தாவர மற்றும் நோய்க்கிருமி பொருட்கள்
சோளம் மாற்றுத் தொகுதி (SCP) என அறியப்படும் ஒரு சோளத் தொடர்பு வரைபடத் தொகுதியை, இல்லினாய்ஸ் பல்கலைக்கழகத்தைச் சேர்ந்த (தற்போது UC டேவிஸில் உள்ள) டாக்டர் பேட் பிரவுன் வழங்கினார். இது முன்னர் விவரிக்கப்பட்டுள்ளது. மேலும் இது, அமெரிக்கச் சூழல்களில் தாவரங்களின் வளர்ச்சி மற்றும் மேம்பாட்டிற்கு வசதியாக, ஒளிக்கால உணர்வின்மை மற்றும் சிறிய உருவத்திற்கு மாற்றப்பட்ட பல்வேறு ரகங்களின் தொகுப்பாகும். இந்தத் தொகுதியிலிருந்து 510 ரகங்கள் இந்த ஆய்வில் பயன்படுத்தப்பட்டன. இருப்பினும், மோசமான முளைப்பு மற்றும் பிற தரக்கட்டுப்பாட்டுச் சிக்கல்கள் காரணமாக, மூன்று பண்புகளின் பகுப்பாய்விலும் அனைத்து ரகங்களும் பயன்படுத்தப்படவில்லை. இறுதியாக, கைட்டின் விளைவுப் பகுப்பாய்விற்கு 345 ரகங்களின் தரவுகளும், flg22 விளைவிற்கு 472 ரகங்களின் தரவுகளும், TLS எதிர்ப்பாற்றலுக்கு 456 ரகங்களின் தரவுகளும் பயன்படுத்தப்பட்டன.பி. குக்கிLSLP18 என்ற திரிபு, ஆர்கன்சாஸ் பல்கலைக்கழகத்தைச் சேர்ந்த டாக்டர் பர்ட் ப்ளூம் அவர்களிடமிருந்து பெறப்பட்டது.
MAMP பதில் அளவீடு
இந்த ஆய்வில் flg22 (ஜென்ஸ்கிரிப்ட் பட்டியல் எண்# RP19986) மற்றும் கைட்டின் என இரண்டு வெவ்வேறு MAMP-கள் பயன்படுத்தப்பட்டன. பசுமைக்குடிலில், மண் (33% சன்ஷைன் ரெடி-எர்த் ப்ரோ க்ரோயிங் மிக்ஸ்) நிரப்பப்பட்ட தட்டுகளின் மீது வைக்கப்பட்ட செருகிகளில் சோளச் செடிகள் வளர்க்கப்பட்டன. மாதிரி சேகரிக்கும் நாளில் இலைகளில் கூடுதல் ஈரப்பதம் ஏற்படுவதைத் தவிர்ப்பதற்காக, மாதிரி சேகரிப்பிற்கு முந்தைய நாள் செடிகளுக்குத் தண்ணீர் பாய்ச்சப்பட்டது.
மரபணுத் தொடர்கள் சீரற்ற முறையில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டு, தளவாடக் காரணங்களுக்காக, 60 மரபணுத் தொடர்கள் கொண்ட தொகுதிகளாக நடப்பட்டன. ஒவ்வொரு மரபணுத் தொடருக்கும், தலா இரண்டு விதைகள் கொண்ட மூன்று 'தொட்டிகளில்' விதைகள் நடப்பட்டன. முந்தைய தொகுதி செயலாக்கப்பட்டவுடன், முழு இனத்தொகையும் மதிப்பிடப்படும் வரை அடுத்தடுத்த தொகுதிகள் நடப்பட்டன. இரண்டு MAMP-களுக்கும் தலா இரண்டு சோதனை ஓட்டங்கள் நடத்தப்பட்டன; இந்த இரண்டு ஓட்டங்களிலும் மரபணு வகைகள் மீண்டும் சீரற்ற முறையில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன.
ROS சோதனைகள் முன்பு விவரிக்கப்பட்டபடி மேற்கொள்ளப்பட்டன. சுருக்கமாக, ஒவ்வொரு ரகத்திற்கும், ஆறு விதைகள் 3 வெவ்வேறு தொட்டிகளில் நடப்பட்டன. அதன் விளைவாக உருவான நாற்றுகளில், சீரான தன்மையின் அடிப்படையில் மூன்று தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன. அசாதாரணமாகத் தோற்றமளித்த அல்லது பெரும்பான்மையை விட கணிசமாக உயரமாகவோ அல்லது குட்டையாகவோ இருந்த நாற்றுகள் பயன்படுத்தப்படவில்லை. மூன்று வெவ்வேறு 15-நாள் வயதுடைய சோளச் செடிகளின் 4வது இலையின் அகலமான பகுதியிலிருந்து 3 மிமீ விட்டம் கொண்ட நான்கு இலைத் துண்டுகள் வெட்டி எடுக்கப்பட்டன. இரண்டு செடிகளிலிருந்து ஒரு இலைக்கு ஒரு துண்டும், ஒரு செடியிலிருந்து இரண்டு துண்டுகளும் எடுக்கப்பட்டன; இதில் இரண்டாவது துண்டு நீர்க் கட்டுப்பாடாக (கீழே காண்க) ஆனது. அந்தத் துண்டுகள் ஒவ்வொன்றும் ஒரு கருப்பு நிற 96-குழித் தட்டில் 50 µl நீரில் தனித்தனியாக மிதக்கவிடப்பட்டு, ஒளி படாமல் இருக்க அலுமினிய முத்திரையால் மூடப்பட்டு, இரவு முழுவதும் அறை வெப்பநிலையில் வைக்கப்பட்டன. அடுத்த நாள் காலையில், 2 மி.கி/மி.லி வேதி ஒளிரும் ஆய்வுக்கருவி L-012 (வாக்கோ, பட்டியல் எண் 120-04891), 2 மி.கி/மி.லி ஹார்ஸ்ராடிஷ் பெராக்ஸைடு (வகை VI-A, சிக்மா-ஆல்ட்ரிச், பட்டியல் எண் P6782), மற்றும் 100 மி.கி/மி.லி கைட்டின் அல்லது 2 μM Flg22 ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி ஒரு வினைக்கரைசல் தயாரிக்கப்பட்டது. இந்த வினைக்கரைசலில் இருந்து 50 µl, நான்கு கிணறுகளில் மூன்றில் சேர்க்கப்பட்டது. நான்காவது கிணறு ஒரு மாதிரிக் கட்டுப்பாடாக இருந்தது, அதில் MAMP நீக்கப்பட்ட வினைக்கரைசல் சேர்க்கப்பட்டது. ஒவ்வொரு தட்டிலும் தண்ணீர் மட்டுமே கொண்ட நான்கு வெற்று கிணறுகளும் சேர்க்கப்பட்டன.
வினைக்கரைசலைச் சேர்த்த பிறகு, சினர்ஜிTM 2 மல்டி-டிடெக்ஷன் மைக்ரோபிளேட் ரீடரைப் (பயோடெக்) பயன்படுத்தி 1 மணி நேரத்திற்கு ஒவ்வொரு 2 நிமிடங்களுக்கும் ஒளிர்வு அளவிடப்பட்டது. இந்த 1 மணி நேரத்தில், பிளேட் ரீடர் ஒவ்வொரு 2 நிமிடங்களுக்கும் ஒளிர்வு அளவீடுகளை எடுக்கிறது. ஒவ்வொரு கிணற்றுக்குமான மதிப்பைக் கொடுக்க, அனைத்து 31 அளவீடுகளின் கூட்டுத்தொகை கணக்கிடப்பட்டது. ஒவ்வொரு மரபணு வகைக்குமான MAMP பதிலுக்கான மதிப்பிடப்பட்ட மதிப்பு, (மூன்று சோதனைக் கிணறுகளின் சராசரி ஒளிர்வு மதிப்பு—போலிக் கிணற்றின் மதிப்பு) - சராசரி வெற்றுக்கிணற்றின் மதிப்பைக் கழிப்பதன் மூலம் கணக்கிடப்பட்டது. வெற்றுக்கிணற்றின் மதிப்புகள் தொடர்ந்து பூஜ்ஜியத்திற்கு மிக அருகில் இருந்தன.
இலை வட்டுகள்நிகோடியானா பெந்தாமியானாமேலும், தரக் கட்டுப்பாட்டு நோக்கங்களுக்காக, ஒவ்வொரு 96-குழித் தட்டிலும், அதிகப் பலனளிக்கும் ஒரு சோள ரகமும் (SC0003), குறைந்தப் பலனளிக்கும் ஒரு சோள ரகமும் (PI 6069) கட்டுப்பாடுகளாகச் சேர்க்கப்பட்டன.
பி. குக்கிநோய்க்கிருமித் தயாரிப்பு மற்றும் ஊசி போடுதல்
பி. குக்கிமுன்னர் விவரிக்கப்பட்டபடி இனோகுலம் தயாரிக்கப்பட்டது. சுருக்கமாக, சோள தானியங்கள் மூன்று நாட்களுக்கு நீரில் ஊறவைக்கப்பட்டு, அலசப்பட்டு, 1 லிட்டர் கூம்பு வடிவ குடுவைகளில் அள்ளப்பட்டு, 15psi மற்றும் 121 °C வெப்பநிலையில் ஒரு மணி நேரம் ஆட்டோகிளேவ் செய்யப்பட்டன. பின்னர் அந்த தானியங்களில், ஒரு புதிய வளர்ப்பிலிருந்து எடுக்கப்பட்ட சுமார் 5 மில்லி நசுக்கப்பட்ட மைசீலியம் இடப்பட்டது.பி. குக்கிLSLP18 தனிமங்கள் பிரித்தெடுக்கப்பட்டு, அறை வெப்பநிலையில் 2 வாரங்களுக்கு வைக்கப்பட்டன; ஒவ்வொரு 3 நாட்களுக்கும் குடுவைகள் குலுக்கப்பட்டன. 2 வாரங்களுக்குப் பிறகு, பூஞ்சை தாக்கிய சோள தானியங்கள் காற்றில் உலர்த்தப்பட்டு, பின்னர் வயலில் நோயூட்டம் செய்யும் வரை 4 °C வெப்பநிலையில் சேமிக்கப்பட்டன. இந்த முழு சோதனைக்கும் அதே நோயூக்கி கலவையே பயன்படுத்தப்பட்டது, மேலும் இது ஒவ்வொரு ஆண்டும் புதிதாகத் தயாரிக்கப்பட்டது. நோயூட்டம் செய்வதற்காக, 4-5 வார வயதுடைய சோளச் செடிகளின் சுழல் தண்டுகளில் 6-10 பூஞ்சை தாக்கிய தானியங்கள் இடப்பட்டன. இந்தப் பூஞ்சைகளிலிருந்து உருவான வித்துக்கள், ஒரு வாரத்திற்குள் இளம் சோளச் செடிகளில் நோய்த்தொற்றைத் தொடங்கின.
விதை தயாரிப்பு
வயலில் விதைப்பதற்கு முன், சோள விதைகளில் சுமார் 1% ஸ்பைராடோ 480 FS பூஞ்சைக்கொல்லி, 4% செப்ரிங் 480 FS பூஞ்சைக்கொல்லி, 3% சோர்ப்ரோ 940 ES விதை பாதுகாப்பான் ஆகியவற்றைக் கொண்ட பூஞ்சைக்கொல்லி, பூச்சிக்கொல்லி மற்றும் பாதுகாப்பான் கலவை கொண்டு விதை நேர்த்தி செய்யப்பட்டது. பின்னர், அந்த விதைகள் 3 நாட்களுக்குக் காற்றில் உலர்த்தப்பட்டன. இது விதைகளைச் சுற்றி இந்தக் கலவையின் ஒரு மெல்லிய பூச்சை உருவாக்கியது. இந்தப் பாதுகாப்பான், டூயல் மேக்னம் என்ற களைக்கொல்லியை முளைப்பதற்கு முந்தைய சிகிச்சையாகப் பயன்படுத்த அனுமதித்தது.
இலக்கு இலைப்புள்ளி எதிர்ப்புத்திறன் மதிப்பீடு
SCP ஆனது, வட கரோலினாவின் கிளேட்டனில் உள்ள மத்திய பயிர் ஆராய்ச்சி நிலையத்தில், ஜூன் 14–15, 2017 மற்றும் ஜூன் 20, 2018 ஆகிய தேதிகளில், ஒவ்வொரு சந்தர்ப்பத்திலும் இரண்டு சோதனைப் பிரதிகளுடன் ஒரு சீரற்ற முழுமையான தொகுதி வடிவமைப்பில் நடப்பட்டது. சோதனைகள், ஒரு பகுதிக்கு 10 விதைகளைப் பயன்படுத்தி, 0.9 மீ வரிசை அகலத்துடன் 1.8 மீ ஒற்றை வரிசைகளில் நடப்பட்டன. விளிம்பு விளைவுகளைத் தடுக்க, ஒவ்வொரு சோதனையின் சுற்றளவிலும் இரண்டு எல்லை வரிசைகள் நடப்பட்டன. சோதனைகள் ஜூலை 20, 2017 மற்றும் ஜூலை 20, 2018 ஆகிய தேதிகளில் நோயூட்டப்பட்டன; அப்போது சோளச் செடிகள் வளர்ச்சி நிலை 3-ல் இருந்தன. மதிப்பீடுகள் ஒன்று முதல் ஒன்பது வரையிலான அளவுகோல்களில் எடுக்கப்பட்டன; இதில் நோயின் அறிகுறிகள் இல்லாத செடிகளுக்கு ஒன்பது என்றும், முற்றிலும் இறந்த செடிகளுக்கு ஒன்று என்றும் மதிப்பெண் வழங்கப்பட்டது. 2017-ல் இரண்டு மதிப்பீடுகளும், 2018-ல் நான்கு அளவீடுகளும், ஒவ்வொரு ஆண்டும் நோயூட்டப்பட்ட இரண்டு வாரங்களுக்குப் பிறகு எடுக்கப்பட்டன. sAUDPC (நோய் முன்னேற்ற வளைவின் கீழ் உள்ள தரப்படுத்தப்பட்ட பகுதி) முன்பு விவரிக்கப்பட்டபடி கணக்கிடப்பட்டது.
பதிவிட்ட நேரம்: ஏப்ரல்-01-2021
