செயற்கை பூச்சிக்கொல்லிகளின் பரவலான பயன்பாடு, எதிர்ப்புத்திறன் கொண்ட உயிரினங்களின் தோற்றம், சுற்றுச்சூழல் சீரழிவு மற்றும் மனித ஆரோக்கியத்திற்கு ஏற்படும் தீங்கு உள்ளிட்ட பல சிக்கல்களுக்கு வழிவகுத்துள்ளது. எனவே, புதிய நுண்ணுயிரிகள்...பூச்சிக்கொல்லிகள்மனித ஆரோக்கியத்திற்கும் சுற்றுச்சூழலுக்கும் பாதுகாப்பானவை அவசரமாகத் தேவைப்படுகின்றன. இந்த ஆய்வில், என்டெரோபாக்டர் குளோகே SJ2 ஆல் உற்பத்தி செய்யப்பட்ட ராம்னோலிபிட் பயோசர்ஃபேக்டன்ட், கொசு (கியூலெக்ஸ் குவின்குஃபாசியேட்டஸ்) மற்றும் கரையான் (ஒடோன்டோடெர்ம்ஸ் ஒபீசஸ்) லார்வாக்களுக்கு அதன் நச்சுத்தன்மையை மதிப்பிடுவதற்குப் பயன்படுத்தப்பட்டது. சிகிச்சைகளுக்கு இடையில், கொடுக்கப்பட்ட அளவைப் பொறுத்து இறப்பு விகிதம் மாறுபட்டது என்பதை முடிவுகள் காட்டின. கரையான் மற்றும் கொசு லார்வாக்களுக்கான பயோசர்ஃபேக்டன்ட்களின் 48 மணி நேர LC50 (50% கொல்லும் செறிவு) மதிப்பு, ஒரு நேரியல் அல்லாத பின்னடைவு வளைவு பொருத்தும் முறையைப் பயன்படுத்தித் தீர்மானிக்கப்பட்டது. பயோசர்ஃபேக்டன்ட்டின் லார்வா கொல்லி மற்றும் கரையான் எதிர்ப்புச் செயல்பாட்டின் 48 மணி நேர LC50 மதிப்புகள் (95% நம்பிக்கை இடைவெளி) முறையே 26.49 மி.கி/லி (வரம்பு 25.40 முதல் 27.57 வரை) மற்றும் 33.43 மி.கி/லி (வரம்பு 31.09 முதல் 35.68 வரை) என முடிவுகள் காட்டின. திசுநோயியல் பரிசோதனையின்படி, உயிரிமேற்பரப்பிகளைக் கொண்டு செய்யப்பட்ட சிகிச்சையானது, புழுக்கள் மற்றும் கரையான்களின் நுண்ணுறுப்புத் திசுக்களுக்குக் கடுமையான சேதத்தை ஏற்படுத்தியது. இந்த ஆய்வின் முடிவுகள், Enterobacter cloacae SJ2 ஆல் உற்பத்தி செய்யப்படும் நுண்ணுயிர் உயிரிமேற்பரப்பியானது, Cx. quinquefasciatus மற்றும் O. obesus ஆகியவற்றைக் கட்டுப்படுத்துவதற்கான ஒரு சிறந்த மற்றும் திறம்படச் செயல்படக்கூடிய கருவியாகும் என்பதைக் காட்டுகின்றன.
வெப்பமண்டல நாடுகளில் அதிக எண்ணிக்கையிலான கொசுக்களால் பரவும் நோய்கள் காணப்படுகின்றன¹. கொசுக்களால் பரவும் நோய்களின் முக்கியத்துவம் பரவலாக உள்ளது. ஒவ்வொரு ஆண்டும் 4 லட்சத்திற்கும் அதிகமான மக்கள் மலேரியாவால் இறக்கின்றனர், மேலும் சில முக்கிய நகரங்கள் டெங்கு, மஞ்சள் காய்ச்சல், சிக்கன்குனியா மற்றும் ஜிகா போன்ற கடுமையான நோய்களின் பெருந்தொற்றுகளை சந்தித்து வருகின்றன². உலகளவில் ஆறு நோய்த்தொற்றுகளில் ஒன்று நோய்க்கடத்திகளால் பரவும் நோய்களுடன் தொடர்புடையது, இதில் கொசுக்களே மிக முக்கியமான பாதிப்புகளை ஏற்படுத்துகின்றன³,⁴. கியூலெக்ஸ், அனோஃபிலிஸ் மற்றும் ஏடிஸ் ஆகிய மூன்று கொசுப் பேரினங்களே நோய் பரவலுடன் பொதுவாக தொடர்புடையவை⁵. ஏடிஸ் ஏஜிப்டி கொசுவால் பரவும் நோய்த்தொற்றான டெங்கு காய்ச்சலின் பரவல், கடந்த பத்தாண்டுகளில் அதிகரித்துள்ளது மற்றும் இது ஒரு குறிப்பிடத்தக்க பொது சுகாதார அச்சுறுத்தலாக உள்ளது⁴,⁷,⁸. உலக சுகாதார அமைப்பின் (WHO) கூற்றுப்படி, உலகின் 40% க்கும் அதிகமான மக்கள் டெங்கு காய்ச்சல் அபாயத்தில் உள்ளனர், மேலும் 100 க்கும் மேற்பட்ட நாடுகளில் ஆண்டுதோறும் 50–100 மில்லியன் புதிய பாதிப்புகள் ஏற்படுகின்றன⁹,¹⁰,¹¹. உலகம் முழுவதும் டெங்கு காய்ச்சலின் பாதிப்பு அதிகரித்துள்ளதால், அது ஒரு பெரிய பொது சுகாதாரப் பிரச்சனையாக உருவெடுத்துள்ளது¹²,¹³,¹⁴. பொதுவாக ஆப்பிரிக்க அனோபிலிஸ் கொசு என்று அழைக்கப்படும் அனோபிலிஸ் காம்பியாய், வெப்பமண்டல மற்றும் மிதவெப்பமண்டலப் பகுதிகளில் மனித மலேரியாவைப் பரப்பும் மிக முக்கியமான காரணியாகும்¹⁵. மேற்கு நைல் வைரஸ், செயின்ட் லூயிஸ் மூளை அழற்சி, ஜப்பானிய மூளை அழற்சி மற்றும் குதிரைகள், பறவைகளில் ஏற்படும் வைரஸ் தொற்றுகள் ஆகியவை கியூலெக்ஸ் கொசுக்களால் பரவுகின்றன; இவை பொதுவாக வீட்டுக் கொசுக்கள் என்று அழைக்கப்படுகின்றன. மேலும், இவை பாக்டீரியா மற்றும் ஒட்டுண்ணி நோய்களையும் பரப்புகின்றன¹⁶. உலகில் 3,000-க்கும் மேற்பட்ட கரையான் இனங்கள் உள்ளன, மேலும் அவை 15 கோடி ஆண்டுகளுக்கும் மேலாக இருந்து வருகின்றன¹⁷. பெரும்பாலான பூச்சிகள் மண்ணில் வாழ்கின்றன மற்றும் செல்லுலோஸ் கொண்ட மரம் மற்றும் மரப் பொருட்களை உணவாக உட்கொள்கின்றன. ஒடோன்டோடெர்ம்ஸ் ஒபெசஸ் என்ற இந்தியக் கரையான், முக்கியமான பயிர்கள் மற்றும் தோட்ட மரங்களுக்குக் கடுமையான சேதத்தை ஏற்படுத்தும் ஒரு முக்கிய பூச்சியாகும்¹⁸. விவசாயப் பகுதிகளில், பல்வேறு நிலைகளில் ஏற்படும் கரையான் தாக்குதல்கள், பல்வேறு பயிர்கள், மர இனங்கள் மற்றும் கட்டுமானப் பொருட்களுக்கு மிகப்பெரிய பொருளாதார சேதத்தை ஏற்படுத்தக்கூடும். கரையான்கள் மனிதர்களுக்கும் உடல்நலப் பிரச்சனைகளை ஏற்படுத்தக்கூடும்¹⁹.
இன்றைய மருந்து மற்றும் விவசாயத் துறைகளில் நுண்ணுயிரிகள் மற்றும் பூச்சிகளிடமிருந்து ஏற்படும் எதிர்ப்புத்திறன் பிரச்சினை சிக்கலானது²⁰,²¹. எனவே, இரு நிறுவனங்களும் புதிய, செலவு குறைந்த நுண்ணுயிர்க்கொல்லிகள் மற்றும் பாதுகாப்பான உயிரிப் பூச்சிக்கொல்லிகளைத் தேட வேண்டும். செயற்கைப் பூச்சிக்கொல்லிகள் இப்போது கிடைக்கின்றன, மேலும் அவை தொற்றுத்தன்மை கொண்டவை என்றும், இலக்கற்ற நன்மை பயக்கும் பூச்சிகளை விரட்டுகின்றன என்றும் நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளன²². சமீபத்திய ஆண்டுகளில், பல்வேறு தொழில்களில் அவற்றின் பயன்பாடு காரணமாக உயிரிமேற்பரப்பிகள் மீதான ஆராய்ச்சி விரிவடைந்துள்ளது. விவசாயம், மண் சீரமைப்பு, பெட்ரோலியம் பிரித்தெடுத்தல், பாக்டீரியா மற்றும் பூச்சி நீக்கம், மற்றும் உணவு பதப்படுத்துதல் ஆகியவற்றில் உயிரிமேற்பரப்பிகள் மிகவும் பயனுள்ளதாகவும் இன்றியமையாததாகவும் உள்ளன²³,²⁴. உயிரிமேற்பரப்பிகள் அல்லது நுண்ணுயிர் மேற்பரப்பிகள் என்பவை கடலோர வாழ்விடங்கள் மற்றும் எண்ணெய் மாசுபட்ட பகுதிகளில் பாக்டீரியா, ஈஸ்ட் மற்றும் பூஞ்சைகள் போன்ற நுண்ணுயிரிகளால் உற்பத்தி செய்யப்படும் உயிரிமேற்பரப்பி வேதிப்பொருட்கள் ஆகும்²⁵,²⁶. வேதியியல் வழி மேற்பரப்பிகள் மற்றும் உயிரிமேற்பரப்பிகள் என்பவை இயற்கைச் சூழலிலிருந்து நேரடியாகப் பெறப்படும் இரண்டு வகைகள் ஆகும்²⁷. பல்வேறு உயிரிமேற்பரப்பிகள் கடல் வாழ்விடங்களிலிருந்து பெறப்படுகின்றன²⁸,²⁹. எனவே, விஞ்ஞானிகள் இயற்கை பாக்டீரியாக்களை அடிப்படையாகக் கொண்ட பயோசர்ஃபேக்டன்ட்களின் உற்பத்திக்கான புதிய தொழில்நுட்பங்களைத் தேடி வருகின்றனர்30,31. இத்தகைய ஆராய்ச்சியில் ஏற்பட்டுள்ள முன்னேற்றங்கள், சுற்றுச்சூழல் பாதுகாப்பிற்கு இந்த உயிரியல் சேர்மங்களின் முக்கியத்துவத்தை நிரூபிக்கின்றன32. பேசில்லஸ், சூடோமோனாஸ், ரோடோகாக்கஸ், அல்கலிஜென்ஸ், கோரினேபாக்டீரியம் மற்றும் இந்த பாக்டீரியா பேரினங்கள் நன்கு ஆய்வு செய்யப்பட்ட பிரதிநிதிகளாகும்23,33.
பரந்த அளவிலான பயன்பாடுகளைக் கொண்ட பல வகையான உயிர்மேற்பரப்பிகள் உள்ளன³⁴. இந்தச் சேர்மங்களின் ஒரு குறிப்பிடத்தக்க நன்மை என்னவென்றால், அவற்றில் சில பாக்டீரியா எதிர்ப்பு, புழுக்கொல்லி மற்றும் பூச்சிக்கொல்லி செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளன. இதன் பொருள், அவற்றை விவசாயம், வேதியியல், மருந்து மற்றும் அழகுசாதனத் தொழில்களில் பயன்படுத்தலாம்³⁵,³⁶,³⁷,³⁸. உயிர்மேற்பரப்பிகள் பொதுவாக மக்கும் தன்மை கொண்டவை மற்றும் சுற்றுச்சூழலுக்கு நன்மை பயக்கும் என்பதால், பயிர்களைப் பாதுகாக்க ஒருங்கிணைந்த பூச்சி மேலாண்மைத் திட்டங்களில் அவை பயன்படுத்தப்படுகின்றன³⁹. இவ்வாறு, Enterobacter cloacae SJ2 ஆல் உற்பத்தி செய்யப்படும் நுண்ணுயிர் உயிர்மேற்பரப்பிகளின் புழுக்கொல்லி மற்றும் கரையான் எதிர்ப்புச் செயல்பாடு பற்றிய அடிப்படை அறிவு பெறப்பட்டுள்ளது. ராம்னோலிப்பிட் உயிர்மேற்பரப்பிகளின் வெவ்வேறு செறிவுகளுக்கு உட்படுத்தப்படும்போது ஏற்படும் இறப்பு மற்றும் திசுவியல் மாற்றங்களை நாங்கள் ஆய்வு செய்தோம். கூடுதலாக, நுண்பாசிகள், டாஃப்னியா மற்றும் மீன்களுக்கான கடுமையான நச்சுத்தன்மையைத் தீர்மானிக்க, பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் அளவுசார் கட்டமைப்பு-செயல்பாட்டு (QSAR) கணினி நிரலான சூழலியல் கட்டமைப்பு-செயல்பாட்டு (ECOSAR) நிரலை நாங்கள் மதிப்பீடு செய்தோம்.
இந்த ஆய்வில், 30 முதல் 50 மி.கி/மி.லி வரையிலான (5 மி.கி/மி.லி இடைவெளியில்) பல்வேறு செறிவுகளில் உள்ள சுத்திகரிக்கப்பட்ட உயிர்மேற்பரப்பிகளின் கரையான் எதிர்ப்புச் செயல்பாடு (நச்சுத்தன்மை), இந்தியக் கரையான்களான ஓ. ஒபீசஸ் மற்றும் குவின்குஃபாசியாட்டஸ் கொசுக்களின் நான்காம் நிலை லார்வாக்களுக்கு எதிராகச் சோதிக்கப்பட்டது. ஓ. ஒபீசஸ் மற்றும் குவின்குஃபாசியாட்டஸ் சோலனேசியாரம் ஆகியவற்றுக்கு எதிராக 48 மணி நேரத்திற்கு மேலான உயிர்மேற்பரப்பியின் LC50 செறிவுகள் ஆராயப்பட்டன. கொசு லார்வாக்கள், ஒரு நேரியல் அல்லாத பின்னடைவு வளைவுப் பொருத்த முறையைப் பயன்படுத்தி அடையாளம் காணப்பட்டன. உயிர்மேற்பரப்பியின் செறிவு அதிகரிக்கும்போது கரையான் இறப்பு விகிதமும் அதிகரித்தது என்பதை முடிவுகள் காட்டின. முடிவுகளின்படி, இந்த பயோசர்ஃபேக்டன்ட் புழுக்கொல்லிச் செயல்பாட்டையும் (படம் 1) மற்றும் கரையான் எதிர்ப்புச் செயல்பாட்டையும் (படம் 2) கொண்டிருந்தது. இதன் 48 மணி நேர LC50 மதிப்புகள் (95% CI) முறையே 26.49 மி.கி/லி (25.40 முதல் 27.57 வரை) மற்றும் 33.43 மி.கி/லி (படம் 31.09 முதல் 35.68 வரை) ஆகும் (அட்டவணை 1). தீவிர நச்சுத்தன்மையின் (48 மணி நேரம்) அடிப்படையில், இந்த பயோசர்ஃபேக்டன்ட் சோதிக்கப்பட்ட உயிரினங்களுக்கு "தீங்கு விளைவிக்கக்கூடியது" என வகைப்படுத்தப்பட்டுள்ளது. இந்த ஆய்வில் உருவாக்கப்பட்ட பயோசர்ஃபேக்டன்ட், வெளிப்படுத்தப்பட்ட 24-48 மணி நேரத்திற்குள் 100% இறப்புடன் சிறந்த புழுக்கொல்லிச் செயல்பாட்டைக் காட்டியது.
புழுக்கொல்லிச் செயல்பாட்டிற்கான LC50 மதிப்பைக் கணக்கிடுங்கள். சார்பு இறப்பு விகிதத்திற்கான (%) நேர்கோடற்ற பின்னடைவு வளைவுப் பொருத்தம் (தடித்த கோடு) மற்றும் 95% நம்பிக்கை இடைவெளி (நிழலிடப்பட்ட பகுதி).
கரையான் எதிர்ப்புச் செயல்பாட்டிற்கான LC50 மதிப்பைக் கணக்கிடுங்கள். சார்பு இறப்பு விகிதத்திற்கான (%) நேரியல் அல்லாத பின்னடைவு வளைவுப் பொருத்தம் (தடித்த கோடு) மற்றும் 95% நம்பிக்கை இடைவெளி (நிழலிடப்பட்ட பகுதி).
சோதனையின் முடிவில், உருவவியல் மாற்றங்களும் முரண்பாடுகளும் நுண்ணோக்கியின் கீழ் காணப்பட்டன. கட்டுப்பாட்டுக் குழு மற்றும் சிகிச்சை அளிக்கப்பட்ட குழுவில் 40x உருப்பெருக்கத்தில் உருவவியல் மாற்றங்கள் காணப்பட்டன. படம் 3-இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, உயிரிமேற்பரப்புச் செயலிகளால் சிகிச்சை அளிக்கப்பட்ட பெரும்பாலான புழுக்களில் வளர்ச்சிக் குறைபாடு ஏற்பட்டது. படம் 3a ஒரு இயல்பான Cx. quinquefasciatus-ஐயும், படம் 3b ஒரு முரண்பாடான Cx. Causes ஐந்து நூற்புழுப் புழுக்களையும் காட்டுகிறது.
கியூலெக்ஸ் குவின்குஃபாசியேட்டஸ் புழுக்களின் வளர்ச்சியில், உயிரி-ஆபத்தான (LC50) அளவிலான உயிர்மேற்பரப்புச் செயலிகளின் விளைவு. 40× உருப்பெருக்கத்தில் எடுக்கப்பட்ட ஒரு சாதாரண கியூலெக்ஸ் குவின்குஃபாசியேட்டஸின் ஒளி நுண்ணோக்கிப் படம் (அ). குவின்குஃபாசியேட்டஸ் (ஆ) இயல்புக்கு மாறான கியூலெக்ஸ் குவின்குஃபாசியேட்டஸ். இது ஐந்து நூற்புழுப் புழுக்களை உண்டாக்குகிறது.
தற்போதைய ஆய்வில், சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட புழுக்கள் (படம் 4) மற்றும் கரையான்களின் (படம் 5) திசுவியல் பரிசோதனையில், வயிற்றுப் பகுதி குறைதல் மற்றும் தசைகள், எபிதீலியல் அடுக்குகள், தோல் ஆகியவற்றில் சேதம் உள்ளிட்ட பல அசாதாரணங்கள் கண்டறியப்பட்டன. நடுக்குடல். இந்த ஆய்வில் பயன்படுத்தப்பட்ட உயிர்மேற்பரப்புச் செயலியின் தடுப்புச் செயல்பாட்டின் வழிமுறையை திசுவியல் வெளிப்படுத்தியது.
சாதாரண, சிகிச்சையளிக்கப்படாத 4 ஆம் நிலை Cx. quinquefasciatus புழுக்களின் திசுநோயியல் (கட்டுப்பாடு: (a,b)) மற்றும் உயிரிமேற்பரப்புச் செயலியால் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட புழுக்களின் திசுநோயியல் (சிகிச்சை: (c,d)). அம்புக்குறிகள், சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட குடல் புறத்தோல் (epi), உட்கருக்கள் (n) மற்றும் தசை (mu) ஆகியவற்றைக் குறிக்கின்றன. பட்டை = 50 µm.
சாதாரண சிகிச்சையளிக்கப்படாத ஓ. ஒபீசஸ் (கட்டுப்பாடு: (a,b)) மற்றும் உயிர்மேற்பரப்புச் செயலி மூலம் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட (சிகிச்சை: (c,d)) ஆகியவற்றின் திசுநோயியல். அம்புக்குறிகள் முறையே குடல் புறத்தோல் (epi) மற்றும் தசை (mu) ஆகியவற்றைக் குறிக்கின்றன. பட்டை = 50 µm.
இந்த ஆய்வில், முதன்மை உற்பத்தியாளர்கள் (பச்சை பாசிகள்), முதன்மை நுகர்வோர் (நீர் ஈக்கள்) மற்றும் இரண்டாம் நிலை நுகர்வோர் (மீன்கள்) ஆகியோருக்கு ராம்னோலிபிட் பயோசர்ஃபேக்டன்ட் தயாரிப்புகளின் உடனடி நச்சுத்தன்மையைக் கணிக்க ECOSAR பயன்படுத்தப்பட்டது. இந்த நிரல், மூலக்கூறு அமைப்பின் அடிப்படையில் நச்சுத்தன்மையை மதிப்பிடுவதற்கு அதிநவீன அளவுசார் அமைப்பு-செயல்பாட்டு சேர்ம மாதிரிகளைப் பயன்படுத்துகிறது. இந்த மாதிரி, நீர்வாழ் உயிரினங்களுக்குப் பொருட்களின் உடனடி மற்றும் நீண்ட கால நச்சுத்தன்மையைக் கணக்கிட அமைப்பு-செயல்பாட்டு (SAR) மென்பொருளைப் பயன்படுத்துகிறது. குறிப்பாக, அட்டவணை 2 பல இனங்களுக்கான மதிப்பிடப்பட்ட சராசரி மரணச் செறிவுகள் (LC50) மற்றும் சராசரி செயல்திறன் செறிவுகளை (EC50) சுருக்கமாகக் கூறுகிறது. சந்தேகிக்கப்படும் நச்சுத்தன்மை, இரசாயனங்களின் வகைப்பாடு மற்றும் பெயரிடலுக்கான உலகளாவிய இணக்க அமைப்பைப் பயன்படுத்தி நான்கு நிலைகளாக வகைப்படுத்தப்பட்டது (அட்டவணை 3).
நோய்க்கடத்திகளால் பரவும் நோய்களை, குறிப்பாக கொசுக்கள் மற்றும் ஏடிஸ் கொசுக்களின் வகைகளைக் கட்டுப்படுத்துவது எகிப்தியர்களுக்கு இப்போது ஒரு கடினமான பணியாகும் 40,41,42,43,44,45,46. பைரெத்ராய்டுகள் மற்றும் ஆர்கனோபாஸ்பேட்டுகள் போன்ற இரசாயன ரீதியாகக் கிடைக்கும் சில பூச்சிக்கொல்லிகள் ஓரளவு நன்மை பயக்கும் என்றாலும், அவை நீரிழிவு, இனப்பெருக்கக் கோளாறுகள், நரம்பியல் கோளாறுகள், புற்றுநோய் மற்றும் சுவாச நோய்கள் உட்பட மனித ஆரோக்கியத்திற்கு குறிப்பிடத்தக்க அபாயங்களை ஏற்படுத்துகின்றன. மேலும், காலப்போக்கில், இந்தப் பூச்சிகள் அவற்றுக்கு எதிர்ப்புச் சக்தியைப் பெறக்கூடும்13,43,48. எனவே, பயனுள்ள மற்றும் சுற்றுச்சூழலுக்கு உகந்த உயிரியல் கட்டுப்பாட்டு நடவடிக்கைகள் கொசுக்களைக் கட்டுப்படுத்துவதற்கான மிகவும் பிரபலமான முறையாக மாறும்49,50. நகர்ப்புறங்களில் கொசு நோய்க்கடத்திகளை முன்கூட்டியே கட்டுப்படுத்துவது மிகவும் பயனுள்ளதாக இருக்கும் என்று பெனெல்லி51 பரிந்துரைத்தார், ஆனால் கிராமப்புறங்களில் லார்விசைடுகளைப் பயன்படுத்த அவர் பரிந்துரைக்கவில்லை52. கொசுக்கள் முதிர்ச்சியடையாத நிலையில் இருக்கும்போது அவற்றைக் கட்டுப்படுத்துவது பாதுகாப்பான மற்றும் எளிமையான உத்தியாக இருக்கும் என்று டாம் மற்றும் பலர்53 பரிந்துரைத்தனர், ஏனெனில் அவை கட்டுப்பாட்டுக் காரணிகளுக்கு அதிக உணர்திறன் கொண்டவை54.
ஒரு சக்திவாய்ந்த திரிபு (Enterobacter cloacae SJ2) மூலம் உயிரிமேற்பரப்பி உற்பத்தி, சீரான மற்றும் நம்பிக்கைக்குரிய செயல்திறனைக் காட்டியது. எங்களின் முந்தைய ஆய்வில், Enterobacter cloacae SJ2, இயற்பியல்-வேதியியல் அளவுருக்களைப் பயன்படுத்தி உயிரிமேற்பரப்பி உற்பத்தியை மேம்படுத்துகிறது என்று தெரிவிக்கப்பட்டது²⁶. அவர்களின் ஆய்வின்படி, ஒரு ஆற்றல்மிக்க E. cloacae தனிமத்தால் உயிரிமேற்பரப்பி உற்பத்தி செய்வதற்கான உகந்த நிலைமைகள்: 36 மணிநேர அடைகாத்தல், 150 rpm வேகத்தில் கலக்குதல், pH 7.5, 37 °C, உப்புத்தன்மை 1 ppt, கார்பன் மூலமாக 2% குளுக்கோஸ், 1% ஈஸ்ட். 2.61 g/L உயிரிமேற்பரப்பியைப் பெற, அந்தச் சாறு ஒரு நைட்ரஜன் மூலமாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. கூடுதலாக, அந்த உயிரிமேற்பரப்பிகள் TLC, FTIR மற்றும் MALDI-TOF-MS ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி வகைப்படுத்தப்பட்டன. இது ராம்னோலிப்பிட் ஒரு உயிரிமேற்பரப்பி என்பதை உறுதிப்படுத்தியது. கிளைக்கோலிப்பிட் உயிரிமேற்பரப்பிகள், மற்ற வகை உயிரிமேற்பரப்பிகளில் மிகவும் தீவிரமாக ஆய்வு செய்யப்பட்ட வகையாகும்⁵⁵. அவை கார்போஹைட்ரேட் மற்றும் லிப்பிட் பகுதிகளைக் கொண்டுள்ளன, முக்கியமாக கொழுப்பு அமிலச் சங்கிலிகள். கிளைகோலிப்பிட்களில், முக்கிய பிரதிநிதிகள் ராம்னோலிப்பிட் மற்றும் சோபோரோலிப்பிட்56 ஆகும். ராம்னோலிப்பிட்கள் மோனோ- அல்லது டை-β-ஹைட்ராக்ஸிடெகானோயிக் அமிலத்துடன் இணைக்கப்பட்ட இரண்டு ராம்னோஸ் பகுதிகளைக் கொண்டுள்ளன57. மருத்துவ மற்றும் மருந்துத் தொழில்களில் ராம்னோலிப்பிட்களின் பயன்பாடு நன்கு நிறுவப்பட்டுள்ளது58, கூடுதலாக அவை சமீபத்தில் பூச்சிக்கொல்லிகளாகவும் பயன்படுத்தப்படுகின்றன59.
சுவாசக் குழாயின் நீர் விலக்கும் பகுதியுடன் உயிரிமேற்பரப்பியின் இடைவினை, அதன் இலைத்துளைக் குழி வழியாக நீர் கடந்து செல்ல அனுமதிக்கிறது, இதன் மூலம் லார்வாக்கள் நீர்ச் சூழலுடன் அதிகத் தொடர்பைப் பெறுகின்றன. உயிரிமேற்பரப்பிகளின் இருப்பு, மேற்பரப்பிற்கு அருகில் உள்ள மூச்சுக்குழலையும் பாதிக்கிறது, இது லார்வாக்கள் மேற்பரப்பிற்கு ஊர்ந்து சென்று சுவாசிப்பதை எளிதாக்குகிறது. இதன் விளைவாக, நீரின் மேற்பரப்பு இழுவிசை குறைகிறது. லார்வாக்களால் நீரின் மேற்பரப்பில் ஒட்டிக்கொள்ள முடியாததால், அவை தொட்டியின் அடிப்பகுதிக்கு விழுகின்றன, இது நீர்நிலை அழுத்தத்தைச் சீர்குலைத்து, அதிகப்படியான ஆற்றல் செலவு மற்றும் நீரில் மூழ்கி இறப்பதற்கு வழிவகுக்கிறது38,60. இதேபோன்ற முடிவுகள் கிரிபி61 என்பவராலும் பெறப்பட்டன, அங்கு பேசில்லஸ் சப்டிலிஸ் மூலம் உற்பத்தி செய்யப்பட்ட ஒரு உயிரிமேற்பரப்பி, எபெஸ்டியா குஹ்னியேல்லாவிற்கு எதிராக லார்வாக்களைக் கொல்லும் செயல்பாட்டைக் காட்டியது. இதேபோல், சிஎக்ஸ். தாஸ் மற்றும் முகர்ஜி23 ஆகியோரின் லார்வாக்களைக் கொல்லும் செயல்பாடும், குவின்குஃபாசியேட்டஸ் லார்வாக்களின் மீது வளைய லிப்போபெப்டைடுகளின் விளைவை மதிப்பிட்டது.
இந்த ஆய்வின் முடிவுகள் Cx. கொசுக்களுக்கு எதிரான ராம்னோலிபிட் பயோசர்ஃபேக்டன்ட்களின் லார்வா கொல்லும் செயல்பாடு பற்றியவை. குவின்குஃபாசியேட்டஸ் கொசுக்களைக் கொல்வது முன்னர் வெளியிடப்பட்ட முடிவுகளுடன் ஒத்துப்போகிறது. எடுத்துக்காட்டாக, பேசில்லஸ் பேரினத்தைச் சேர்ந்த பல்வேறு பாக்டீரியாக்களால் உற்பத்தி செய்யப்படும் சர்ஃபேக்டின் அடிப்படையிலான பயோசர்ஃபேக்டன்ட்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. மற்றும் சூடோமோனாஸ் இனங்கள். சில ஆரம்பகால அறிக்கைகள்64,65,66 பேசில்லஸ் சப்டிலிஸிலிருந்து பெறப்பட்ட லிப்போபெப்டைட் பயோசர்ஃபேக்டன்ட்களின் லார்வா கொல்லும் செயல்பாட்டைப் பதிவு செய்துள்ளன23. தீபாலி மற்றும் பலர்.63 ஸ்டெனோட்ரோபோமோனாஸ் மால்டோஃபிலியாவிலிருந்து பிரித்தெடுக்கப்பட்ட ராம்னோலிபிட் பயோசர்ஃபேக்டன்ட் 10 மி.கி/லி செறிவில் சக்திவாய்ந்த லார்வா கொல்லும் செயல்பாட்டைக் கொண்டிருந்ததைக் கண்டறிந்தனர். சில்வா மற்றும் பலர்.67 ஏடிஸ் ஏஜிப்டிக்கு எதிராக ராம்னோலிபிட் பயோசர்ஃபேக்டன்ட்டின் லார்வா கொல்லும் செயல்பாட்டை 1 கி/லி செறிவில் பதிவு செய்தனர். கனக்டாண்டே மற்றும் பலர். பேசிலஸ் சப்டிலிஸ் மூலம் உற்பத்தி செய்யப்படும் லிப்போபெப்டைட் பயோசர்ஃபேக்டன்ட்கள், யூகலிப்டஸின் லிப்போஃபிலிக் பகுதியுடன் சேர்ந்து கியூலெக்ஸ் லார்வாக்கள் மற்றும் கரையான்களில் ஒட்டுமொத்த இறப்பை ஏற்படுத்தியதாக 68-ஆவது அறிக்கை தெரிவித்தது. இதேபோல், மசேந்திரா மற்றும் அவரது குழுவினர் 69-ஆவது அறிக்கையில், யூக்கலிப்டஸின் கச்சாச் சாற்றின் லிப்போஃபிலிக் n-ஹெக்சேன் மற்றும் EtOAc பகுதிகளில் வேலைக்கார எறும்புகளின் (Cryptotermes cynocephalus Light.) இறப்பு 61.7% ஆக இருந்ததாகத் தெரிவித்தனர்.
மலேரியா ஒட்டுண்ணியான பிளாஸ்மோடியத்தின் கடத்தியான அனோபிலிஸ் ஸ்டீஃபன்சிக்கு எதிராக, பேசில்லஸ் சப்டிலிஸ் A1 மற்றும் சூடோமோனாஸ் ஸ்டுட்செரி NA3 ஆகியவற்றால் உற்பத்தி செய்யப்பட்ட லிப்போபெப்டைட் பயோசர்ஃபேக்டன்ட்களின் பூச்சிக்கொல்லிப் பயன்பாட்டை பார்த்திபன் மற்றும் குழுவினர் 70 அறிக்கை செய்தனர். வெவ்வேறு செறிவுகளில் பயோசர்ஃபேக்டன்ட்களுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டபோது, லார்வாக்களும் கூட்டுப்புழுக்களும் நீண்ட காலம் உயிர் வாழ்ந்தன, குறுகிய முட்டையிடும் காலங்களைக் கொண்டிருந்தன, மலட்டுத்தன்மையுடன் இருந்தன, மற்றும் குறுகிய ஆயுட்காலத்தைக் கொண்டிருந்தன என்பதை அவர்கள் கண்டறிந்தனர். பேசில்லஸ் சப்டிலிஸ் பயோசர்ஃபேக்டன்ட் A1-இன் கண்டறியப்பட்ட LC50 மதிப்புகள், வெவ்வேறு லார்வா நிலைகளுக்கு (அதாவது லார்வா I, II, III, IV மற்றும் கூட்டுப்புழு நிலை) முறையே 3.58, 4.92, 5.37, 7.10 மற்றும் 7.99 மி.கி/லி ஆக இருந்தன. ஒப்பிடுகையில், சூடோமோனாஸ் ஸ்டுட்செரி NA3 இன் லார்வா நிலைகள் I-IV மற்றும் கூட்டுப்புழு நிலைகளுக்கான பயோசர்ஃபேக்டன்ட்கள் முறையே 2.61, 3.68, 4.48, 5.55 மற்றும் 6.99 மி.கி/லி ஆக இருந்தன. உயிர் பிழைத்த லார்வாக்கள் மற்றும் கூட்டுப்புழுக்களின் தாமதமான பருவகால நிகழ்வானது, பூச்சிக்கொல்லி சிகிச்சைகளால் ஏற்படும் குறிப்பிடத்தக்க உடலியல் மற்றும் வளர்சிதை மாற்றக் கோளாறுகளின் விளைவாகக் கருதப்படுகிறது71.
விக்கர்ஹாமோமைசஸ் அனோமலஸ் திரிபு CCMA 0358, ஏடிஸ் கொசுக்களுக்கு எதிராக 100% புழுக்கொல்லிச் செயல்பாடு கொண்ட ஒரு உயிர்மேற்பரப்பியை உற்பத்தி செய்கிறது. ஏஜிப்டி 24-மணி நேர இடைவெளி 38, சில்வா மற்றும் குழுவினரால் தெரிவிக்கப்பட்டதை விட அதிகமாக இருந்தது. சூரியகாந்தி எண்ணெயை ஒரு கார்பன் மூலமாகப் பயன்படுத்தி சூடோமோனாஸ் ஏருகினோசாவிலிருந்து தயாரிக்கப்பட்ட ஒரு உயிர்மேற்பரப்பி, 48 மணி நேரத்திற்குள் 100% புழுக்களைக் கொல்வதாகக் காட்டப்பட்டுள்ளது 67. அபினயா மற்றும் குழுவினர்.72 மற்றும் பிரதான் மற்றும் குழுவினர்.73 ஆகியோரும் பேசில்லஸ் பேரினத்தின் பல தனித்த பிரிவுகளால் உற்பத்தி செய்யப்படும் மேற்பரப்பிகளின் புழுக்கொல்லி அல்லது பூச்சிக்கொல்லி விளைவுகளை நிரூபித்துள்ளனர். செந்தில்-நாதன் மற்றும் குழுவினரால் முன்னர் வெளியிடப்பட்ட ஒரு ஆய்வில், தாவரக் குளங்களுக்கு வெளிப்படுத்தப்பட்ட 100% கொசுப் புழுக்களும் இறக்க வாய்ப்புள்ளது என்று கண்டறியப்பட்டது. 74.
பூச்சிகளின் உயிரியலில் பூச்சிக்கொல்லிகளின் உயிரிழப்பை ஏற்படுத்தாத விளைவுகளை மதிப்பிடுவது, ஒருங்கிணைந்த பூச்சி மேலாண்மைத் திட்டங்களுக்கு மிகவும் முக்கியமானது. ஏனெனில், உயிரிழப்பை ஏற்படுத்தாத அளவுகள்/செறிவுகள் பூச்சிகளைக் கொல்வதில்லை, ஆனால் அவற்றின் உயிரியல் பண்புகளைச் சீர்குலைப்பதன் மூலம் எதிர்கால சந்ததிகளில் பூச்சிகளின் எண்ணிக்கையைக் குறைக்கக்கூடும்¹⁰. சிகுவேரா மற்றும் குழுவினர்⁷⁵, 50 முதல் 300 மி.கி/மி.லி வரையிலான பல்வேறு செறிவுகளில் சோதிக்கப்பட்டபோது, ராம்னோலிபிட் பயோசர்ஃபேக்டன்ட்டின் (300 மி.கி/மி.லி) முழுமையான புழுக்கொல்லிச் செயல்பாட்டை (100% இறப்பு) கண்டறிந்தனர். இது ஏடிஸ் ஏஜிப்டி வகைகளின் புழுப் பருவத்தில் காணப்பட்டது. இறப்பதற்கான நேரம் மற்றும் உயிரிழப்பை ஏற்படுத்தாத செறிவுகள், புழுக்களின் உயிர்வாழ்வு மற்றும் நீச்சல் செயல்பாட்டில் ஏற்படுத்தும் விளைவுகளை அவர்கள் பகுப்பாய்வு செய்தனர். கூடுதலாக, உயிரிசர்ஃபேக்டன்ட்டின் உயிரிழப்பை ஏற்படுத்தாத செறிவுகளுக்கு (எ.கா., 50 மி.கி/மி.லி மற்றும் 100 மி.கி/மி.லி) 24-48 மணிநேரம் வெளிப்பட்ட பிறகு நீச்சல் வேகம் குறைந்ததையும் அவர்கள் கண்டறிந்தனர். உயிரிழப்பை ஏற்படுத்தாத நம்பிக்கைக்குரிய பங்குகளைக் கொண்ட விஷங்கள், வெளிப்படும் பூச்சிகளுக்குப் பல மடங்கு சேதத்தை ஏற்படுத்துவதில் அதிக செயல்திறன் கொண்டவையாகக் கருதப்படுகின்றன⁷⁶.
எங்கள் முடிவுகளின் திசுவியல் ஆய்வுகள், Enterobacter cloacae SJ2 ஆல் உற்பத்தி செய்யப்படும் உயிர்மேற்பரப்பிகள் கொசு (Cx. quinquefasciatus) மற்றும் கரையான் (O. obesus) லார்வாக்களின் திசுக்களை குறிப்பிடத்தக்க அளவில் மாற்றியமைக்கின்றன என்பதைக் காட்டுகின்றன. An. gambiaes மற்றும் An. arabica ஆகியவற்றில் துளசி எண்ணெய் தயாரிப்புகளால் இதேபோன்ற அசாதாரணங்கள் ஏற்பட்டதாக Ochola77 விவரித்துள்ளார். காமராஜ் மற்றும் அவரது குழுவினரும், தங்க நானோ துகள்களுக்கு உட்படுத்தப்பட்ட An. aegypti லார்வாக்களில் இதே போன்ற உருவவியல் அசாதாரணங்களை விவரித்துள்ளனர். வசந்தா-சீனிவாசன் மற்றும் அவரது குழுவினர், ஷெப்பர்ட்ஸ் பர்ஸ் அத்தியாவசிய எண்ணெய் Aedes albopictus, Aedes aegypti ஆகியவற்றின் அறை மற்றும் எபிதீலியல் அடுக்குகளை கடுமையாக சேதப்படுத்தியதாக தெரிவித்துள்ளனர். ராகவேந்திரன் மற்றும் அவரது குழுவினர், கொசு லார்வாக்களுக்கு உள்ளூர் Penicillium பூஞ்சையின் 500 mg/ml மைசீலியல் சாறு கொண்டு சிகிச்சை அளித்ததாக தெரிவித்துள்ளனர். Aedes aegypti மற்றும் Cx. aegypti ஆகியவை கடுமையான திசுவியல் சேதத்தைக் காட்டுகின்றன. இறப்பு விகிதம் 80. முன்னதாக, அபினயா மற்றும் ஸ்டீபன்சி ஆகியோர் ஏடிஸ் ஏஜிப்டியின் நான்காம் நிலை லார்வாக்களை ஆய்வு செய்தனர். பி. லைகெனிஃபார்மிஸ் எக்ஸோபாலிசாக்கரைடுகளால் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஏடிஸ் ஏஜிப்டியில், இரைப்பைக் குடல்வால், தசைச் சிதைவு, நரம்புத் தண்டு கேங்க்லியாவின் சேதம் மற்றும் ஒழுங்கின்மை உள்ளிட்ட பல திசுவியல் மாற்றங்களை அவர்கள் கண்டறிந்தனர்72. ராகவேந்திரன் மற்றும் பலரின் கூற்றுப்படி, பி. டேலியே மைசீலியல் சாற்றைக் கொண்டு சிகிச்சையளித்த பிறகு, பரிசோதிக்கப்பட்ட கொசுக்களின் (4ஆம் நிலை லார்வாக்கள்) நடுக்குடல் செல்கள் குடல் குழியின் வீக்கம், செல்களுக்கு இடையேயான உள்ளடக்கங்களில் குறைவு மற்றும் உட்கரு சிதைவு ஆகியவற்றைக் காட்டின81. எக்கினேசியா இலைச் சாற்றைக் கொண்டு சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட கொசு லார்வாக்களிலும் இதே திசுவியல் மாற்றங்கள் காணப்பட்டன, இது சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட சேர்மங்களின் பூச்சிக்கொல்லித் திறனைக் குறிக்கிறது50.
ECOSAR மென்பொருளின் பயன்பாடு சர்வதேச அங்கீகாரத்தைப் பெற்றுள்ளது82. தற்போதைய ஆராய்ச்சி, ECOSAR உயிர்மேற்பரப்பிகளின் நுண்பாசிகள் (C. vulgaris), மீன்கள் மற்றும் நீர் ஈக்கள் (D. magna) மீதான கடுமையான நச்சுத்தன்மையானது, ஐக்கிய நாடுகள் சபையால் வரையறுக்கப்பட்ட "நச்சுத்தன்மை" என்ற வகைக்குள் அடங்குவதாகக் கூறுகிறது83. ECOSAR சூழல்நச்சுத்தன்மை மாதிரியானது, பொருட்களின் கடுமையான மற்றும் நீண்டகால நச்சுத்தன்மையைக் கணிக்க SAR மற்றும் QSAR-ஐப் பயன்படுத்துகிறது, மேலும் இது பெரும்பாலும் கரிம மாசுபடுத்திகளின் நச்சுத்தன்மையைக் கணிக்கப் பயன்படுத்தப்படுகிறது82,84.
இந்த ஆய்வில் பயன்படுத்தப்பட்ட பாராஃபார்மால்டிஹைட், சோடியம் பாஸ்பேட் இடையகக் கரைசல் (pH 7.4) மற்றும் பிற அனைத்து வேதிப்பொருட்களும் இந்தியாவின் ஹைமீடியா ஆய்வகங்களிலிருந்து வாங்கப்பட்டன.
ஒரே ஒரு கார்பன் மூலமாக 1% கச்சா எண்ணெய் சேர்க்கப்பட்ட, 200 மிலி கிருமியழிக்கப்பட்ட புஷ்னெல் ஹாஸ் ஊடகத்தைக் கொண்ட 500 மிலி எர்லன்மேயர் குடுவைகளில் உயிரிமேற்பரப்பி உற்பத்தி மேற்கொள்ளப்பட்டது. என்டரோபாக்டர் குளோகே SJ2 (1.4 × 10⁴ CFU/ml) இன் ஒரு முன்வளர்ப்பு, 37°C வெப்பநிலையில், 200 rpm வேகத்தில் ஒரு சுற்று அசைப்பானில் 7 நாட்களுக்கு இடப்பட்டு வளர்க்கப்பட்டது. அடைகாக்கும் காலத்திற்குப் பிறகு, வளர்ப்பு ஊடகத்தை 4°C வெப்பநிலையில் 20 நிமிடங்களுக்கு 3400×g வேகத்தில் மையவிலக்கு செய்வதன் மூலம் உயிரிமேற்பரப்பி பிரித்தெடுக்கப்பட்டது, மேலும் அதன் விளைவாகக் கிடைத்த மேல்தேங்கிய திரவம் பரிசோதனை நோக்கங்களுக்காகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. உயிரிமேற்பரப்பிகளின் உகப்பாக்க நடைமுறைகள் மற்றும் பண்புக்கூறுகள் எங்கள் முந்தைய ஆய்விலிருந்து²⁶ தழுவப்பட்டன.
க்யூலெக்ஸ் குவின்குஃபாசியேட்டஸ் கொசுப்புழுக்கள், தமிழ்நாட்டின் பாலஞ்சிபேட்டையில் உள்ள கடல்சார் உயிரியல் மேம்பாட்டு ஆய்வு மையத்திலிருந்து (CAS) பெறப்பட்டன. அப்புழுக்கள், அயனியகற்றப்பட்ட நீர் நிரப்பப்பட்ட நெகிழிப் பாத்திரங்களில் 27 ± 2°C வெப்பநிலையிலும், 12:12 (ஒளி:இருள்) ஒளிக்கால அளவிலும் வளர்க்கப்பட்டன. கொசுப்புழுக்களுக்கு 10% குளுக்கோஸ் கரைசல் உணவாக அளிக்கப்பட்டது.
திறந்த மற்றும் பாதுகாப்பற்ற கழிவுநீர்த் தொட்டிகளில் கியூலெக்ஸ் குவின்குஃபாசியேட்டஸ் புழுக்கள் காணப்பட்டுள்ளன. ஆய்வகத்தில் புழுக்களை அடையாளம் கண்டு வளர்க்க, நிலையான வகைப்பாட்டு வழிகாட்டுதல்களைப் பயன்படுத்தவும்85. புழுக்கொல்லி சோதனைகள் உலக சுகாதார அமைப்பின் பரிந்துரைகளின்படி மேற்கொள்ளப்பட்டன86. SH. குவின்குஃபாசியேட்டஸின் நான்காம் நிலை புழுக்கள், அவற்றின் கொள்ளளவில் மூன்றில் இரண்டு பங்கு காற்று இடைவெளியுடன், 25 மிலி மற்றும் 50 மிலி குழுக்களாக மூடப்பட்ட குழாய்களில் சேகரிக்கப்பட்டன. ஒவ்வொரு குழாயிலும் தனித்தனியாக பயோசர்ஃபேக்டன்ட் (0–50 மி.கி/மிலி) சேர்க்கப்பட்டு 25 °C வெப்பநிலையில் சேமிக்கப்பட்டது. கட்டுப்பாட்டுக் குழாயில் காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர் (50 மிலி) மட்டுமே பயன்படுத்தப்பட்டது. அடைகாக்கும் காலத்தில் (12–48 மணிநேரம்) நீந்துவதற்கான எந்த அறிகுறிகளையும் காட்டாத புழுக்கள் இறந்தவையாகக் கருதப்பட்டன87. சமன்பாட்டைப் பயன்படுத்தி புழு இறப்பு சதவீதத்தைக் கணக்கிடுங்கள். (1)88.
ஒடோன்டோடெர்மிடிடே குடும்பத்தில், வேளாண் வளாகத்தில் (அண்ணாமலை பல்கலைக்கழகம், இந்தியா) அழுகும் மரக்கட்டைகளில் காணப்படும் ஒடோன்டோடெர்ம்ஸ் ஒபீசஸ் என்ற இந்தியக் கரையான் அடங்கும். இந்த பயோசர்ஃபேக்டன்ட் (0–50 மி.கி/மி.லி) தீங்கு விளைவிப்பதா என்பதைத் தீர்மானிக்க, வழக்கமான நடைமுறைகளைப் பயன்படுத்தி இதைச் சோதிக்கவும். 30 நிமிடங்களுக்கு லேமினார் காற்று ஓட்டத்தில் உலர்த்திய பிறகு, வாட்மேன் காகிதத்தின் ஒவ்வொரு துண்டும் 30, 40, அல்லது 50 மி.கி/மி.லி செறிவில் பயோசர்ஃபேக்டன்ட் கொண்டு பூசப்பட்டது. முன் பூசப்பட்ட மற்றும் பூசப்படாத காகிதத் துண்டுகள் ஒரு பெட்ரி தட்டின் மையத்தில் சோதிக்கப்பட்டு ஒப்பிடப்பட்டன. ஒவ்வொரு பெட்ரி தட்டிலும் சுமார் முப்பது சுறுசுறுப்பான ஓ. ஒபீசஸ் கரையான்கள் இருந்தன. கட்டுப்பாடு மற்றும் சோதனை கரையான்களுக்கு ஈரமான காகிதம் உணவு ஆதாரமாக வழங்கப்பட்டது. அடைகாக்கும் காலம் முழுவதும் அனைத்துத் தட்டுகளும் அறை வெப்பநிலையில் வைக்கப்பட்டன. கரையான்கள் 12, 24, 36 மற்றும் 48 மணி நேரங்களுக்குப் பிறகு இறந்தன89,90. வெவ்வேறு பயோசர்ஃபேக்டன்ட் செறிவுகளில் கரையான் இறப்பு சதவீதத்தை மதிப்பிடுவதற்குச் சமன்பாடு 1 பயன்படுத்தப்பட்டது. (2).
மாதிரிகள் பனிக்கட்டியில் வைக்கப்பட்டு, 100 மிலி 0.1 M சோடியம் பாஸ்பேட் இடையகக் கரைசல் (pH 7.4) கொண்ட நுண்குழாய்களில் அடைக்கப்பட்டு, மேலதிக பகுப்பாய்விற்காக தமிழ்நாடு, இந்தியா, மயிலாடுதுறை மாவட்டம், சீர்காளியில் உள்ள ராஜீவ் காந்தி மீன்வளர்ப்பு மையத்தின் (RGCA) மத்திய மீன்வளர்ப்பு நோயியல் ஆய்வகத்திற்கு (CAPL) அனுப்பப்பட்டன. மாதிரிகள் உடனடியாக 37°C வெப்பநிலையில் 48 மணி நேரத்திற்கு 4% பாராஃபார்மால்டிஹைடில் நிலைப்படுத்தப்பட்டன.
நிலைப்படுத்தும் கட்டத்திற்குப் பிறகு, அந்தப் பொருள் 0.1 M சோடியம் பாஸ்பேட் இடையகக் கரைசலால் (pH 7.4) மூன்று முறை கழுவப்பட்டு, எத்தனாலில் படிப்படியாக நீர் நீக்கம் செய்யப்பட்டு, 7 நாட்களுக்கு லெய்கா ரெசினில் ஊறவைக்கப்பட்டது. பின்னர் அந்தப் பொருள், ரெசின் மற்றும் பாலிமரைசர் நிரப்பப்பட்ட ஒரு பிளாஸ்டிக் அச்சில் வைக்கப்பட்டு, அப்பொருள் அடங்கிய கட்டியானது முழுமையாகப் பாலிமரைஸ் ஆகும் வரை 37°C வெப்பநிலைக்குச் சூடுபடுத்தப்பட்ட ஒரு சூளையில் வைக்கப்பட்டது.
பாலிமரைசேஷனுக்குப் பிறகு, அந்தத் தொகுதிகள் LEICA RM2235 மைக்ரோடோமைப் (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, USA) பயன்படுத்தி 3 மிமீ தடிமனுக்கு வெட்டப்பட்டன. அந்தத் துண்டுகள், ஒரு ஸ்லைடில் ஆறு துண்டுகள் வீதம், ஸ்லைடுகளில் தொகுக்கப்பட்டன. ஸ்லைடுகள் அறை வெப்பநிலையில் உலர்த்தப்பட்டு, பின்னர் 7 நிமிடங்களுக்கு ஹெமடாக்ஸிலின் கொண்டு சாயமேற்றப்பட்டு, 4 நிமிடங்களுக்கு ஓடும் நீரில் கழுவப்பட்டன. மேலும், ஈயோசின் கரைசலைத் தோலில் 5 நிமிடங்களுக்குப் பூசி, 5 நிமிடங்களுக்கு ஓடும் நீரில் கழுவவும்.
பல்வேறு வெப்பமண்டல நிலைகளில் உள்ள நீர்வாழ் உயிரினங்களைப் பயன்படுத்தி கடுமையான நச்சுத்தன்மை கணிக்கப்பட்டது: 96-மணி நேர மீன் LC50, 48-மணி நேர D. magna LC50, மற்றும் 96-மணி நேர பச்சைப்பாசி EC50. அமெரிக்க சுற்றுச்சூழல் பாதுகாப்பு முகமையால் உருவாக்கப்பட்ட விண்டோஸுக்கான ECOSAR மென்பொருள் பதிப்பு 2.2-ஐப் பயன்படுத்தி, மீன்கள் மற்றும் பச்சைப்பாசிகளுக்கு ராம்னோலிபிட் பயோசர்ஃபேக்டன்ட்களின் நச்சுத்தன்மை மதிப்பிடப்பட்டது. (https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model என்ற இணையதளத்தில் கிடைக்கிறது).
புழுக்கொல்லி மற்றும் கரையான் எதிர்ப்புச் செயல்பாட்டிற்கான அனைத்து சோதனைகளும் மும்முறை மேற்கொள்ளப்பட்டன. புழு மற்றும் கரையான் இறப்புத் தரவுகளின் நேரியல் அல்லாத பின்னடைவு (மருந்தளவு-பதில் மாறிகளின் மடக்கை) மூலம் 95% நம்பிக்கை இடைவெளியுடன் இடைநிலை மரணச் செறிவு (LC50) கணக்கிடப்பட்டது, மேலும் செறிவு-பதில் வளைவுகள் Prism® (பதிப்பு 8.0, GraphPad Software) Inc., USA) 84, 91 ஐப் பயன்படுத்தி உருவாக்கப்பட்டன.
தற்போதைய ஆய்வு, என்டரோபாக்டர் குளோகே SJ2 ஆல் உற்பத்தி செய்யப்படும் நுண்ணுயிர் உயிர்மேற்பரப்பிகளின் கொசுப்புழுக்கொல்லி மற்றும் கரையான் எதிர்ப்பு முகவர்களாக உள்ள திறனை வெளிப்படுத்துகிறது. மேலும், இந்த ஆய்வு கொசுப்புழுக்கொல்லி மற்றும் கரையான் எதிர்ப்புச் செயல்பாட்டின் வழிமுறைகளைப் பற்றி நன்கு புரிந்துகொள்ள உதவும். உயிர்மேற்பரப்பிகளால் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட புழுக்களின் திசுவியல் ஆய்வுகள், செரிமானப் பாதை, நடுக்குடல், பெருமூளைப் புறணி ஆகியவற்றில் சேதத்தையும், குடல் எபிதீலியல் செல்களின் மிகைப்பெருக்கத்தையும் காட்டின. முடிவுகள்: என்டரோபாக்டர் குளோகே SJ2 ஆல் உற்பத்தி செய்யப்படும் ராம்னோலிப்பிட் உயிர்மேற்பரப்பியின் கரையான் எதிர்ப்பு மற்றும் கொசுப்புழுக்கொல்லி செயல்பாட்டின் நச்சுயியல் மதிப்பீடு, இந்தத் தனிமம் கொசுக்கள் (Cx quinquefasciatus) மற்றும் கரையான்கள் (O. obesus) மூலம் பரவும் நோய்களைக் கட்டுப்படுத்துவதற்கான ஒரு ஆற்றல்மிக்க உயிரிப் பூச்சிக்கொல்லி என்பதை வெளிப்படுத்தியது. உயிர்மேற்பரப்பிகளின் உள்ளார்ந்த சுற்றுச்சூழல் நச்சுத்தன்மை மற்றும் அவற்றின் சாத்தியமான சுற்றுச்சூழல் தாக்கங்களைப் புரிந்துகொள்ள வேண்டிய அவசியம் உள்ளது. இந்த ஆய்வு, உயிர்மேற்பரப்பிகளின் சுற்றுச்சூழல் அபாயத்தை மதிப்பிடுவதற்கு ஒரு அறிவியல் அடிப்படையை வழங்குகிறது.
பதிவிட்ட நேரம்: ஏப்ரல்-09-2024
