் சேர்க்கப்பட்டு, அறை வெப்பநிலையில் இருட்டில் ஒரு மீயொலி சுத்திகரிப்பானில் (மாடல் A5120-3YJ) 30 kHz இல் 20 நிமிடங்களுக்கு மீயொலி அலைகளுக்கு உட்படுத்தப்பட்டது. மீயொலி அலைகளுக்குப் பிறகு, மாதிரி 15 நிமிடங்களுக்கு 6000 rpm வேகத்தில் மையவிலக்கு செய்யப்பட்டது. மேல்தேங்கிய திரவம் சேகரிக்கப்பட்டது, மேலும் கான்செய்சாவோ மற்றும் பலர் [14] விவரித்த முறையின்படி, பிளஸ்-3000 எஸ் நிறமாலைமானியைப் பயன்படுத்தி 592 nm இல் ஹைபெரிசினின் உறிஞ்சுதிறன் அளவிடப்பட்டது.
தாவர வளர்ச்சி சீராக்கிகள் (PGRs) மற்றும் இரும்பு ஆக்சைடு நானோ துகள்கள் (Fe₃O₄-NPs) கொண்டு செய்யப்பட்ட பெரும்பாலான சிகிச்சைகள், மீளுருவாக்கம் செய்யப்பட்ட தண்டு இலைகளில் கருப்பு முடிச்சுகள் உருவாவதைத் தூண்டவில்லை. 0.5 அல்லது 1 மி.கி/லி 2,4-D, 0.5 அல்லது 1 மி.கி/லி கைனெடின், அல்லது 1, 2, அல்லது 4 மி.கி/லி இரும்பு ஆக்சைடு நானோ துகள்கள் கொண்டு செய்யப்பட்ட எந்தவொரு சிகிச்சையிலும் முடிச்சுகள் காணப்படவில்லை. 2,4-D (0.5–2 மி.கி/லி) உடன் கைனெடின் (1–1.5 மி.கி/லி) மற்றும் இரும்பு ஆக்சைடு நானோ துகள்கள் (2–4 மி.கி/லி) ஆகியவற்றின் கலவை போன்ற சில சேர்க்கைகள், கைனெடின் மற்றும்/அல்லது இரும்பு ஆக்சைடு நானோ துகள்களின் அதிக செறிவுகளில் முடிச்சு வளர்ச்சியில் ஒரு சிறிய அதிகரிப்பைக் காட்டின (ஆனால் இது புள்ளிவிவரப்படி குறிப்பிடத்தக்கதல்ல). இந்த முடிவுகள் படம் 2-இல் காட்டப்பட்டுள்ளன. கருப்பு முடிச்சுகள் என்பவை இயற்கையாக நிகழும் மற்றும் நன்மை பயக்கும் ஹைபரிசின் நிறைந்த சுரப்பிகளைக் குறிக்கின்றன. இந்த ஆய்வில், கருப்பு முடிச்சுகள் முக்கியமாக திசுக்கள் பழுப்பு நிறமாவதோடு தொடர்புடையதாக இருந்தன, இது ஹைபரிசின் குவிவதற்கு உகந்த சூழலைக் குறிக்கிறது. 2,4-D, கைனெடின் மற்றும் Fe₃O₄ நானோ துகள்களுடனான சிகிச்சையானது, திசுக்கட்டி வளர்ச்சியை ஊக்குவித்தது, பழுப்பு நிறமாதலைக் குறைத்தது, மற்றும் குளோரோபில் உள்ளடக்கத்தை அதிகரித்தது, இது மேம்பட்ட வளர்சிதை மாற்ற செயல்பாடு மற்றும் ஆக்ஸிஜனேற்ற சேதத்தின் சாத்தியமான குறைப்பைக் குறிக்கிறது [37]. இந்த ஆய்வு, செயின்ட் ஜான்ஸ் வோர்ட் திசுக்கட்டியின் வளர்ச்சி மற்றும் மேம்பாட்டில் 2,4-D மற்றும் Fe₃O₄ நானோ துகள்களுடன் இணைந்து கைனெடினின் விளைவுகளை மதிப்பிட்டது (படம் 3a–g). முந்தைய ஆய்வுகள் Fe₃O₄ நானோ துகள்கள் பூஞ்சை எதிர்ப்பு மற்றும் நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பு செயல்பாடுகளைக் கொண்டுள்ளன [38, 39] என்றும், தாவர வளர்ச்சி சீராக்கிகளுடன் இணைந்து பயன்படுத்தப்படும்போது, ​​தாவர பாதுகாப்பு வழிமுறைகளைத் தூண்டி, செல்லுலார் அழுத்தக் குறியீடுகளைக் குறைக்க முடியும் [18] என்றும் காட்டியுள்ளன. இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்றங்களின் உயிரியக்கவியல் மரபணு ரீதியாக ஒழுங்குபடுத்தப்பட்டாலும், அவற்றின் உண்மையான விளைச்சல் சுற்றுச்சூழல் நிலைமைகளைப் பெரிதும் சார்ந்துள்ளது. வளர்சிதை மாற்ற மற்றும் உருவவியல் மாற்றங்கள், குறிப்பிட்ட தாவர மரபணுக்களின் வெளிப்பாட்டை ஒழுங்குபடுத்துவதன் மூலமும் சுற்றுச்சூழல் காரணிகளுக்கு பதிலளிப்பதன் மூலமும் இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்ற அளவுகளை பாதிக்கலாம். மேலும், தூண்டிகள் புதிய மரபணுக்களின் செயல்பாட்டைத் தூண்டக்கூடும், இது நொதிச் செயல்பாட்டைத் தூண்டி, இறுதியில் பல உயிரியக்கப் பாதைகளைச் செயல்படுத்தி, இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்றப் பொருட்களின் உருவாக்கத்திற்கு வழிவகுக்கிறது. மேலும், மற்றொரு ஆய்வில், நிழலைக் குறைப்பது சூரிய ஒளி வெளிப்பாட்டை அதிகரிப்பதாகவும், அதன் மூலம் *ஹைபெரிகம் பெர்ஃபோரேட்டம்* தாவரத்தின் இயற்கை வாழ்விடத்தில் பகல் நேர வெப்பநிலையை உயர்த்துவதாகவும், இது ஹைபெரிசின் விளைச்சல் அதிகரிப்பதற்கும் பங்களிப்பதாகவும் காட்டப்பட்டது. இந்தத் தரவுகளின் அடிப்படையில், திசு வளர்ப்பில் இரும்பு நானோ துகள்களின் பங்கை சாத்தியமான தூண்டிகளாக இந்த ஆய்வு ஆராய்ந்தது. இந்த நானோ துகள்கள் நொதித் தூண்டுதல் மூலம் ஹெஸ்பெரிடின் உயிரியக்கத்தில் ஈடுபட்டுள்ள மரபணுக்களைச் செயல்படுத்த முடியும் என்றும், இது இந்தச் சேர்மத்தின் திரட்சியை அதிகரிக்க வழிவகுக்கிறது என்றும் முடிவுகள் காட்டின (படம் 2). எனவே, இயற்கைச் சூழலில் வளரும் தாவரங்களுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​மிதமான அழுத்தமானது இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்றப் பொருட்களின் உயிரியக்கத்தில் ஈடுபட்டுள்ள மரபணுக்களின் செயல்பாட்டுடன் இணைக்கப்படும்போது, ​​உயிருள்ள தாவரங்களில் இத்தகைய சேர்மங்களின் உற்பத்தியும் மேம்படுத்தப்படலாம் என்று வாதிடலாம். ஒருங்கிணைந்த சிகிச்சைகள் பொதுவாக மீளுருவாக்க விகிதத்தில் ஒரு நேர்மறையான விளைவைக் கொண்டுள்ளன, ஆனால் சில சந்தர்ப்பங்களில், இந்த விளைவு பலவீனமடைகிறது. குறிப்பாக, 1 mg/L 2,4-D, 1.5 mg/L கைனேஸ் மற்றும் வெவ்வேறு செறிவுகளுடன் கூடிய சிகிச்சையானது, கட்டுப்பாட்டுக் குழுவுடன் ஒப்பிடும்போது மீளுருவாக்க விகிதத்தை 50.85% அளவுக்குத் தனித்தனியாகவும் கணிசமாகவும் அதிகரிக்கக்கூடும் (படம் 4c). இந்த முடிவுகள், நானோஹார்மோன்களின் குறிப்பிட்ட சேர்க்கைகள் தாவர வளர்ச்சி மற்றும் வளர்சிதை மாற்ற உற்பத்தியை ஊக்குவிக்க ஒருங்கிணைந்து செயல்பட முடியும் என்பதைக் காட்டுகின்றன, இது மருத்துவ தாவரங்களின் திசு வளர்ப்பிற்கு மிகவும் முக்கியத்துவம் வாய்ந்தது. பால்மர் மற்றும் கெல்லர் [50] ஆகியோர், 2,4-D சிகிச்சையானது St. perforatum-ல் தனித்தனியாக திசுக்கட்டி உருவாக்கத்தைத் தூண்டக்கூடும் என்றும், அதே நேரத்தில் கைனேஸைச் சேர்ப்பது திசுக்கட்டி உருவாக்கம் மற்றும் மீளுருவாக்கத்தை கணிசமாக மேம்படுத்தியது என்றும் காட்டினர். இந்த விளைவு ஹார்மோன் சமநிலையின் மேம்பாடு மற்றும் செல் பிரிவின் தூண்டுதல் காரணமாக இருந்தது. பால் மற்றும் பலர் [51] Fe₃O₄-NP சிகிச்சையானது ஆக்ஸிஜனேற்ற நொதிகளின் செயல்பாட்டைத் தனித்தனியாக மேம்படுத்த முடியும் என்றும், அதன் மூலம் St. perforatum-ல் வேர் வளர்ச்சியை ஊக்குவிக்க முடியும் என்றும் கண்டறிந்தனர். 0.5 மி.கி/லி, 1 மி.கி/லி, மற்றும் 1.5 மி.கி/லி செறிவுகளில் Fe₃O₄ நானோ துகள்களைக் கொண்ட வளர்ப்பு ஊடகங்கள் ஆளி தாவரங்களின் மீளுருவாக்க விகிதத்தை மேம்படுத்தின [52]. கைனெடின், 2,4-டைகுளோரோபென்சோதியாசோலினோன், மற்றும் Fe₃O₄ நானோ துகள்களின் பயன்பாடு திசுக்கட்டி மற்றும் வேர் உருவாக்கும் விகிதங்களை கணிசமாக மேம்படுத்தியது, இருப்பினும், இன் விட்ரோ மீளுருவாக்கத்திற்கு இந்த ஹார்மோன்களைப் பயன்படுத்துவதால் ஏற்படக்கூடிய பக்க விளைவுகளைக் கருத்தில் கொள்ள வேண்டும். உதாரணமாக, 2,4-டைகுளோரோபென்சோதியாசோலினோன் அல்லது கைனெடினை நீண்ட காலத்திற்கு அல்லது அதிக செறிவில் பயன்படுத்துவது உடற்கல மாறுபாடு, ஆக்ஸிஜனேற்ற அழுத்தம், அசாதாரண திசுக்கட்டி உருவவியல் அல்லது கண்ணாடிமயமாதல் ஆகியவற்றில் விளைவிக்கலாம். எனவே, அதிக மீளுருவாக்க விகிதம் மரபணு நிலைத்தன்மையை அவசியமாக முன்னறிவிப்பதில்லை. மீளுருவாக்கம் செய்யப்பட்ட அனைத்து தாவரங்களும் மூலக்கூறு குறிப்பான்களைப் (எ.கா. RAPD, ISSR, AFLP) பயன்படுத்தி அல்லது சைட்டோஜெனடிக் பகுப்பாய்வைப் பயன்படுத்தி அவற்றின் ஒருபடித்தன்மை மற்றும் இன் விவோ தாவரங்களுடனான ஒற்றுமையைத் தீர்மானிக்க மதிப்பீடு செய்யப்பட வேண்டும் [53,54,55].
தாவர வளர்ச்சி சீராக்கிகளான (2,4-D மற்றும் கைனெடின்) மற்றும் Fe₃O₄ நானோ துகள்களின் ஒருங்கிணைந்த பயன்பாடு, *ஹைபெரிகம் பெர்ஃபோரேட்டம்* தாவரத்தில் உருவ உருவாக்கத்தையும், ஹைபெரிசின் மற்றும் ஹைபரோசைடு உள்ளிட்ட முக்கிய உயிரியல் செயல்பாட்டு வளர்சிதை மாற்றப் பொருட்களின் திரட்சியையும் மேம்படுத்தும் என்பதை இந்த ஆய்வு முதன்முறையாக நிரூபித்துள்ளது. உகந்த சிகிச்சை முறையானது (1 மி.கி/லி 2,4-D + 1 மி.கி/லி கைனெடின் + 4 மி.கி/லி Fe₃O₄-NPs), திசு வளர்ப்பு, உறுப்பு உருவாக்கம் மற்றும் இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்றப் பொருட்களின் விளைச்சலை அதிகப்படுத்தியது மட்டுமல்லாமல், ஒரு மிதமான தூண்டும் விளைவையும் வெளிப்படுத்தியது. இது தாவரத்தின் அழுத்த சகிப்புத்தன்மையையும் மருத்துவ மதிப்பையும் மேம்படுத்தக்கூடும். நானோ தொழில்நுட்பம் மற்றும் தாவர திசு வளர்ப்பின் இந்த ஒருங்கிணைப்பு, மருத்துவ சேர்மங்களை ஆய்வகத்தில் பெருமளவில் உற்பத்தி செய்வதற்கு ஒரு நிலையான மற்றும் திறமையான தளத்தை வழங்குகிறது. இந்த முடிவுகள், தொழில்துறை பயன்பாடுகளுக்கும், மூலக்கூறு வழிமுறைகள், மருந்தளவு உகப்பாக்கம் மற்றும் மரபணு துல்லியம் குறித்த எதிர்கால ஆராய்ச்சிகளுக்கும் வழி வகுக்கின்றன. இதன் மூலம், மருத்துவத் தாவரங்கள் மீதான அடிப்படை ஆராய்ச்சியை நடைமுறை உயிரித் தொழில்நுட்பத்துடன் இணைக்கின்றன.