பூஞ்சைக் கொல்லிச் சேர்ப்பானது, தனித்து வாழும் மேசன் தேனீக்களில் நிகர ஆற்றல் ஆதாயத்தையும் நுண்ணுயிர்த் தொகுதிப் பன்முகத்தன்மையையும் குறைக்கிறது.

Nature.com தளத்திற்கு வருகை தந்ததற்கு நன்றி. நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவியில் CSS ஆதரவு குறைவாக உள்ளது. சிறந்த முடிவுகளுக்கு, உங்கள் உலாவியின் புதிய பதிப்பைப் பயன்படுத்துமாறு (அல்லது இன்டர்நெட் எக்ஸ்ப்ளோரரில் இணக்கப் பயன்முறையை முடக்குமாறு) பரிந்துரைக்கிறோம். இதற்கிடையில், தொடர்ச்சியான ஆதரவை உறுதி செய்வதற்காக, நாங்கள் இந்தத் தளத்தை வடிவமைப்பு அல்லது ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் காண்பிக்கிறோம்.
மரப் பழங்கள் பூக்கும் காலத்தில் பூஞ்சைக்கொல்லிகள் அடிக்கடி பயன்படுத்தப்படுகின்றன, மேலும் அவை பூச்சி மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களுக்கு அச்சுறுத்தலாக அமைகின்றன. இருப்பினும், பூக்கும் காலத்தில் ஆப்பிள்களில் பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் தொடுமுறை மற்றும் உள்ளீட்டுப் பூஞ்சைக்கொல்லிகளுக்கு, தேனீ அல்லாத மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்கள் (எ.கா., தனித்த தேனீக்கள், ஆஸ்மியா கார்னிஃப்ரோன்ஸ்) எவ்வாறு எதிர்வினையாற்றுகின்றன என்பது பற்றி அதிகம் அறியப்படவில்லை. இந்த அறிவு இடைவெளி, பூஞ்சைக்கொல்லி தெளிப்பதற்கான பாதுகாப்பான செறிவுகள் மற்றும் நேரத்தைத் தீர்மானிக்கும் ஒழுங்குமுறை முடிவுகளைக் கட்டுப்படுத்துகிறது. நாங்கள் இரண்டு தொடுமுறை பூஞ்சைக்கொல்லிகள் (கேப்டன் மற்றும் மான்கோசெப்) மற்றும் நான்கு இடை அடுக்கு/தாவர மண்டலப் பூஞ்சைக்கொல்லிகளின் (சிப்ரோசைக்ளின், மைக்ளோபுட்டானில், பைரோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் ட்ரைஃப்ளாக்ஸிஸ்ட்ரோபின்) விளைவுகளை மதிப்பிட்டோம். புழுக்களின் எடை அதிகரிப்பு, உயிர்வாழ்தல், பாலின விகிதம் மற்றும் பாக்டீரியா பன்முகத்தன்மை ஆகியவற்றின் மீதான விளைவுகள் ஆராயப்பட்டன. இந்த மதிப்பீடு, ஒரு நாள்பட்ட வாய்வழி உயிரியல் சோதனையைப் பயன்படுத்தி நடத்தப்பட்டது. இதில், தற்போது வயல் பயன்பாட்டிற்குப் பரிந்துரைக்கப்படும் அளவின் அடிப்படையில் (1X), பாதி அளவு (0.5X) மற்றும் குறைந்த அளவு (0.1X) என மூன்று அளவுகளில் மகரந்தம் பதப்படுத்தப்பட்டது. மான்கோசெப் மற்றும் பைரிடிசோலினின் அனைத்து அளவுகளும் உடல் எடையையும் புழுக்களின் உயிர்வாழ்தலையும் கணிசமாகக் குறைத்தன. பின்னர், அதிகபட்ச இறப்புக்குக் காரணமான பூஞ்சைக்கொல்லியான மான்கோசெப்-இன் புழுக்களின் பாக்டீரியோமை வகைப்படுத்த, நாங்கள் 16S மரபணுவை வரிசைப்படுத்தினோம். மான்கோசெப் தெளிக்கப்பட்ட மகரந்தத்தை உண்ட புழுக்களில், பாக்டீரிய பன்முகத்தன்மையும் எண்ணிக்கையும் குறிப்பிடத்தக்க அளவில் குறைந்திருப்பதைக் கண்டறிந்தோம். பூக்கும் பருவத்தில் இந்தப் பூஞ்சைக்கொல்லிகளில் சிலவற்றைத் தெளிப்பது, ஓ. கார்னிஃப்ரோன்ஸ் மரத்தின் ஆரோக்கியத்திற்கு குறிப்பாகத் தீங்கு விளைவிக்கும் என்பதை எங்கள் ஆய்வக முடிவுகள் சுட்டிக்காட்டுகின்றன. இந்தத் தகவல், பழ மரப் பாதுகாப்புப் பொருட்களின் நீடித்த பயன்பாடு தொடர்பான எதிர்கால மேலாண்மை முடிவுகளுக்குப் பொருத்தமானதாகவும், மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களைப் பாதுகாப்பதை நோக்கமாகக் கொண்ட ஒழுங்குமுறை செயல்முறைகளுக்கு அடிப்படையாகவும் அமைகிறது.
தனித்து வாழும் மேசன் தேனீயான ஆஸ்மியா கார்னிஃப்ரோன்ஸ் (ஹைமனோப்டெரா: மெகாசிலிடே) 1970களின் பிற்பகுதியிலும் 1980களின் முற்பகுதியிலும் ஜப்பானிலிருந்து அமெரிக்காவிற்கு அறிமுகப்படுத்தப்பட்டது, மேலும் அப்போதிருந்து இந்த இனம் நிர்வகிக்கப்படும் சூழல் அமைப்புகளில் ஒரு முக்கியமான மகரந்தச் சேர்க்கைப் பாத்திரத்தை வகித்து வருகிறது. இந்தத் தேனீயின் இயல்பாக்கப்பட்ட இனத்தொகைகள், அமெரிக்காவில் பாதாம் மற்றும் ஆப்பிள் தோட்டங்களில் மகரந்தச் சேர்க்கை செய்யும் தேனீக்களுக்குத் துணையாக இருக்கும் சுமார் 50 காட்டுத் தேனீ இனங்களின் ஒரு பகுதியாகும்²,³. மேசன் தேனீக்கள் வாழ்விடத் துண்டாக்கம், நோய்க்கிருமிகள் மற்றும் பூச்சிக்கொல்லிகள்³,⁴ உள்ளிட்ட பல சவால்களை எதிர்கொள்கின்றன. பூச்சிக்கொல்லிகளில், பூஞ்சைக்கொல்லிகள் ஆற்றல் பெறுதல், உணவு தேடுதல்⁵ மற்றும் உடல் சீரமைப்பு⁶,⁷ ஆகியவற்றைக் குறைக்கின்றன. சமீபத்திய ஆராய்ச்சி, மேசன் தேனீக்களின் ஆரோக்கியம் கூட்டுவாழ் மற்றும் புறவாழ் நுண்ணுயிரிகளால் நேரடியாகப் பாதிக்கப்படுகிறது என்று கூறினாலும்⁸,⁹ பாக்டீரியா மற்றும் பூஞ்சைகள் ஊட்டச்சத்து மற்றும் நோயெதிர்ப்புத் திறனைப் பாதிக்கக்கூடும் என்பதால், பூஞ்சைக்கொல்லி வெளிப்பாட்டின் விளைவுகள் மேசன் தேனீக்களின் நுண்ணுயிரிப் பன்முகத்தன்மை மீது இப்போதுதான் ஆய்வு செய்யத் தொடங்கப்பட்டுள்ளன.
ஆப்பிள் சொறி, கசப்பு அழுகல், பழுப்பு அழுகல் மற்றும் தூள் பூஞ்சணம் போன்ற நோய்களுக்கு சிகிச்சையளிக்க, பழத்தோட்டங்களில் பூக்கும் முன்பும் பூக்கும் போதும் பல்வேறு விளைவுகளைக் கொண்ட (தொடு மற்றும் உள்ளீட்டு) பூஞ்சைக் கொல்லிகள் தெளிக்கப்படுகின்றன¹⁰,¹¹. பூஞ்சைக் கொல்லிகள் மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களுக்கு பாதிப்பில்லாதவை எனக் கருதப்படுவதால், பூக்கும் காலத்தில் அவை தோட்டக்காரர்களுக்குப் பரிந்துரைக்கப்படுகின்றன; தேனீக்கள் இந்தப் பூஞ்சைக் கொல்லிகளை எதிர்கொள்வதும் உட்கொள்வதும் ஓரளவிற்கு நன்கு அறியப்பட்டதே, ஏனெனில் இது அமெரிக்க சுற்றுச்சூழல் பாதுகாப்பு முகமை மற்றும் பல தேசிய ஒழுங்குமுறை முகமைகளின் பூச்சிக்கொல்லி பதிவு செயல்முறையின் ஒரு பகுதியாகும்¹²,¹³,¹⁴. இருப்பினும், அமெரிக்காவில் சந்தைப்படுத்தல் அங்கீகார ஒப்பந்தங்களின் கீழ் பூஞ்சைக் கொல்லிகள் தேவைப்படாததால், தேனீக்கள் அல்லாதவற்றின் மீதான அவற்றின் விளைவுகள் குறைவாகவே அறியப்படுகின்றன¹⁵. கூடுதலாக, தனிப்பட்ட தேனீக்களைச் சோதிப்பதற்கு பொதுவாக தரப்படுத்தப்பட்ட நெறிமுறைகள் எதுவும் இல்லை¹⁶,¹⁷, மேலும் சோதனைக்காக தேனீக்களை வழங்கும் தேனீக் கூட்டங்களைப் பராமரிப்பது சவாலானது¹⁸. காட்டுத் தேனீக்களின் மீது பூச்சிக்கொல்லிகளின் விளைவுகளைப் பற்றி ஆய்வு செய்ய, ஐரோப்பாவிலும் அமெரிக்காவிலும் பல்வேறு வளர்ப்புத் தேனீக்களின் சோதனைகள் பெருகி வருகின்றன, மேலும் சமீபத்தில் O. cornifrons-க்காக தரப்படுத்தப்பட்ட நெறிமுறைகள் உருவாக்கப்பட்டுள்ளன¹⁹.
கொம்புத் தேனீக்கள் மோனோசைட்டுகள் ஆகும், மேலும் அவை கெண்டை மீன் வளர்ப்பில் தேனீக்களுக்குத் துணையாகவோ அல்லது மாற்றாகவோ வணிக ரீதியாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. இந்தத் தேனீக்கள் மார்ச் மற்றும் ஏப்ரல் மாதங்களுக்கு இடையில் வெளிவருகின்றன, இதில் முன்கூட்டியே முதிர்ச்சியடையும் ஆண் தேனீக்கள் பெண் தேனீக்களுக்கு மூன்று முதல் நான்கு நாட்களுக்கு முன்பே வெளிவருகின்றன. இனப்பெருக்கத்திற்குப் பிறகு, பெண் தேனீயானது குழாய் வடிவக் கூடு குழிக்குள் (இயற்கையான அல்லது செயற்கையான) தொடர்ச்சியான குஞ்சு பொரிக்கும் அறைகளை உருவாக்குவதற்காக மகரந்தத்தையும் தேனையும் தீவிரமாகச் சேகரிக்கிறது¹,²⁰. முட்டைகள் அந்த அறைகளுக்குள் உள்ள மகரந்தத்தின் மீது இடப்படுகின்றன; பின்னர் பெண் தேனீ அடுத்த அறையைத் தயார் செய்வதற்கு முன்பு ஒரு களிமண் சுவரைக் கட்டுகிறது. முதல் நிலை லார்வாக்கள் கோரியனுக்குள் அடைக்கப்பட்டு, கரு திரவங்களை உணவாக உட்கொள்கின்றன. இரண்டாம் நிலை முதல் ஐந்தாம் நிலை (கூட்டுப்புழுவுக்கு முந்தைய நிலை) வரை, லார்வாக்கள் மகரந்தத்தை உணவாக உட்கொள்கின்றன²². மகரந்த இருப்பு முற்றிலும் தீர்ந்தவுடன், லார்வாக்கள் கூடுகளை உருவாக்கி, கூட்டுப்புழுவாக மாறி, அதே குஞ்சு பொரிக்கும் அறையில், பொதுவாக கோடையின் பிற்பகுதியில்²⁰,²³ முதிர்ந்த தேனீக்களாக வெளிவருகின்றன. அடுத்த வசந்த காலத்தில் முதிர்ந்த தேனீக்கள் வெளிவருகின்றன. முதிர்ந்த தேனீக்களின் உயிர்வாழ்வு, உணவு உட்கொள்ளலை அடிப்படையாகக் கொண்ட நிகர ஆற்றல் ஆதாயத்துடன் (எடை அதிகரிப்பு) தொடர்புடையது. எனவே, மகரந்தத்தின் ஊட்டச்சத்துத் தரம், அத்துடன் வானிலை அல்லது பூச்சிக்கொல்லிகளின் வெளிப்பாடு போன்ற பிற காரணிகளும் உயிர்வாழ்வையும் ஆரோக்கியத்தையும் தீர்மானிக்கும் காரணிகளாக உள்ளன²⁴.
பூக்கும் முன் பயன்படுத்தப்படும் பூச்சிக்கொல்லிகள் மற்றும் பூஞ்சைக்கொல்லிகள், தாவரத்தின் வாஸ்குலேச்சருக்குள் பல்வேறு அளவுகளில் நகரக்கூடியவை. இவை டிரான்ஸ்லாமினார் (உதாரணமாக, சில பூஞ்சைக்கொல்லிகளைப் போல இலைகளின் மேல் மேற்பரப்பிலிருந்து கீழ் மேற்பரப்பிற்கு நகரக்கூடியவை) 25 முதல் உண்மையான சிஸ்டமிக் விளைவுகள் வரை இருக்கும். வேர்களிலிருந்து தண்டின் அடிப்பகுதிக்குள் ஊடுருவக்கூடியவை, ஆப்பிள் பூக்களின் தேனுக்குள் நுழையலாம்26, அங்கு அவை முதிர்ந்த ஓ. கார்னிஃப்ரோன்ஸைக் கொல்லக்கூடும்27. சில பூச்சிக்கொல்லிகள் மகரந்தத்திலும் கசிந்து, மக்காச்சோளப் புழுக்களின் வளர்ச்சியைப் பாதித்து, அவற்றின் இறப்பிற்குக் காரணமாகின்றன19. சில பூஞ்சைக்கொல்லிகள், தொடர்புடைய இனமான ஓ. லிக்னாரியாவின் கூடு கட்டும் நடத்தையை கணிசமாக மாற்றக்கூடும் என்று பிற ஆய்வுகள் காட்டியுள்ளன28. கூடுதலாக, பூச்சிக்கொல்லி வெளிப்பாட்டு சூழ்நிலைகளை (பூஞ்சைக்கொல்லிகள் உட்பட) உருவகப்படுத்தும் ஆய்வக மற்றும் கள ஆய்வுகள், பூச்சிக்கொல்லிகள் தேனீக்கள் மற்றும் சில தனித்த தேனீக்களின் உடலியல் 22, உருவவியல் 29 மற்றும் உயிர்வாழ்வை எதிர்மறையாகப் பாதிக்கின்றன என்பதைக் காட்டியுள்ளன. பூக்கும் காலத்தில் மலர்ந்த பூக்களின் மீது நேரடியாகப் பயன்படுத்தப்படும் பல்வேறு பூஞ்சைக் கொல்லித் தெளிப்புகள், இளம் உயிரிகளின் வளர்ச்சிக்காக முதிர்ந்த பூச்சிகள் சேகரிக்கும் மகரந்தத்தை மாசுபடுத்தக்கூடும், அதன் விளைவுகள் இன்னும் ஆய்வு செய்யப்பட வேண்டியுள்ளது30.
புழுக்களின் வளர்ச்சியானது மகரந்தம் மற்றும் செரிமான மண்டலத்தின் நுண்ணுயிர்க் கூட்டங்களால் பாதிக்கப்படுகிறது என்பது பெருகிய முறையில் அங்கீகரிக்கப்பட்டுள்ளது. தேனீயின் நுண்ணுயிர்த் தொகுப்பு, உடல் எடை³¹, வளர்சிதை மாற்ற மாற்றங்கள்²² மற்றும் நோய்க்கிருமிகளுக்கு ஆட்படும் தன்மை³² போன்ற அளவுருக்களைப் பாதிக்கிறது. முந்தைய ஆய்வுகள், தனித்த தேனீக்களின் நுண்ணுயிர்த் தொகுப்பின் மீது வளர்ச்சி நிலை, ஊட்டச்சத்துக்கள் மற்றும் சுற்றுச்சூழல் ஆகியவற்றின் செல்வாக்கை ஆராய்ந்துள்ளன. இந்த ஆய்வுகள், தனித்த தேனீ இனங்களிடையே, புழு மற்றும் மகரந்த நுண்ணுயிர்த் தொகுப்புகளின் அமைப்பு மற்றும் மிகுதி³³, அத்துடன் மிகவும் பொதுவான பாக்டீரியா பேரினங்களான சூடோமோனாஸ் மற்றும் டெல்ஃப்டியா ஆகியவற்றிலும் ஒற்றுமைகளை வெளிப்படுத்தின. இருப்பினும், தேனீக்களின் ஆரோக்கியத்தைப் பாதுகாக்கும் உத்திகளுடன் பூஞ்சைக்கொல்லிகள் தொடர்புபடுத்தப்பட்டிருந்தாலும், நேரடி வாய்வழி வெளிப்பாட்டின் மூலம் புழுக்களின் நுண்ணுயிர்த் தொகுப்பின் மீது பூஞ்சைக்கொல்லிகளின் விளைவுகள் ஆராயப்படாமல் உள்ளன.
இந்த ஆய்வானது, அமெரிக்காவில் மரப் பழங்களில் பயன்படுத்தப் பதிவுசெய்யப்பட்ட, பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் ஆறு பூஞ்சைக்கொல்லிகளின் உண்மையான அளவுகளின் விளைவுகளைச் சோதித்தது. இதில், அசுத்தமான உணவிலிருந்து சோளக் கொம்புப்புழு அந்துப்பூச்சிப் புழுக்களுக்கு வாய்வழியாகக் கொடுக்கப்பட்ட தொடு மற்றும் உள்ளீட்டுப் பூஞ்சைக்கொல்லிகளும் அடங்கும். தொடு மற்றும் உள்ளீட்டுப் பூஞ்சைக்கொல்லிகள் தேனீக்களின் உடல் எடை அதிகரிப்பைக் குறைத்து, இறப்பு விகிதத்தை உயர்த்தியதைக் கண்டறிந்தோம்; இதில் மான்கோசெப் மற்றும் பைரித்தியோபைடு ஆகியவை மிகவும் கடுமையான விளைவுகளைக் கொண்டிருந்தன. பின்னர், மான்கோசெப் கலந்த மகரந்த உணவை உட்கொண்ட புழுக்களின் நுண்ணுயிர்ப் பன்முகத்தன்மையை, கட்டுப்பாட்டு உணவை உட்கொண்ட புழுக்களுடன் ஒப்பிட்டோம். இறப்பு விகிதத்திற்குக் காரணமான சாத்தியமான வழிமுறைகள் மற்றும் ஒருங்கிணைந்த பூச்சி மற்றும் மகரந்தச் சேர்க்கை மேலாண்மை (IPPM)36 திட்டங்களுக்கான தாக்கங்கள் குறித்து நாங்கள் விவாதிக்கிறோம்.
கூட்டுப்புழுக்களில் குளிர்காலத்தைக் கழிக்கும் முதிர்ந்த ஓ. கார்னிஃப்ரன்ஸ் தேனீக்கள், பிக்லர்வில், PA-வில் உள்ள பழ ஆராய்ச்சி மையத்திலிருந்து பெறப்பட்டு, −3 முதல் 2°C (±0.3°C) வெப்பநிலையில் சேமிக்கப்பட்டன. பரிசோதனைக்கு முன்பு (மொத்தம் 600 கூட்டுப்புழுக்கள்). மே 2022-ல், தினமும் 100 ஓ. கார்னிஃப்ரன்ஸ் கூட்டுப்புழுக்கள் பிளாஸ்டிக் கோப்பைகளுக்கு மாற்றப்பட்டன (ஒரு கோப்பைக்கு 50 கூட்டுப்புழுக்கள், விட்டம் 5 செ.மீ × 15 செ.மீ நீளம்). கூட்டுப்புழுக்கள் திறப்பதை ஊக்குவிக்கவும், மெல்லக்கூடிய தளத்தை வழங்கவும், கல் தேனீக்களுக்கு ஏற்படும் அழுத்தத்தைக் குறைக்கவும் கோப்பைகளுக்குள் துடைப்பான்கள் வைக்கப்பட்டன³⁷. கூட்டுப்புழுக்கள் உள்ள இரண்டு பிளாஸ்டிக் கோப்பைகளை, 50% சுக்ரோஸ் கரைசல் கொண்ட 10 மிலி தீவனக் கலன்களுடன் ஒரு பூச்சிக் கூண்டில் (30 × 30 × 30 செ.மீ, பக் டார்ம் மெகா வியூ சயின்ஸ் கோ. லிமிடெட், தைவான்) வைத்து, கூட்டுப்புழுக்கள் மூடுவதையும் இனப்பெருக்கத்தையும் உறுதி செய்வதற்காக நான்கு நாட்கள் சேமித்து வைக்கவும். 23°C, ஒப்பு ஈரப்பதம் 60%, ஒளிக்காலம் 10 மணிநேரம் (குறைந்த தீவிரம்): 14 நாட்கள். ஆப்பிள் பூக்கள் உச்சத்தில் பூக்கும் காலத்தில், ஆறு நாட்களுக்கு ஒவ்வொரு காலையிலும் 100 இணை சேர்ந்த பெண் மற்றும் ஆண் பூச்சிகள் (ஒரு நாளைக்கு 100) இரண்டு செயற்கைக் கூடுகளில் விடப்பட்டன (பொறிக் கூடு: அகலம் 33.66 × உயரம் 30.48 × நீளம் 46.99 செ.மீ; துணைப் படம் 1). பென்சில்வேனியா மாநில தாவரவியல் பூங்காவில், செர்ரி (Prunus cerasus 'Eubank' Sweet Cherry Pie™), பீச் (Prunus persica 'Contender'), Prunus persica 'PF 27A' Flamin Fury®), பேரிக்காய் (Pyrus perifolia 'Olympic', Pyrus perifolia ' Shinko', Pyrus perifolia 'Shinseiki'), கொரோனாரியா ஆப்பிள் மரம் (Malus coronaria) மற்றும் எண்ணற்ற வகை ஆப்பிள் மரங்கள் (Malus coronaria, Malus), வீட்டு உபயோக ஆப்பிள் மரம் 'Co-op 30′ Enterprise™, Malus ஆப்பிள் மரம் 'Co-Op 31′ Winecrisp™, பெகோனியா 'Freedom', Begonia 'Golden Delicious', Begonia 'Nova Spy') ஆகியவற்றுக்கு அருகில் வைக்கப்பட்டுள்ளது. ஒவ்வொரு நீல நிற பிளாஸ்டிக் பறவைக் கூடும் இரண்டு மரப் பெட்டிகளின் மேல் பொருந்துகிறது. ஒவ்வொரு கூடுப் பெட்டியிலும், ஒளிபுகாத செல்லோபேன் குழாய்களுக்குள் (0.7 செ.மீ வெளி விட்டம்) செருகப்பட்ட 800 காலி கிராஃப்ட் காகிதக் குழாய்கள் (சுருள் வடிவில் திறந்தவை, 0.8 செ.மீ உள் விட்டம் × 15 செ.மீ நீளம்) (ஜோன்ஸ்வில் பேப்பர் டியூப் கோ., மிச்சிகன்) இருந்தன. பிளாஸ்டிக் அடைப்பான்கள் (T-1X அடைப்பான்கள்) கூடு கட்டுவதற்கான இடங்களை வழங்குகின்றன.
இரண்டு கூடுப் பெட்டிகளும் கிழக்கு நோக்கி இருந்தன. கொறித்துண்ணிகள் மற்றும் பறவைகள் அணுகுவதைத் தடுப்பதற்காக, அவை பச்சை நிற பிளாஸ்டிக் தோட்ட வேலியால் (எவர்பில்ட் மாடல் #889250EB12, திறப்பு அளவு 5 × 5 செ.மீ, 0.95 மீ × 100 மீ) மூடப்பட்டு, கூடுப் பெட்டியின் மண் பெட்டிகளுக்கு அருகில் மண் மேற்பரப்பில் வைக்கப்பட்டன. கூடுப் பெட்டி (துணைப் படம் 1a). கூடுகளிலிருந்து தினமும் 30 குழாய்களைச் சேகரித்து ஆய்வகத்திற்குக் கொண்டு செல்வதன் மூலம் சோளத் துளைப்பான் முட்டைகள் சேகரிக்கப்பட்டன. கத்தரிக்கோலைப் பயன்படுத்தி, குழாயின் முனையில் ஒரு வெட்டு செய்து, பின்னர் குஞ்சு செல்களை வெளிப்படுத்த சுருள் குழாயைப் பிரிக்கவும். வளைந்த கரண்டியைப் பயன்படுத்தி (மைக்ரோஸ்லைடு கருவித் தொகுப்பு, பயோகுவிப் ப்ராடக்ட்ஸ் இன்க்., கலிபோர்னியா) தனிப்பட்ட முட்டைகளும் அவற்றின் மகரந்தமும் அகற்றப்பட்டன. முட்டைகள் ஈரமான வடிகட்டித் தாளில் அடைகாக்கப்பட்டு, எங்கள் சோதனைகளில் பயன்படுத்துவதற்கு முன்பு 2 மணி நேரம் பெட்ரி தட்டில் வைக்கப்பட்டன (துணைப் படம் 1b-d).
ஆய்வகத்தில், ஆப்பிள் பூக்கும் முன்பும் பூக்கும் போதும் மூன்று செறிவுகளில் (0.1X, 0.5X, மற்றும் 1X, இதில் 1X என்பது ஒரு ஏக்கருக்கு 100 கேலன் தண்ணீருக்குப் பயன்படுத்தப்படும் அளவாகும். அதிக கள அளவு = வயலில் உள்ள செறிவு) பயன்படுத்தப்பட்ட ஆறு பூஞ்சைக் கொல்லிகளின் வாய்வழி நச்சுத்தன்மையை நாங்கள் மதிப்பீடு செய்தோம் (அட்டவணை 1). ஒவ்வொரு செறிவும் 16 முறை மீண்டும் செய்யப்பட்டது (n = 16). இரண்டு தொடு பூஞ்சைக் கொல்லிகள் (அட்டவணை S1: மான்கோசெப் 2696.14 ppm மற்றும் கேப்டன் 2875.88 ppm) மற்றும் நான்கு உள்ளீட்டு பூஞ்சைக் கொல்லிகள் (அட்டவணை S1: பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் 250.14 ppm; ட்ரைஃப்ளாக்ஸிஸ்ட்ரோபின் 110.06 ppm; மைக்ளோபுட்டானில் அசோல் 75.12 ppm; சைப்ரோடினில் 280.845 ppm) பழங்கள், காய்கறிகள் மற்றும் அலங்காரப் பயிர்களுக்கு ஏற்படுத்திய நச்சுத்தன்மை. நாங்கள் மகரந்தத்தை ஒரு அரைப்பானைப் பயன்படுத்தி கூழாக்கி, 0.20 கிராம் அளவை ஒரு குழிக்கு (24-குழி ஃபால்கன் தட்டு) மாற்றினோம். பின்னர், 1 μL பூஞ்சைக்கொல்லி கரைசலைச் சேர்த்துக் கலந்து, 1 மிமீ ஆழமுள்ள குழிகளுடன் கூடிய பிரமிடு வடிவ மகரந்தத் தட்டை உருவாக்கினோம். அதில் முட்டைகள் வைக்கப்பட்டன. ஒரு சிறிய கரண்டியைப் பயன்படுத்தி அவற்றை வைத்தோம் (துணைப் படம் 1c,d). ஃபால்கன் தட்டுகள் அறை வெப்பநிலையிலும் (25°C) 70% ஒப்பு ஈரப்பதத்திலும் சேமிக்கப்பட்டன. தூய நீரால் பதப்படுத்தப்பட்ட, ஒரே சீரான மகரந்த உணவை உட்கொண்ட கட்டுப்பாட்டுக் குழு புழுக்களுடன் அவற்றை ஒப்பிட்டோம். புழுக்கள் கூட்டுப்புழு பருவத்தை அடையும் வரை, ஒரு பகுப்பாய்வுத் தராசைப் (ஃபிஷர் சயின்டிஃபிக், துல்லியம் = 0.0001 கிராம்) பயன்படுத்தி, ஒரு நாள் விட்டு ஒரு நாள் இறப்பு விகிதத்தைப் பதிவுசெய்து, புழுக்களின் எடையை அளந்தோம். இறுதியாக, 2.5 மாதங்களுக்குப் பிறகு கூட்டுப்புழு கூட்டைத் திறப்பதன் மூலம் பாலின விகிதம் மதிப்பிடப்பட்டது.
முழுமையான O. cornifrons புழுக்களிலிருந்து டி.என்.ஏ பிரித்தெடுக்கப்பட்டது (ஒவ்வொரு சிகிச்சை நிலைக்கும் n = 3, மான்கோசெப்-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மற்றும் சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தம்). மேலும், இந்த மாதிரிகளில் நுண்ணுயிரிப் பன்முகத்தன்மை பகுப்பாய்வுகளை நாங்கள் மேற்கொண்டோம், குறிப்பாக மான்கோசெப் சிகிச்சையில் MnZn பெறும் புழுக்களில் அதிகபட்ச இறப்பு காணப்பட்டதால். டி.என்.ஏ பெருக்கப்பட்டு, DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA கிட் (Zymo Research, Irvine, CA) பயன்படுத்தி தூய்மைப்படுத்தப்பட்டது, மற்றும் v3 கிட்டைப் பயன்படுத்தி Illumina® MiSeq™ கருவியில் வரிசைப்படுத்தப்பட்டது (600 சுழற்சிகள்). பாக்டீரியாவின் 16S ரிபோசோமல் ஆர்.என்.ஏ மரபணுக்களின் இலக்கு வரிசைப்படுத்தல், 16S rRNA மரபணுவின் V3-V4 பகுதியை இலக்காகக் கொண்ட பிரைமர்களைப் பயன்படுத்தி Quick-16S™ NGS Library Prep Kit (Zymo Research, Irvine, CA) மூலம் செய்யப்பட்டது. கூடுதலாக, 10% PhiX உள்ளடக்கத்தைப் பயன்படுத்தி 18S வரிசைப்படுத்தல் செய்யப்பட்டது, மற்றும் 18S001 மற்றும் NS4 பிரைமர் ஜோடியைப் பயன்படுத்தி பெருக்கம் செய்யப்பட்டது.
QIIME2 பைப்லைனை (v2022.11.1) பயன்படுத்தி, இணைக்கப்பட்ட ரீடுகள்39 இறக்குமதி செய்யப்பட்டு செயலாக்கப்பட்டன. இந்த ரீடுகள் ஒழுங்குபடுத்தப்பட்டு ஒன்றிணைக்கப்பட்டன, மேலும் QIIME2-வில் உள்ள DADA2 செருகுநிரலைப் (qiime dada2 noise pairing) பயன்படுத்தி கலப்பின வரிசைகள் அகற்றப்பட்டன40. 16S மற்றும் 18S வகுப்பு ஒதுக்கீடுகள், Classify-sklearn என்ற பொருள் வகைப்படுத்தி செருகுநிரல் மற்றும் முன்பயிற்சி பெற்ற silva-138-99-nb-classifier என்ற ஆர்டிஃபேக்ட் ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி செய்யப்பட்டன.
அனைத்து சோதனைத் தரவுகளும் இயல்புநிலை (ஷேபிரோ-வில்க்ஸ்) மற்றும் மாறுபாடுகளின் ஒருபடித்தன்மை (லெவின் சோதனை) ஆகியவற்றிற்காகச் சரிபார்க்கப்பட்டன. தரவுத் தொகுப்பு அளவுரு பகுப்பாய்வின் அனுமானங்களைப் பூர்த்தி செய்யாததாலும், உருமாற்றம் மீதங்களை தரப்படுத்தத் தவறியதாலும், சிகிச்சையின் விளைவை லார்வாவின் புதிய எடையில் மதிப்பிடுவதற்கு, இரண்டு காரணிகளுடன் [நேரம் (மூன்று-கட்ட 2, 5, மற்றும் 8 நாள் நேரப் புள்ளிகள்) மற்றும் பூஞ்சைக்கொல்லி] ஒரு அளவுருசாரா இருவழி ANOVA (க்ருஸ்கல்-வாலிஸ்) சோதனையை நாங்கள் செய்தோம், பின்னர் வில்காக்சன் சோதனையைப் பயன்படுத்தி பிந்தைய அளவுருசாரா ஜோடி ஒப்பீடுகள் செய்யப்பட்டன. மூன்று பூஞ்சைக்கொல்லி செறிவுகளில் உயிர்வாழ்வின் மீதான பூஞ்சைக்கொல்லிகளின் விளைவுகளை ஒப்பிடுவதற்கு, பாய்சன் பரவலுடன் கூடிய ஒரு பொதுமைப்படுத்தப்பட்ட நேரியல் மாதிரியை (GLM) நாங்கள் பயன்படுத்தினோம்41,42. வேறுபட்ட மிகுதி பகுப்பாய்விற்காக, ஆம்ப்ளிகான் வரிசை மாறுபாடுகளின் (ASVகள்) எண்ணிக்கை பேரின மட்டத்தில் சுருக்கப்பட்டது. 16S (பேரின நிலை) மற்றும் 18S சார்பு மிகுதியைப் பயன்படுத்தி குழுக்களுக்கு இடையேயான வேறுபட்ட மிகுதியின் ஒப்பீடுகள், நிலை, அளவு மற்றும் வடிவத்திற்கான பொதுமைப்படுத்தப்பட்ட கூட்டு மாதிரியை (GAMLSS) பயன்படுத்தி, பீட்டா பூஜ்ஜிய-வீக்க (BEZI) குடும்பப் பரவல்களுடன் செய்யப்பட்டன, அவை மைக்ரோபயோம் R43 (v1.1) இல் ஒரு மேக்ரோவில் மாதிரியாக்கப்பட்டன. 1). வேறுபாட்டுப் பகுப்பாய்விற்கு முன் மைட்டோகாண்ட்ரியல் மற்றும் குளோரோபிளாஸ்ட் இனங்களை அகற்றவும். 18S இன் வெவ்வேறு வகைப்பாட்டு நிலைகள் காரணமாக, ஒவ்வொரு வகைப்பாட்டின் மிகக் குறைந்த நிலை மட்டுமே வேறுபாட்டுப் பகுப்பாய்வுகளுக்குப் பயன்படுத்தப்பட்டது. அனைத்து புள்ளிவிவரப் பகுப்பாய்வுகளும் R (v. 3.4.3., CRAN திட்டம்) (குழு 2013) ஐப் பயன்படுத்தி செய்யப்பட்டன.
மான்கோசெப், பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் டிரைஃப்ளாக்ஸிஸ்ட்ரோபின் ஆகியவற்றின் வெளிப்பாடு, ஓ. கார்னிஃப்ரோன்ஸில் உடல் எடை அதிகரிப்பைக் குறிப்பிடத்தக்க அளவில் குறைத்தது (படம் 1). மதிப்பிடப்பட்ட மூன்று அளவுகளிலும் இந்த விளைவுகள் சீராகக் காணப்பட்டன (படம் 1a–c). சைக்ளோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் மைக்ளோபுட்டானில் ஆகியவை லார்வாக்களின் எடையைக் குறிப்பிடத்தக்க அளவில் குறைக்கவில்லை.
நான்கு உணவு முறைகளின் கீழ் (ஒருபடித்தான மகரந்த உணவு + பூஞ்சைக் கொல்லி: கட்டுப்பாடு, 0.1X, 0.5X மற்றும் 1X அளவுகள்) மூன்று காலப் புள்ளிகளில் அளவிடப்பட்ட தண்டுத் துளைப்பான் புழுக்களின் சராசரி புதிய எடை. (அ) குறைந்த அளவு (0.1X): முதல் காலப் புள்ளி (நாள் 1): χ2: 30.99, DF = 6; P < 0.0001, இரண்டாம் காலப் புள்ளி (நாள் 5): 22.83, DF = 0.0009; மூன்றாம் காலப் புள்ளி (நாள் 8): χ2: 28.39, DF = 6; (ஆ) அரை அளவு (0.5X): முதல் காலப் புள்ளி (நாள் 1): χ2: 35.67, DF = 6; P < 0.0001, இரண்டாம் காலப் புள்ளி (நாள் 1): χ2: 15.98, DF = 6; P = 0.0090; மூன்றாவது நேரப் புள்ளி (நாள் 8) χ2: 16.47, DF = 6; (c) தளம் அல்லது முழு டோஸ் (1X): முதல் நேரப் புள்ளி (நாள் 1) χ2: 20.64, P = 6; P = 0.0326, இரண்டாவது நேரப் புள்ளி (நாள் 5): χ2: 22.83, DF = 6; P = 0.0009; மூன்றாவது நேரப் புள்ளி (நாள் 8): χ2: 28.39, DF = 6; அளபுருசாரா மாறுபாட்டுப் பகுப்பாய்வு. பட்டைகள் ஜோடி ஒப்பீடுகளின் சராசரி ± SE-ஐக் குறிக்கின்றன (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05, **P ≤ 0.001, ***P ≤ 0.0001.
மிகக் குறைந்த அளவில் (0.1X), டிரைஃப்ளாக்ஸிஸ்ட்ரோபினால் புழுக்களின் உடல் எடை 60%, மான்கோசெப்பால் 49%, மைக்ளோபுட்டானிலால் 48%, மற்றும் பைரிதிஸ்ட்ரோபினால் 46% குறைக்கப்பட்டது (படம் 1a). பாதி கள அளவில் (0.5X) வெளிப்படுத்தப்பட்டபோது, ​​மான்கோசெப் புழுக்களின் உடல் எடை 86%, பைரிதிதிஸ்ட்ரோபினால் 52% மற்றும் டிரைஃப்ளாக்ஸிஸ்ட்ரோபினால் 50% குறைக்கப்பட்டது (படம் 1b). மான்கோசெப்பின் முழு கள அளவு (1X) புழுக்களின் எடையை 82%, பைரிதிதிஸ்ட்ரோபினால் 70%, மற்றும் டிரைஃப்ளாக்ஸிஸ்ட்ரோபின், மைக்ளோபுட்டானில் மற்றும் சங்கார்டால் ஏறக்குறைய 30% குறைத்தது (படம் 1c).
மேன்கோசெப் கலந்த மகரந்தத்தை உண்ட புழுக்களிடையே இறப்பு விகிதம் மிக அதிகமாக இருந்தது; அதனைத் தொடர்ந்து பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் டிரைஃப்ளாக்ஸிஸ்ட்ரோபின் கலந்த மகரந்தத்தை உண்ட புழுக்களிடையே இறப்பு விகிதம் அதிகமாக இருந்தது. மேன்கோசெப் மற்றும் பைரிடிசோலின் ஆகியவற்றின் அளவுகள் அதிகரிக்க அதிகரிக்க இறப்பு விகிதமும் அதிகரித்தது (படம் 2; அட்டவணை 2). இருப்பினும், டிரைஃப்ளாக்ஸிஸ்ட்ரோபின் செறிவுகள் அதிகரித்தபோது மக்காச்சோளத் துளைப்பான் இறப்பு விகிதம் சிறிதளவே அதிகரித்தது; கட்டுப்பாட்டு சிகிச்சைகளுடன் ஒப்பிடும்போது சைப்ரோடினில் மற்றும் கேப்டன் ஆகியவை இறப்பு விகிதத்தை குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அதிகரிக்கவில்லை.
ஆறு வெவ்வேறு பூஞ்சைக் கொல்லிகளால் தனித்தனியாகப் பதப்படுத்தப்பட்ட மகரந்தத்தை உட்கொண்ட பிறகு, துளைக்கும் ஈப் புழுக்களின் இறப்பு விகிதம் ஒப்பிடப்பட்டது. மக்காச்சோளப் புழுக்களை வாய்வழியாக உட்கொள்வதற்கு மான்கோசெப் மற்றும் பென்டோபிரமைடு ஆகியவை அதிக உணர்திறன் கொண்டவையாக இருந்தன (GLM: χ = 29.45, DF = 20, P = 0.0059) (கோடு, சாய்வு = 0.29, P < 0.001; சாய்வு = 0.24, P <0.00)).
சராசரியாக, அனைத்து சிகிச்சைகளிலும், 39.05% நோயாளிகள் பெண்களாகவும், 60.95% ஆண்கள் ஆண்களாகவும் இருந்தனர். கட்டுப்பாட்டு சிகிச்சைகளில், குறைந்த அளவு (0.1X) மற்றும் அரை அளவு (0.5X) ஆய்வுகள் இரண்டிலும் பெண்களின் விகிதம் 40% ஆகவும், கள அளவு (1X) ஆய்வுகளில் 30% ஆகவும் இருந்தது. 0.1X அளவில், மான்கோசெப் மற்றும் மைக்ளோபுட்டானில் கொண்டு சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மகரந்தம் உண்ணும் புழுக்களில், 33.33% முதிர்ந்த பூச்சிகள் பெண்களாகவும், 22% முதிர்ந்த பூச்சிகள் பெண்களாகவும், 44% முதிர்ந்த புழுக்கள் பெண்களாகவும், 41% முதிர்ந்த புழுக்கள் பெண்களாகவும் இருந்தன, மற்றும் கட்டுப்பாட்டுக் குழுவில் 31% ஆக இருந்தது (படம் 3a). 0.5 மடங்கு மருந்தளவில், மான்கோசெப் மற்றும் பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் குழுவில் 33% முதிர்ந்த புழுக்களும், டிரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபின் குழுவில் 36%, மைக்ளோபுட்டானில் குழுவில் 41%, மற்றும் சைப்ரோஸ்ட்ரோபின் குழுவில் 46% பெண் புழுக்களும் இருந்தன. கேப்டன் குழுவில் இந்த எண்ணிக்கை 53% ஆகவும், கட்டுப்பாட்டுக் குழுவில் 38% ஆகவும் இருந்தது (படம் 3b). 1X மருந்தளவில், மான்கோசெப் குழுவில் 30%, பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் குழுவில் 36%, டிரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபின் குழுவில் 44%, மைக்ளோபுட்டானில் குழுவில் 38%, மற்றும் கட்டுப்பாட்டுக் குழுவில் 38.5% பெண் புழுக்கள் இருந்தன (படம் 3c).
புழுப் பருவத்தில் பூஞ்சைக் கொல்லிக்கு ஆட்பட்ட பிறகு பெண் மற்றும் ஆண் துளைப்பான்களின் சதவீதம். (அ) குறைந்த அளவு (0.1X). ​​(ஆ) அரை அளவு (0.5X). (இ) கள அளவு அல்லது முழு அளவு (1X).
16S வரிசைமுறைப் பகுப்பாய்வு, மான்கோசெப்-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மகரந்தத்தை உண்ட புழுக்களுக்கும், சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தத்தை உண்ட புழுக்களுக்கும் இடையே பாக்டீரியா குழு வேறுபட்டிருப்பதைக் காட்டியது (படம் 4a). மகரந்தத்தை உண்ட சிகிச்சையளிக்கப்படாத புழுக்களின் நுண்ணுயிரிக் குறியீடு, மான்கோசெப்-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மகரந்தத்தை உண்ட புழுக்களின் குறியீட்டை விட அதிகமாக இருந்தது (படம் 4b). குழுக்களுக்கு இடையே காணப்பட்ட இனச்செறிவின் வேறுபாடு புள்ளிவிவரப்படி குறிப்பிடத்தக்கதாக இல்லாவிட்டாலும், அது சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தத்தை உண்ட புழுக்களில் காணப்பட்டதை விட கணிசமாகக் குறைவாக இருந்தது (படம் 4c). சார்பு மிகுதியானது, கட்டுப்பாட்டு மகரந்தத்தை உண்ட புழுக்களின் நுண்ணுயிரிக் கூட்டமானது, மான்கோசெப்-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட புழுக்களை உண்ட புழுக்களின் நுண்ணுயிரிக் கூட்டத்தை விட அதிக பன்முகத்தன்மை கொண்டதாக இருந்ததைக் காட்டியது (படம் 5a). விளக்கப் பகுப்பாய்வு, கட்டுப்பாட்டு மற்றும் மான்கோசெப்-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மாதிரிகளில் 28 பேரினங்கள் இருப்பதைக் காட்டியது (படம் 5b). c 18S வரிசைமுறையைப் பயன்படுத்தி செய்யப்பட்ட பகுப்பாய்வு குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகளைக் காட்டவில்லை (துணைப் படம் 2).
16S வரிசைமுறைகளை அடிப்படையாகக் கொண்ட SAV விவரங்கள், ஷானன் இனச்செழுமை மற்றும் தொகுதி மட்டத்தில் காணப்பட்ட இனச்செழுமையுடன் ஒப்பிடப்பட்டன. (அ) பதப்படுத்தப்படாத மகரந்தம் ஊட்டப்பட்ட அல்லது கட்டுப்பாட்டு (நீலம்) மற்றும் மான்கோசெப் ஊட்டப்பட்ட புழுக்களில் (ஆரஞ்சு) உள்ள ஒட்டுமொத்த நுண்ணுயிர் சமூக அமைப்பை அடிப்படையாகக் கொண்ட முதன்மை ஒருங்கிணைப்புப் பகுப்பாய்வு (PCoA). ஒவ்வொரு தரவுப் புள்ளியும் ஒரு தனி மாதிரியைக் குறிக்கிறது. பன்மாறி t பரவலின் பிரே-கர்டிஸ் தொலைவைப் பயன்படுத்தி PCoA கணக்கிடப்பட்டது. நீள்வட்டங்கள் 80% நம்பிக்கை அளவைக் குறிக்கின்றன. (ஆ) பெட்டி வரைபடம், மூல ஷானன் வளத் தரவு (புள்ளிகள்) மற்றும் இ. காணக்கூடிய வளம். பெட்டி வரைபடங்கள் இடைநிலைக் கோடு, கால்மான இடைவெளி (IQR) மற்றும் 1.5 × IQR (n = 3) ஆகியவற்றிற்கான பெட்டிகளைக் காட்டுகின்றன.
மேன்கோசெப் கொண்டு பதப்படுத்தப்பட்ட மற்றும் பதப்படுத்தப்படாத மகரந்தத்தை உண்ட புழுக்களின் நுண்ணுயிர் சமூகங்களின் அமைப்பு. (அ) புழுக்களில் உள்ள நுண்ணுயிர் பேரினங்களின் சார்பு மிகுதி. (ஆ) அடையாளம் காணப்பட்ட நுண்ணுயிர் சமூகங்களின் வெப்ப வரைபடம். டெல்ஃப்டியா (வாய்ப்பு விகிதம் (OR) = 0.67, P = 0.0030) மற்றும் சூடோமோனாஸ் (OR = 0.3, P = 0.0074), மைக்ரோபாக்டீரியம் (OR = 0.75, P = 0.0617) (OR = 1.5, P = 0.0060); வெப்ப வரைபட வரிசைகள் தொடர்பு தூரம் மற்றும் சராசரி இணைப்புத்திறனைப் பயன்படுத்தி தொகுக்கப்பட்டுள்ளன.
பூக்கும் பருவத்தில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் தொடு (மான்கோசெப்) மற்றும் உள்ளீட்டு (பைரோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் டிரைஃப்ளாக்ஸிஸ்ட்ரோபின்) பூஞ்சைக் கொல்லிகளை வாய்வழியாக உட்கொள்வது, மக்காச்சோளப் புழுக்களின் எடை அதிகரிப்பைக் கணிசமாகக் குறைத்து, இறப்பு விகிதத்தை அதிகரித்தது என்பதை எங்கள் முடிவுகள் காட்டுகின்றன. மேலும், மான்கோசெப் கூட்டுப்புழு பருவத்திற்கு முந்தைய நிலையில் நுண்ணுயிர்த் தொகுப்பின் பன்முகத்தன்மையையும் செழுமையையும் கணிசமாகக் குறைத்தது. மற்றொரு உள்ளீட்டு பூஞ்சைக் கொல்லியான மைக்ளோபுட்டானில், மூன்று அளவுகளிலும் புழுக்களின் உடல் எடை அதிகரிப்பைக் கணிசமாகக் குறைத்தது. இந்த விளைவு இரண்டாவது (5-ஆம் நாள்) மற்றும் மூன்றாவது (8-ஆம் நாள்) காலக்கட்டங்களில் தெளிவாகத் தெரிந்தது. இதற்கு மாறாக, சைப்ரோடினில் மற்றும் கேப்டன் ஆகியவை கட்டுப்பாட்டுக் குழுவுடன் ஒப்பிடும்போது எடை அதிகரிப்பையோ அல்லது உயிர்வாழ்வையோ கணிசமாகக் குறைக்கவில்லை. எங்களின் அறிவுக்கு எட்டியவரை, நேரடி மகரந்தத் தாக்கத்திலிருந்து மக்காச்சோளப் பயிர்களைப் பாதுகாக்கப் பயன்படுத்தப்படும் வெவ்வேறு பூஞ்சைக் கொல்லிகளின் கள அளவுகளின் விளைவுகளைக் கண்டறியும் முதல் ஆய்வு இதுவாகும்.
கட்டுப்பாட்டு சிகிச்சைகளுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​அனைத்து பூஞ்சைக்கொல்லி சிகிச்சைகளும் உடல் எடை அதிகரிப்பைக் கணிசமாகக் குறைத்தன. லார்வாக்களின் உடல் எடை அதிகரிப்பில் மான்கோசெப் அதிகபட்ச விளைவைக் கொண்டிருந்தது, சராசரியாக 51% குறைப்பு ஏற்பட்டது, அதைத் தொடர்ந்து பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் இருந்தது. இருப்பினும், மற்ற ஆய்வுகள் பூஞ்சைக்கொல்லிகளின் கள அளவுகளால் லார்வா நிலைகளில் பாதகமான விளைவுகள் எதுவும் பதிவாகவில்லை44. டைதியோகார்பமேட் உயிர்க்கொல்லிகள் குறைந்த உடனடி நச்சுத்தன்மையைக் கொண்டிருப்பதாகக் காட்டப்பட்டிருந்தாலும்45, மான்கோசெப் போன்ற எத்திலீன் பிஸ்டைதியோகார்பமேட்டுகள் (EBDCS) யூரியா எத்திலீன் சல்பைடாகச் சிதைவடையக்கூடும். மற்ற விலங்குகளில் அதன் சடுதிமாற்ற விளைவுகளைக் கருத்தில் கொண்டு, இந்தச் சிதைவுப் பொருளே காணப்பட்ட விளைவுகளுக்குக் காரணமாக இருக்கலாம்46,47. எத்திலீன் தியோயூரியாவின் உருவாக்கம், உயர்ந்த வெப்பநிலை48, ஈரப்பத நிலைகள்49 மற்றும் தயாரிப்பு சேமிப்பின் காலம்50 போன்ற காரணிகளால் பாதிக்கப்படுகிறது என்று முந்தைய ஆய்வுகள் காட்டியுள்ளன. உயிர்க்கொல்லிகளுக்கான சரியான சேமிப்பு நிலைமைகள் இந்தப் பக்க விளைவுகளைத் தணிக்க உதவும். மேலும், பைரித்தியோபைடின் நச்சுத்தன்மை குறித்து ஐரோப்பிய உணவுப் பாதுகாப்பு ஆணையம் கவலை தெரிவித்துள்ளது, இது மற்ற விலங்குகளின் செரிமான அமைப்புகளுக்கு புற்றுநோயை உண்டாக்கும் என்று நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது51.
மான்கோசெப், பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் டிரைஃப்ளாக்ஸிஸ்ட்ரோபின் ஆகியவற்றை வாய்வழியாக உட்கொள்வது சோளத் துளைப்பான் புழுக்களின் இறப்பு விகிதத்தை அதிகரிக்கிறது. இதற்கு மாறாக, மைக்ளோபுட்டானில், சிப்ரோசைக்ளின் மற்றும் கேப்டன் ஆகியவை இறப்பு விகிதத்தில் எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தவில்லை. இந்த முடிவுகள், கேப்டன் முதிர்ந்த ஓ. லிக்னேரியா மற்றும் ஏபிஸ் மெல்லிஃபெரா எல். (ஹைமனோப்டெரா, ஏபிசிடே) ஆகியவற்றின் உயிர்வாழ்வை கணிசமாகக் குறைப்பதாகக் காட்டிய லடுர்னர் மற்றும் குழுவினரின் முடிவுகளிலிருந்து வேறுபடுகின்றன. மேலும், கேப்டன் மற்றும் போஸ்காலிட் போன்ற பூஞ்சைக்கொல்லிகள் புழுக்களின் இறப்பை ஏற்படுத்துவதாகவும்52,53,54 அல்லது அவற்றின் உணவுப் பழக்கத்தை மாற்றுவதாகவும்55 கண்டறியப்பட்டுள்ளன. இந்த மாற்றங்கள், மகரந்தத்தின் ஊட்டச்சத்துத் தரத்தையும், இறுதியில் புழுப் பருவத்தின் ஆற்றல் ஈட்டத்தையும் பாதிக்கக்கூடும். கட்டுப்பாட்டுக் குழுவில் காணப்பட்ட இறப்பு விகிதம் மற்ற ஆய்வுகளுடன்56,57 ஒத்துப்போகிறது.
எங்கள் ஆய்வில் காணப்பட்ட ஆண் தேனீக்களுக்குச் சாதகமான பாலின விகிதமானது, முன்பு வைசென்ஸ் மற்றும் போஷ் ஆகியோரால் ஓ. கார்னுடா இனத்திற்கு முன்மொழியப்பட்டதைப் போலவே, போதுமான இனச்சேர்க்கை இல்லாதது மற்றும் பூக்கும் காலத்தில் நிலவும் மோசமான வானிலை போன்ற காரணிகளால் விளக்கப்படலாம். எங்கள் ஆய்வில் பெண் மற்றும் ஆண் தேனீக்களுக்கு இனச்சேர்க்கை செய்ய நான்கு நாட்கள் இருந்தபோதிலும் (இது பொதுவாக வெற்றிகரமான இனச்சேர்க்கைக்குப் போதுமானதாகக் கருதப்படும் ஒரு காலகட்டம்), மன அழுத்தத்தைக் குறைப்பதற்காக நாங்கள் வேண்டுமென்றே ஒளியின் செறிவைக் குறைத்தோம். இருப்பினும், இந்த மாற்றம் தற்செயலாக இனச்சேர்க்கை செயல்முறையில் குறுக்கிடக்கூடும்61. மேலும், தேனீக்கள் மழை மற்றும் குறைந்த வெப்பநிலை (<5°C) உள்ளிட்ட பல நாட்கள் பாதகமான வானிலையை எதிர்கொள்கின்றன, இதுவும் இனச்சேர்க்கையின் வெற்றியை எதிர்மறையாகப் பாதிக்கக்கூடும்4,23.
எங்கள் ஆய்வு முழு லார்வா நுண்ணுயிர்த் தொகுதியையும் மையமாகக் கொண்டிருந்தாலும், தேனீக்களின் ஊட்டச்சத்து மற்றும் பூஞ்சைக்கொல்லி வெளிப்பாட்டிற்கு முக்கியமானதாக இருக்கக்கூடிய பாக்டீரியா சமூகங்களுக்கு இடையிலான சாத்தியமான உறவுகள் குறித்த நுண்ணறிவை எங்கள் முடிவுகள் வழங்குகின்றன. உதாரணமாக, சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தத்தை உட்கொண்ட லார்வாக்களுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​மான்கோசெப்-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மகரந்தத்தை உட்கொண்ட லார்வாக்களில் நுண்ணுயிர் சமூக அமைப்பு மற்றும் எண்ணிக்கை கணிசமாகக் குறைந்திருந்தது. சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தத்தை உட்கொண்ட லார்வாக்களில், புரோட்டியோபாக்டீரியா மற்றும் ஆக்டினோபாக்டீரியா ஆகிய பாக்டீரியா குழுக்கள் ஆதிக்கம் செலுத்தின, மேலும் அவை பெரும்பாலும் காற்றுவாழ் அல்லது விருப்ப காற்றுவாழ் உயிரினங்களாக இருந்தன. பொதுவாக தனித்து வாழும் தேனீ இனங்களுடன் தொடர்புடைய டெல்ஃப்ட் பாக்டீரியாக்கள், நுண்ணுயிர் எதிர்ப்புச் செயல்பாட்டைக் கொண்டிருப்பதாக அறியப்படுகிறது, இது நோய்க்கிருமிகளுக்கு எதிரான ஒரு சாத்தியமான பாதுகாப்புப் பங்கைக் குறிக்கிறது. மற்றொரு பாக்டீரியா இனமான சூடோமோனாஸ், சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தத்தை உட்கொண்ட லார்வாக்களில் மிகுதியாகக் காணப்பட்டது, ஆனால் மான்கோசெப்-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட லார்வாக்களில் கணிசமாகக் குறைந்திருந்தது. எங்கள் முடிவுகள், O. bicornis35 மற்றும் பிற தனித்து வாழும் குளவிகளில்34 சூடோமோனாஸ் மிகவும் அதிகமாகக் காணப்படும் பேரினங்களில் ஒன்று என்பதை அடையாளம் காட்டிய முந்தைய ஆய்வுகளை ஆதரிக்கின்றன. ஓ. கார்னிஃப்ரோன்ஸின் ஆரோக்கியத்தில் சூடோமோனாஸின் பங்கு குறித்த சோதனை ஆதாரங்கள் ஆய்வு செய்யப்படவில்லை என்றாலும், இந்த பாக்டீரியா பேடரஸ் ஃபசிப்ஸ் வண்டில் பாதுகாப்பு நச்சுகளின் தொகுப்பை ஊக்குவிப்பதாகவும், இன் விட்ரோவில் அர்ஜினைன் வளர்சிதை மாற்றத்தை ஊக்குவிப்பதாகவும் காட்டப்பட்டுள்ளது 35, 65. இந்த அவதானிப்புகள் ஓ. கார்னிஃப்ரோன்ஸ் லார்வாக்களின் வளர்ச்சி காலத்தில் வைரஸ் மற்றும் பாக்டீரியா பாதுகாப்பில் ஒரு சாத்தியமான பங்கைக் குறிக்கின்றன. மைக்ரோபாக்டீரியம் என்பது எங்கள் ஆய்வில் அடையாளம் காணப்பட்ட மற்றொரு பேரினமாகும், இது பட்டினி நிலைகளின் கீழ் கருப்பு சிப்பாய் ஈ லார்வாக்களில் அதிக எண்ணிக்கையில் இருப்பதாகக் கூறப்படுகிறது66. ஓ. கார்னிஃப்ரோன்ஸ் லார்வாக்களில், மைக்ரோபாக்டீரியாக்கள் மன அழுத்த நிலைகளின் கீழ் குடல் மைக்ரோபயோமின் சமநிலை மற்றும் மீள்தன்மைக்கு பங்களிக்கக்கூடும். கூடுதலாக, ரோடோகாக்கஸ் ஓ. கார்னிஃப்ரோன்ஸ் லார்வாக்களில் காணப்படுகிறது மற்றும் அதன் நச்சு நீக்கும் திறன்களுக்காக அறியப்படுகிறது67. இந்த பேரினம் ஏ. ஃப்ளோரியாவின் குடலிலும் காணப்படுகிறது, ஆனால் மிகக் குறைந்த அளவில் உள்ளது68. லார்வாக்களின் வளர்சிதை மாற்ற செயல்முறைகளை மாற்றக்கூடிய பல்வேறு மரபணு மாறுபாடுகள், எண்ணற்ற நுண்ணுயிர் இனங்களில் காணப்படுவதை எங்கள் முடிவுகள் நிரூபிக்கின்றன. இருப்பினும், ஓ. கார்னிஃப்ரோன்ஸின் செயல்பாட்டுப் பன்முகத்தன்மை குறித்து இன்னும் சிறந்த புரிதல் தேவைப்படுகிறது.
சுருக்கமாக, மான்கோசெப், பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் டிரைஃப்ளாக்ஸிஸ்ட்ரோபின் ஆகியவை சோளத் துளைப்பான் புழுக்களின் உடல் எடை அதிகரிப்பைக் குறைத்து, அவற்றின் இறப்பு விகிதத்தை அதிகரித்துள்ளன என்பதை முடிவுகள் சுட்டிக்காட்டுகின்றன. மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களின் மீது பூஞ்சைக்கொல்லிகளின் விளைவுகள் குறித்த கவலை அதிகரித்து வந்தாலும், இந்தச் சேர்மங்களின் எஞ்சிய வளர்சிதை மாற்றப் பொருட்களின் விளைவுகளைப் பற்றி நன்கு புரிந்துகொள்ள வேண்டிய அவசியம் உள்ளது. இந்த முடிவுகளை, ஒருங்கிணைந்த மகரந்தச் சேர்க்கையாளர் மேலாண்மைத் திட்டங்களுக்கான பரிந்துரைகளில் இணைத்துக்கொள்ளலாம். இத்திட்டங்கள், பூஞ்சைக்கொல்லிகளைத் தேர்ந்தெடுப்பதன் மூலமும், அவற்றைப் பயன்படுத்தும் நேரத்தை மாற்றுவதன் மூலமும், அல்லது குறைந்த தீங்கு விளைவிக்கும் மாற்று வழிகளைப் பயன்படுத்த ஊக்குவிப்பதன் மூலமும், பழ மரங்கள் பூக்கும் முன்பும் பின்பும் சில பூஞ்சைக்கொல்லிகளைப் பயன்படுத்துவதைத் தவிர்க்க விவசாயிகளுக்கு உதவுகின்றன. பூஞ்சைக்கொல்லிகளைத் தேர்ந்தெடுக்கும்போது தற்போதுள்ள தெளிப்புத் திட்டங்களைச் சரிசெய்வது மற்றும் தெளிக்கும் நேரத்தை மாற்றுவது அல்லது குறைந்த அபாயகரமான மாற்று வழிகளின் பயன்பாட்டை ஊக்குவிப்பது போன்ற பூச்சிக்கொல்லி பயன்பாடு குறித்த பரிந்துரைகளை உருவாக்குவதற்கு இந்தத் தகவல் முக்கியமானது. பூஞ்சைக்கொல்லிகளால் பாலின விகிதம், உணவுப் பழக்கம், குடல் நுண்ணுயிரிகள் மற்றும் சோளத் துளைப்பானின் எடை இழப்பு மற்றும் இறப்புக்கு அடிப்படையான மூலக்கூறு வழிமுறைகள் ஆகியவற்றில் ஏற்படும் பாதகமான விளைவுகள் குறித்து மேலும் ஆராய்ச்சி தேவைப்படுகிறது.
படம் 1 மற்றும் 2-இல் உள்ள மூலத் தரவுகள் 1, 2 மற்றும் 3, figshare தரவுக் களஞ்சியத்தில் DOI: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 மற்றும் https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996233 ஆகிய முகவரிகளில் பதிவேற்றப்பட்டுள்ளன. தற்போதைய ஆய்வில் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட வரிசைமுறைகள் (படம் 4, 5), NCBI SRA களஞ்சியத்தில் PRJNA1023565 என்ற அணுகல் எண்ணின் கீழ் கிடைக்கின்றன.
போஷ், ஜே. மற்றும் கெம்ப், டபிள்யூ.பி. வேளாண் பயிர்கள் மற்றும் பழ மரங்களின் மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களாக தேனீ இனங்களின் வளர்ச்சி மற்றும் நிலைநிறுத்தம்: ஆஸ்மியா பேரினத்தின் உதாரணம். (ஹைமனோப்டெரா: மெகாசிலிடே). புல். என்டோமோர். ரிசோர்ஸ். 92, 3–16 (2002).
பார்க்கர், எம்.ஜி. மற்றும் பலர். நியூயார்க் மற்றும் பென்சில்வேனியாவில் உள்ள ஆப்பிள் விவசாயிகளிடையே மகரந்தச் சேர்க்கை நடைமுறைகள் மற்றும் மாற்று மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்கள் பற்றிய கருத்துக்கள். புதுப்பிப்பு. வேளாண்மை. உணவு அமைப்புகள். 35, 1–14 (2020).
கோச் ஐ., லான்ஸ்டோர்ஃப் ஈ.டபிள்யூ, ஆர்ட்ஸ் டி.ஆர், பிட்ஸ்-சிங்கர் டி.எல் மற்றும் ரிக்கெட்ஸ் டி.எச். பூர்வீகத் தேனீக்களைப் பயன்படுத்தி பாதாம் மகரந்தச் சேர்க்கையின் சூழலியல் மற்றும் பொருளாதாரம். ஜே. எகனாமிக்ஸ். நியூமோர். 111, 16–25 (2018).
லீ, ஈ., ஹீ, ஒய்., மற்றும் பார்க், ஒய்.-எல். டிராகோபன் பருவகால நிகழ்வுகளில் காலநிலை மாற்றத்தின் விளைவுகள்: இனத்தொகை மேலாண்மைக்கான தாக்கங்கள். கிளைம்ப். சேஞ்ச் 150, 305–317 (2018).
ஆர்ட்ஸ், டி.ஆர் மற்றும் பிட்ஸ்-சிங்கர், டி.எல். இரண்டு பராமரிக்கப்படும் தனித்த தேனீக்களின் (ஓஸ்மியா லிக்னாரியா மற்றும் மெகாசைல் ரொட்டுண்டேட்டா) கூடு கட்டும் நடத்தையின் மீது பூஞ்சைக்கொல்லி மற்றும் துணைக்கூறு தெளிப்புகளின் விளைவு. ப்ளோஸ் ஒன் 10, e0135688 (2015).
போவைஸ், எஸ். மற்றும் பலர். குறைந்த நச்சுத்தன்மை கொண்ட பயிர் பூஞ்சைக்கொல்லி (ஃபென்புகோனசோல்), காட்டுத் தனித் தேனீக்களின் ஆண் இனப்பெருக்கத் தர சமிக்ஞைகளில் குறுக்கிட்டு, இனச்சேர்க்கை வெற்றியை குறைக்கிறது. ஜே. ஆப்ஸ். சூழலியல். 59, 1596–1607 (2022).
ஸ்கோலாஸ்ட்ரா எஃப். மற்றும் பலர். நியோனிகோட்டினாய்டு பூச்சிக்கொல்லிகளும் எர்கோஸ்டெரால் உயிரியக்கமும் மூன்று தேனீ இனங்களில் பூஞ்சைக்கொல்லிகளின் கூட்டுச் செயலால் ஏற்படும் இறப்பைத் தடுக்கின்றன. பூச்சிக் கட்டுப்பாடு. அறிவியல். 73, 1236–1243 (2017).
குனேமன் ஜேஜி, கில்லுங் ஜே, வான் டைக் எம்டி, ஃபோர்டைஸ் ஆர்எஃப் மற்றும் டான்ஃபோர்த் பிஎன். தனித்த குளவிப் புழுக்கள், தண்டுக்கூடுகளில் வாழும் ஆஸ்மியா கார்னிஃப்ரோன்ஸ் (மெகாசிலிடே) தேனீக்களுக்கு மகரந்தத்தால் வழங்கப்படும் பாக்டீரியா பன்முகத்தன்மையை மாற்றுகின்றன. ஃபிரண்ட். மைக்ரோஆர்கானிசம். 13, 1057626 (2023).
தரம்பால் பி.எஸ்., டான்ஃபோர்த் பி.என். மற்றும் ஸ்டெஃபான் எஸ்.ஏ. நொதித்த மகரந்தத்தில் உள்ள புற ஒட்டுண்ணி நுண்ணுயிரிகள், தனித்து வாழும் தேனீக்களின் வளர்ச்சிக்கு மகரந்தத்தைப் போலவே முக்கியமானவை. சூழலியல். பரிணாமம். 12. e8788 (2022).
கெல்டெரர் எம், மனிசி எல்எம், கபுடோ எஃப் மற்றும் தல்ஹைமர் எம். ஆப்பிள் தோட்டங்களில் மறுவிதைப்பு நோய்களைக் கட்டுப்படுத்த வரிசைகளுக்கு இடையில் நடவு செய்தல்: நுண்ணுயிர் குறிகாட்டிகளை அடிப்படையாகக் கொண்ட ஒரு நடைமுறை செயல்திறன் ஆய்வு. பிளான்ட் சாயில் 357, 381–393 (2012).
மார்ட்டின் பி.எல்., கிராவ்சிக் டி., கோடாதாடி எஃப்., அச்சிமோவிச் எஸ்.ஜி. மற்றும் பீட்டர் கே.ஏ. மத்திய அட்லாண்டிக் அமெரிக்காவில் ஆப்பிள்களின் கசப்பு அழுகல்: காரணமான இனங்களின் மதிப்பீடு மற்றும் பிராந்திய வானிலை நிலைமைகள் மற்றும் சாகுபடி ரக பாதிப்புத்தன்மையின் தாக்கம். பைட்டோபேதாலஜி 111, 966–981 (2021).
கல்லன் எம்ஜி, தாம்சன் எல்ஜே, கரோலன் ஜேகே, ஸ்டவுட் ஜேகே மற்றும் ஸ்டான்லி டிஏ பூஞ்சைக்கொல்லிகள், களைக்கொல்லிகள் மற்றும் தேனீக்கள்: தற்போதுள்ள ஆராய்ச்சி மற்றும் முறைகளின் ஒரு முறையான ஆய்வு. பிஎல்ஓஎஸ் ஒன் 14, e0225743 (2019).
பில்லிங், ஈ.டி மற்றும் ஜெப்சன், பி.சி. தேனீக்கள் (Apis mellifera) மீதான ஈபிஐ பூஞ்சைக்கொல்லிகள் மற்றும் பைரெத்ராய்டு பூச்சிக்கொல்லிகளின் ஒருங்கிணைந்த விளைவுகள். பெஸ்ட்ஸ் தி சயின்ஸ். 39, 293–297 (1993).
முசென், ஈ.சி., லோபஸ், ஜே.இ. மற்றும் பெங், சி.ஒய். தேனீப் புழுக்களான ஏபிஸ் மெல்லிஃபெரா எல். (ஹைமனோப்டெரா: ஏபிடே) ஆகியவற்றின் வளர்ச்சி மற்றும் மேம்பாட்டில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பூஞ்சைக்கொல்லிகளின் விளைவு. வெட்னஸ்டே. நியூமோர். 33, 1151-1154 (2004).
வான் டைக், எம்., முல்லன், ஈ., விக்ஸ்டெட், டி., மற்றும் மெக்கார்ட், எஸ். மரத் தோட்டங்களில் மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களைப் பாதுகாக்க பூச்சிக்கொல்லி பயன்பாட்டிற்கான முடிவெடுக்கும் வழிகாட்டி (கார்னெல் பல்கலைக்கழகம், 2018).
இவாசாகி, ஜே.எம் மற்றும் ஹோகெண்டூர்ன், கே. பூச்சிக்கொல்லிகள் அல்லாதவற்றுக்குத் தேனீக்கள் ஆட்படுதல்: முறைகள் மற்றும் அறிக்கையிடப்பட்ட முடிவுகளின் ஒரு மீளாய்வு. வேளாண்மை. சூழலியம். புதன்கிழமை. 314, 107423 (2021).
கோபிட் ஏஎம், கிளிங்கர் ஈ, காக்ஸ்-ஃபோஸ்டர் டிஎல், ராமிரெஸ் ஆர்ஏ மற்றும் பிட்ஸ்-சிங்கர் டிஎல். ஆஸ்மியா லிக்னாரியா (ஹைமனோப்டெரா: மெகாசிலிடே) புழுக்களின் வளர்ச்சியில் வழங்கல் வகை மற்றும் பூச்சிக்கொல்லி வெளிப்பாட்டின் விளைவு. வெட்னஸ்டே. என்டோமோர். 51, 240–251 (2022).
கோபிட் ஏ.எம் மற்றும் பிட்ஸ்-சிங்கர் டி.எல். தனித்த, காலிக் கூடு தேனீக்களுக்கு பூச்சிக்கொல்லி வெளிப்பாட்டின் பாதைகள். புதன்கிழமை. நியூமோர். 47, 499–510 (2018).
பான், என்.டி. மற்றும் பலர். முதிர்ந்த ஜப்பானிய தோட்டத் தேனீக்களில் (Osmia cornifrons) பூச்சிக்கொல்லி நச்சுத்தன்மையை மதிப்பிடுவதற்கான ஒரு புதிய உட்கொள்ளல் உயிரியல் மதிப்பீட்டு நெறிமுறை. தி சயின்ஸ். ரிப்போர்ட்ஸ் 10, 9517 (2020).