பூஞ்சைக் கொல்லி கூடுதல் சேர்க்கை, தனித்த மேசன் தேனீக்களில் நிகர ஆற்றல் ஆதாயத்தையும் நுண்ணுயிர் பன்முகத்தன்மையையும் குறைக்கிறது.

Nature.com ஐப் பார்வையிட்டதற்கு நன்றி. நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவியின் பதிப்பில் CSS ஆதரவு குறைவாகவே உள்ளது. சிறந்த முடிவுகளுக்கு, உங்கள் உலாவியின் புதிய பதிப்பைப் பயன்படுத்துமாறு பரிந்துரைக்கிறோம் (அல்லது Internet Explorer இல் இணக்கத்தன்மை பயன்முறையை முடக்கவும்). இதற்கிடையில், தொடர்ச்சியான ஆதரவை உறுதிசெய்ய, ஸ்டைலிங் அல்லது ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் தளத்தைக் காண்பிக்கிறோம்.
மரங்களின் பழங்கள் பூக்கும் போது பூஞ்சைக் கொல்லிகள் பெரும்பாலும் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, மேலும் அவை பூச்சி மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களை அச்சுறுத்தக்கூடும். இருப்பினும், தேனீ அல்லாத மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்கள் (எ.கா., தனித்த தேனீக்கள், ஆஸ்மியா கார்னிஃப்ரான்கள்) பூக்கும் போது ஆப்பிள்களில் பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் தொடர்பு மற்றும் அமைப்பு ரீதியான பூஞ்சைக் கொல்லிகளுக்கு எவ்வாறு பதிலளிக்கின்றன என்பது பற்றி அதிகம் அறியப்படவில்லை. இந்த அறிவு இடைவெளி பாதுகாப்பான செறிவுகள் மற்றும் பூஞ்சைக் கொல்லி தெளிக்கும் நேரத்தை தீர்மானிக்கும் ஒழுங்குமுறை முடிவுகளை கட்டுப்படுத்துகிறது. இரண்டு தொடர்பு பூஞ்சைக் கொல்லிகள் (கேப்டன் மற்றும் மான்கோசெப்) மற்றும் நான்கு இடை அடுக்கு/பைட்டோசிஸ்டம் பூஞ்சைக் கொல்லிகள் (சிப்ரோசைக்ளின், மைக்ளோபியூட்டானில், பைரோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் ட்ரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபின்) ஆகியவற்றின் விளைவுகளை நாங்கள் மதிப்பிட்டோம். லார்வா எடை அதிகரிப்பு, உயிர்வாழ்வு, பாலின விகிதம் மற்றும் பாக்டீரியா பன்முகத்தன்மை ஆகியவற்றில் ஏற்படும் விளைவுகள். வயல் பயன்பாட்டிற்கு தற்போது பரிந்துரைக்கப்பட்ட டோஸ் (1X), அரை டோஸ் (0.5X) மற்றும் குறைந்த டோஸ் (0.1X) ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் மகரந்தம் மூன்று அளவுகளில் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஒரு நாள்பட்ட வாய்வழி உயிரியல் பகுப்பாய்வைப் பயன்படுத்தி மதிப்பீடு நடத்தப்பட்டது. மான்கோசெப் மற்றும் பைரிடிசோலின் அனைத்து டோஸ்களும் உடல் எடை மற்றும் லார்வா உயிர்வாழ்வைக் கணிசமாகக் குறைத்தன. பின்னர், அதிக இறப்புக்கு காரணமான பூஞ்சைக் கொல்லியான மான்கோசெப்பின் லார்வா பாக்டீரியோமை வகைப்படுத்த 16S மரபணுவை வரிசைப்படுத்தினோம். மான்கோசெப் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மகரந்தத்தை உண்ணும் லார்வாக்களில் பாக்டீரியா பன்முகத்தன்மை மற்றும் மிகுதி கணிசமாகக் குறைக்கப்பட்டதைக் கண்டறிந்தோம். பூக்கும் போது இந்த பூஞ்சைக் கொல்லிகளில் சிலவற்றைத் தெளிப்பது O. கார்னிஃப்ரான்களின் ஆரோக்கியத்திற்கு மிகவும் தீங்கு விளைவிக்கும் என்பதை எங்கள் ஆய்வக முடிவுகள் குறிப்பிடுகின்றன. பழ மரப் பாதுகாப்புப் பொருட்களின் நிலையான பயன்பாடு தொடர்பான எதிர்கால மேலாண்மை முடிவுகளுக்கு இந்தத் தகவல் பொருத்தமானது மற்றும் மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களைப் பாதுகாப்பதை நோக்கமாகக் கொண்ட ஒழுங்குமுறை செயல்முறைகளுக்கு அடிப்படையாக செயல்படுகிறது.
1970களின் பிற்பகுதியிலும் 1980களின் முற்பகுதியிலும் ஜப்பானில் இருந்து அமெரிக்காவிற்கு தனித்த மேசன் தேனீயான Osmia cornifrons (Hymenoptera: Megachilidae) அறிமுகப்படுத்தப்பட்டது, அன்றிலிருந்து இந்த இனம் நிர்வகிக்கப்பட்ட சுற்றுச்சூழல் அமைப்புகளில் ஒரு முக்கிய மகரந்தச் சேர்க்கைப் பங்கைக் கொண்டுள்ளது. இந்த தேனீயின் இயற்கையான மக்கள் தொகை அமெரிக்காவில் பாதாம் மற்றும் ஆப்பிள் பழத்தோட்டங்களை மகரந்தச் சேர்க்கை செய்யும் தேனீக்களை பூர்த்தி செய்யும் சுமார் 50 வகையான காட்டு தேனீக்களின் ஒரு பகுதியாகும். மேசன் தேனீக்கள் வாழ்விடத் துண்டு துண்டாகப் பிரித்தல், நோய்க்கிருமிகள் மற்றும் பூச்சிக்கொல்லிகள் உட்பட பல சவால்களை எதிர்கொள்கின்றன3,4. பூச்சிக்கொல்லிகளில், பூஞ்சைக் கொல்லிகள் ஆற்றல் ஆதாயம், உணவு தேடுதல் மற்றும் உடல் நிலைப்படுத்தல் ஆகியவற்றைக் குறைக்கின்றன6,7. மேசன் தேனீக்களின் ஆரோக்கியம் நேரடியாக ஆரம்ப மற்றும் எக்டோபாக்டிக் நுண்ணுயிரிகளால் பாதிக்கப்படுகிறது என்று சமீபத்திய ஆராய்ச்சி கூறினாலும், 8,9 பாக்டீரியா மற்றும் பூஞ்சைகள் ஊட்டச்சத்து மற்றும் நோயெதிர்ப்பு மறுமொழிகளை பாதிக்கக்கூடும் என்பதால், மேசன் தேனீக்களின் நுண்ணுயிர் பன்முகத்தன்மையில் பூஞ்சைக் கொல்லியின் வெளிப்பாட்டின் விளைவுகள் இப்போதுதான் ஆய்வு செய்யத் தொடங்கியுள்ளன.
ஆப்பிள் வடு, கசப்பு அழுகல், பழுப்பு அழுகல் மற்றும் நுண்துகள் பூஞ்சை காளான் போன்ற நோய்களுக்கு சிகிச்சையளிக்க, பல்வேறு விளைவுகளைக் கொண்ட பூஞ்சைக் கொல்லிகள் (தொடர்பு மற்றும் அமைப்பு ரீதியானவை) பழத்தோட்டங்களில் பூப்பதற்கு முன்பும் பின்பும் தெளிக்கப்படுகின்றன. பூஞ்சைக் கொல்லிகள் மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களுக்கு பாதிப்பில்லாததாகக் கருதப்படுகின்றன, எனவே அவை பூக்கும் காலத்தில் தோட்டக்காரர்களுக்கு பரிந்துரைக்கப்படுகின்றன; தேனீக்கள் இந்த பூஞ்சைக் கொல்லிகளை வெளிப்படுத்துவதும் உட்கொள்வதும் ஒப்பீட்டளவில் நன்கு அறியப்பட்டதாகும், ஏனெனில் இது அமெரிக்க சுற்றுச்சூழல் பாதுகாப்பு நிறுவனம் மற்றும் பல தேசிய ஒழுங்குமுறை நிறுவனங்களால் பூச்சிக்கொல்லி பதிவு செயல்முறையின் ஒரு பகுதியாகும்12,13,14. இருப்பினும், தேனீக்கள் அல்லாதவற்றில் பூஞ்சைக் கொல்லிகளின் விளைவுகள் குறைவாகவே அறியப்படுகின்றன, ஏனெனில் அவை அமெரிக்காவில் சந்தைப்படுத்தல் அங்கீகார ஒப்பந்தங்களின் கீழ் தேவையில்லை15. கூடுதலாக, பொதுவாக ஒற்றை தேனீக்களை சோதிப்பதற்கான தரப்படுத்தப்பட்ட நெறிமுறைகள் எதுவும் இல்லை16,17, மேலும் சோதனைக்கு தேனீக்களை வழங்கும் காலனிகளை பராமரிப்பது சவாலானது18. காட்டு தேனீக்களில் பூச்சிக்கொல்லிகளின் விளைவுகளை ஆய்வு செய்வதற்காக ஐரோப்பாவிலும் அமெரிக்காவிலும் வெவ்வேறு நிர்வகிக்கப்பட்ட தேனீக்களின் சோதனைகள் அதிகளவில் நடத்தப்பட்டு வருகின்றன, மேலும் O. கார்னிஃப்ரான்களுக்கு சமீபத்தில் தரப்படுத்தப்பட்ட நெறிமுறைகள் உருவாக்கப்பட்டுள்ளன19.
கொம்பு தேனீக்கள் மோனோசைட்டுகள் மற்றும் அவை வணிக ரீதியாக கெண்டை மீன்களில் தேனீக்களுக்கு ஒரு துணைப் பொருளாக அல்லது மாற்றாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. இந்த தேனீக்கள் மார்ச் மற்றும் ஏப்ரல் மாதங்களுக்கு இடையில் தோன்றும், பெண் தேனீக்கள் மூன்று முதல் நான்கு நாட்களுக்கு முன்பு வளரும் ஆண் தேனீக்கள் தோன்றும். இனச்சேர்க்கைக்குப் பிறகு, பெண் தேனீ குழாய் கூடு குழிக்குள் (இயற்கை அல்லது செயற்கை) தொடர்ச்சியான அடைகாக்கும் செல்களை வழங்க மகரந்தம் மற்றும் தேனை தீவிரமாக சேகரிக்கிறது1,20. செல்களுக்குள் உள்ள மகரந்தத்தில் முட்டைகள் இடப்படுகின்றன; பின்னர் பெண் அடுத்த செல்லைத் தயாரிப்பதற்கு முன்பு ஒரு களிமண் சுவரை உருவாக்குகிறது. முதல் நிலை லார்வாக்கள் கோரியனில் மூடப்பட்டு கரு திரவங்களை உண்கின்றன. இரண்டாவது முதல் ஐந்தாவது நிலை (ப்ரீபுபா) வரை, லார்வாக்கள் மகரந்தத்தை உண்கின்றன22. மகரந்த சப்ளை முழுமையாகக் குறைந்துவிட்டால், லார்வாக்கள் கூடுகளை உருவாக்கி, கூட்டுப்புழுவாக மாறி, அதே அடைகாக்கும் அறையில் பெரியவர்களாக வெளிப்படுகின்றன, பொதுவாக கோடையின் பிற்பகுதியில்20,23. பெரியவர்கள் அடுத்த வசந்த காலத்தில் வெளிப்படுகிறார்கள். வயது வந்தோர் உயிர்வாழ்வு உணவு உட்கொள்ளலின் அடிப்படையில் நிகர ஆற்றல் அதிகரிப்பு (எடை அதிகரிப்பு) உடன் தொடர்புடையது. எனவே, மகரந்தத்தின் ஊட்டச்சத்து தரம், அத்துடன் வானிலை அல்லது பூச்சிக்கொல்லிகளின் வெளிப்பாடு போன்ற பிற காரணிகள் உயிர்வாழ்வு மற்றும் ஆரோக்கியத்தை தீர்மானிக்கின்றன24.
பூப்பதற்கு முன்பு பயன்படுத்தப்படும் பூச்சிக்கொல்லிகள் மற்றும் பூஞ்சைக் கொல்லிகள் தாவர நாளங்களுக்குள் பல்வேறு அளவுகளில் நகர முடியும், டிரான்ஸ்லேமினார் (எ.கா., இலைகளின் மேல் மேற்பரப்பில் இருந்து கீழ் மேற்பரப்புக்கு நகர முடியும், சில பூஞ்சைக் கொல்லிகள் போல) 25 உண்மையான முறையான விளைவுகள் வரை. , இது வேர்களில் இருந்து கிரீடத்தை ஊடுருவிச் செல்லக்கூடியது, ஆப்பிள் பூக்களின் தேனுக்குள் நுழையலாம்26, அங்கு அவை வயது வந்த O. கார்னிஃப்ரான்களைக் கொல்லலாம்27. சில பூச்சிக்கொல்லிகள் மகரந்தத்திலும் கசிந்து, மக்காச்சோள லார்வாக்களின் வளர்ச்சியை பாதித்து அவற்றின் மரணத்தை ஏற்படுத்துகின்றன19. சில பூஞ்சைக் கொல்லிகள் தொடர்புடைய இனங்கள் O. லிக்னேரியா28 இன் கூடு கட்டும் நடத்தையை கணிசமாக மாற்றும் என்று மற்ற ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன. கூடுதலாக, பூச்சிக்கொல்லி வெளிப்பாடு காட்சிகளை (பூஞ்சைக் கொல்லிகள் உட்பட) உருவகப்படுத்தும் ஆய்வக மற்றும் கள ஆய்வுகள் பூச்சிக்கொல்லிகள் உடலியல் 22 உருவவியல் 29 மற்றும் தேனீக்கள் மற்றும் சில தனித்த தேனீக்களின் உயிர்வாழ்வை எதிர்மறையாக பாதிக்கின்றன என்பதைக் காட்டுகின்றன. பூக்கும் போது திறந்த பூக்களில் நேரடியாகப் பயன்படுத்தப்படும் பல்வேறு பூஞ்சைக் கொல்லி தெளிப்புகள் லார்வா வளர்ச்சிக்காக பெரியவர்களால் சேகரிக்கப்பட்ட மகரந்தத்தை மாசுபடுத்தக்கூடும், இதன் விளைவுகள் இன்னும் ஆய்வு செய்யப்பட உள்ளன30.
செரிமான அமைப்பின் மகரந்தம் மற்றும் நுண்ணுயிர் சமூகங்களால் லார்வா வளர்ச்சி பாதிக்கப்படுகிறது என்பது அதிகரித்து வருகிறது. தேனீ நுண்ணுயிர் உடல் நிறை31, வளர்சிதை மாற்ற மாற்றங்கள்22 மற்றும் நோய்க்கிருமிகளுக்கு எளிதில் பாதிப்பு32 போன்ற அளவுருக்களை பாதிக்கிறது. முந்தைய ஆய்வுகள் தனித்த தேனீக்களின் நுண்ணுயிரியலில் வளர்ச்சி நிலை, ஊட்டச்சத்துக்கள் மற்றும் சுற்றுச்சூழல் ஆகியவற்றின் செல்வாக்கை ஆய்வு செய்துள்ளன. இந்த ஆய்வுகள் லார்வா மற்றும் மகரந்த நுண்ணுயிரிகளின் அமைப்பு மற்றும் மிகுதியில் ஒற்றுமைகளை வெளிப்படுத்தின, அதே போல் தனித்த தேனீ இனங்களில் மிகவும் பொதுவான பாக்டீரியா வகை சூடோமோனாஸ் மற்றும் டெல்ஃப்டியா ஆகியவையும் உள்ளன. இருப்பினும், தேனீக்களின் ஆரோக்கியத்தைப் பாதுகாப்பதற்கான உத்திகளுடன் பூஞ்சைக் கொல்லிகள் தொடர்புடையதாக இருந்தாலும், நேரடி வாய்வழி வெளிப்பாடு மூலம் லார்வா நுண்ணுயிரிகளில் பூஞ்சைக் கொல்லிகளின் விளைவுகள் ஆராயப்படாமல் உள்ளன.
அமெரிக்காவில் மரப் பழங்களில் பயன்படுத்தப் பதிவுசெய்யப்பட்ட ஆறு பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் பூஞ்சைக் கொல்லிகளின் நிஜ உலக அளவுகளின் விளைவுகளை இந்த ஆய்வு சோதித்தது, இதில் மாசுபட்ட உணவில் இருந்து சோளக் கொம்புப் புழு அந்துப்பூச்சி லார்வாக்களுக்கு வாய்வழியாக வழங்கப்படும் தொடர்பு மற்றும் அமைப்பு ரீதியான பூஞ்சைக் கொல்லிகள் அடங்கும். தொடர்பு மற்றும் அமைப்பு ரீதியான பூஞ்சைக் கொல்லிகள் தேனீக்களின் உடல் எடை அதிகரிப்பைக் குறைத்து இறப்பை அதிகரித்தன, மான்கோசெப் மற்றும் பைரிதியோபைடுடன் தொடர்புடைய மிகக் கடுமையான விளைவுகள். பின்னர் மான்கோசெப் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மகரந்த உணவில் உண்ணப்படும் லார்வாக்களின் நுண்ணுயிர் பன்முகத்தன்மையை கட்டுப்பாட்டு உணவில் உண்ணப்படும் லார்வாக்களுடன் ஒப்பிட்டோம். இறப்புக்கு அடிப்படையான சாத்தியமான வழிமுறைகள் மற்றும் ஒருங்கிணைந்த பூச்சி மற்றும் மகரந்தச் சேர்க்கை மேலாண்மை (IPPM)36 திட்டங்களுக்கான தாக்கங்களைப் பற்றி நாங்கள் விவாதிக்கிறோம்.
கூட்டுப்புழுக்களில் குளிர்காலத்தை மிஞ்சும் வயதுவந்த O. கார்னிஃப்ரான்கள், பிக்லர்வில்லே, PA இல் உள்ள பழ ஆராய்ச்சி மையத்திலிருந்து பெறப்பட்டு, −3 முதல் 2°C (±0.3°C) வெப்பநிலையில் சேமிக்கப்பட்டன. சோதனைக்கு முன் (மொத்தம் 600 கூட்டுப்புழுக்கள்). மே 2022 இல், 100 O. கார்னிஃப்ரான்கள் கூடுகளை தினமும் பிளாஸ்டிக் கோப்பைகளாக மாற்றினர் (ஒரு கோப்பைக்கு 50 கூட்டுப்புழுக்கள், DI 5 செ.மீ × 15 செ.மீ நீளம்) மற்றும் துடைப்பான்கள் கோப்பைகளுக்குள் வைக்கப்பட்டன, இது திறப்பை ஊக்குவிக்கவும் மெல்லக்கூடிய அடி மூலக்கூறை வழங்கவும், கல் தேனீக்கள் மீதான அழுத்தத்தைக் குறைக்கவும் உதவியது. கூட்டுப்புழுக்கள் கொண்ட இரண்டு பிளாஸ்டிக் கோப்பைகளை ஒரு பூச்சி கூண்டில் (30 × 30 × 30 செ.மீ, BugDorm MegaView Science Co. Ltd., தைவான்) 50% சுக்ரோஸ் கரைசலைக் கொண்ட 10 மில்லி ஊட்டிகளுடன் வைத்து, மூடல் மற்றும் இனச்சேர்க்கையை உறுதி செய்ய நான்கு நாட்கள் சேமிக்கவும். 23°C, ஈரப்பதம் 60%, ஒளிக்காலம் 10 l (குறைந்த தீவிரம்): 14 நாட்கள். ஆப்பிள் பூக்கும் உச்சக்கட்டத்தின் போது இரண்டு செயற்கை கூடுகளில் 100 இனச்சேர்க்கை செய்யப்பட்ட பெண் மற்றும் ஆண் மீன்கள் ஆறு நாட்களுக்கு (ஒரு நாளைக்கு 100) தினமும் காலையில் விடுவிக்கப்பட்டன (பொறி கூடு: அகலம் 33.66 × உயரம் 30.48 × நீளம் 46.99 செ.மீ; துணை படம் 1). பென்சில்வேனியா மாநில ஆர்போரேட்டத்தில், செர்ரி (ப்ரூனஸ் செராசஸ் 'யூபாங்க்' ஸ்வீட் செர்ரி பை™), பீச் (ப்ரூனஸ் பெர்சிகா 'கண்டெண்டர்'), ப்ரூனஸ் பெர்சிகா 'பிஎஃப் 27ஏ' ஃபிளமின் ஃப்யூரி®), பேரிக்காய் (பைரஸ் பெரிஃபோலியா 'ஒலிம்பிக்', பைரஸ் பெரிஃபோலியா 'ஷிங்கோ', பைரஸ் பெரிஃபோலியா 'ஷின்சேக்கி'), கொரோனாரியா ஆப்பிள் மரம் (மாலஸ் கொரோனாரியா) மற்றும் ஏராளமான ஆப்பிள் மரங்கள் (மாலஸ் கொரோனாரியா, மாலஸ்), உள்நாட்டு ஆப்பிள் மரம் 'கோ-ஆப் 30' எண்டர்பிரைஸ்™, மாலஸ் ஆப்பிள் மரம் 'கோ-ஆப் 31' வைன்கிரிஸ்ப்™, பிகோனியா 'ஃப்ரீடம்', பெகோனியா 'கோல்டன் டெலிசியஸ்', பெகோனியா 'நோவா ஸ்பை') அருகே வைக்கப்பட்டுள்ளது. ஒவ்வொரு நீல பிளாஸ்டிக் பறவை இல்லமும் இரண்டு மரப் பெட்டிகளின் மேல் பொருந்துகிறது. ஒவ்வொரு கூடு பெட்டியிலும் 800 வெற்று கிராஃப்ட் பேப்பர் குழாய்கள் (சுழல் திறந்த, 0.8 செ.மீ ஐடி × 15 செ.மீ எல்) (ஜோன்ஸ்வில் பேப்பர் டியூப் கோ., மிச்சிகன்) ஒளிபுகா செல்லோபேன் குழாய்களில் செருகப்பட்டன (0.7 OD பிளாஸ்டிக் பிளக்குகளைப் பார்க்கவும் (T-1X பிளக்குகள்) கூடு கட்டும் இடங்களை வழங்குகின்றன.
இரண்டு கூடு பெட்டிகளும் கிழக்கு நோக்கி இருந்தன, மேலும் அவை பச்சை நிற பிளாஸ்டிக் தோட்ட வேலியால் மூடப்பட்டிருந்தன (எவர்பில்ட் மாதிரி #889250EB12, திறப்பு அளவு 5 × 5 செ.மீ., 0.95 மீ × 100 மீ) கொறித்துண்ணிகள் மற்றும் பறவைகள் அணுகலைத் தடுக்க, கூடு பெட்டி மண் பெட்டிகளுக்கு அடுத்த மண் மேற்பரப்பில் வைக்கப்பட்டன. கூடு பெட்டி (துணை படம் 1a). சோள துளைப்பான் முட்டைகள் தினமும் 30 குழாய்களை கூடுகளிலிருந்து சேகரித்து ஆய்வகத்திற்கு கொண்டு செல்வதன் மூலம் சேகரிக்கப்பட்டன. கத்தரிக்கோலைப் பயன்படுத்தி, குழாயின் முடிவில் ஒரு வெட்டு செய்து, பின்னர் அடைகாக்கும் செல்களை வெளிப்படுத்த சுழல் குழாயை பிரித்தெடுக்கவும். தனிப்பட்ட முட்டைகள் மற்றும் அவற்றின் மகரந்தம் ஒரு வளைந்த ஸ்பேட்டூலாவைப் பயன்படுத்தி அகற்றப்பட்டன (மைக்ரோஸ்லைடு கருவி கிட், பயோக்விப் தயாரிப்புகள் இன்க்., கலிபோர்னியா). முட்டைகள் ஈரமான வடிகட்டி காகிதத்தில் அடைகாக்கப்பட்டு, எங்கள் சோதனைகளில் பயன்படுத்தப்படுவதற்கு முன்பு 2 மணி நேரம் பெட்ரி டிஷில் வைக்கப்பட்டன (துணை படம் 1b-d).
ஆய்வகத்தில், ஆப்பிள் பூக்கும் முன்பும், பூக்கும் போதும் பயன்படுத்தப்படும் ஆறு பூஞ்சைக் கொல்லிகளின் வாய்வழி நச்சுத்தன்மையை மூன்று செறிவுகளில் (0.1X, 0.5X, மற்றும் 1X, இங்கு 100 கேலன் தண்ணீர்/ஏக்கருக்கு 1X என்பது பயன்படுத்தப்படும் குறி. அதிக வயல் அளவு = வயலில் செறிவு). , அட்டவணை 1). ஒவ்வொரு செறிவும் 16 முறை மீண்டும் மீண்டும் செய்யப்பட்டது (n = 16). இரண்டு தொடர்பு பூஞ்சைக் கொல்லிகள் (அட்டவணை S1: மான்கோசெப் 2696.14 பிபிஎம் மற்றும் கேப்டன் 2875.88 பிபிஎம்) மற்றும் நான்கு முறையான பூஞ்சைக் கொல்லிகள் (அட்டவணை S1: பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் 250.14 பிபிஎம்; ட்ரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபின் 110.06 பிபிஎம்; மைக்ளோபியூட்டானில் அசோல் 75 .12 பிபிஎம்; சைப்ரோடினில் 280.845 பிபிஎம்) பழங்கள், காய்கறிகள் மற்றும் அலங்கார பயிர்களுக்கு நச்சுத்தன்மை. ஒரு கிரைண்டரைப் பயன்படுத்தி மகரந்தத்தை ஒரே மாதிரியாக மாற்றினோம், 0.20 கிராம் கிணற்றுக்கு (24-கிணறு ஃபால்கன் தட்டு) மாற்றினோம், மேலும் 1 μL பூஞ்சைக் கொல்லி கரைசலைச் சேர்த்து கலந்து 1 மிமீ ஆழமான கிணறுகளுடன் பிரமிடு மகரந்தத்தை உருவாக்கினோம், அதில் முட்டைகள் வைக்கப்பட்டன. ஒரு மினி ஸ்பேட்டூலாவைப் பயன்படுத்தி வைக்கவும் (துணை படம் 1c,d). ஃபால்கன் தட்டுகள் அறை வெப்பநிலையில் (25°C) மற்றும் 70% ஈரப்பதத்தில் சேமிக்கப்பட்டன. சுத்தமான தண்ணீரில் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஒரே மாதிரியான மகரந்த உணவை உண்ணும் கட்டுப்பாட்டு லார்வாக்களுடன் அவற்றை ஒப்பிட்டோம். ஒரு பகுப்பாய்வு சமநிலையைப் பயன்படுத்தி லார்வாக்கள் முன்கூட்டிய வயதை அடையும் வரை ஒவ்வொரு நாளும் இறப்பைப் பதிவுசெய்து லார்வா எடையை அளந்தோம் (ஃபிஷர் சயின்டிஃபிக், துல்லியம் = 0.0001 கிராம்). இறுதியாக, 2.5 மாதங்களுக்குப் பிறகு கூட்டைத் திறப்பதன் மூலம் பாலின விகிதம் மதிப்பிடப்பட்டது.
முழு O. கார்னிஃப்ரான்ஸ் லார்வாக்களிலிருந்தும் DNA பிரித்தெடுக்கப்பட்டது (சிகிச்சை நிலைக்கு n = 3, மான்கோசெப்-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மற்றும் சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தம்) மற்றும் இந்த மாதிரிகளில் நுண்ணுயிர் பன்முகத்தன்மை பகுப்பாய்வுகளை நாங்கள் செய்தோம், குறிப்பாக மான்கோசெப்பில் லார்வாக்களில் அதிக இறப்பு காணப்பட்டதால். MnZn பெறுதல். DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA கிட் (Zymo Research, Irvine, CA) ஐப் பயன்படுத்தி DNA பெருக்கப்பட்டு, சுத்திகரிக்கப்பட்டது, மேலும் v3 கிட் ஐப் பயன்படுத்தி இல்லுமினா® MiSeq™ இல் வரிசைப்படுத்தப்பட்டது (600 சுழற்சிகள்). 16S rRNA மரபணுவின் V3-V4 பகுதியை இலக்காகக் கொண்ட ப்ரைமர்களைப் பயன்படுத்தி Quick-16S™ NGS Library Prep Kit (Zymo Research, Irvine, CA) ஐப் பயன்படுத்தி பாக்டீரியா 16S ரைபோசோமால் RNA மரபணுக்களின் இலக்கு வரிசைப்படுத்தல் செய்யப்பட்டது. கூடுதலாக, 10% PhiX சேர்க்கையைப் பயன்படுத்தி 18S வரிசைமுறை செய்யப்பட்டது, மேலும் ப்ரைமர் ஜோடி 18S001 மற்றும் NS4 ஐப் பயன்படுத்தி பெருக்கம் செய்யப்பட்டது.
QIIME2 பைப்லைனைப் பயன்படுத்தி இணைக்கப்பட்ட வாசிப்புகளை இறக்குமதி செய்து செயலாக்கவும் (v2022.11.1). இந்த வாசிப்புகள் டிரிம் செய்யப்பட்டு இணைக்கப்பட்டன, மேலும் QIIME2 இல் உள்ள DADA2 செருகுநிரலைப் பயன்படுத்தி சைமெரிக் வரிசைகள் அகற்றப்பட்டன (qiime dada2 சத்தம் இணைத்தல்)40. 16S மற்றும் 18S வகுப்பு பணிகள் பொருள் வகைப்படுத்தி செருகுநிரலைப் பயன்படுத்தி Classify-sklearn மற்றும் முன் பயிற்சி பெற்ற கலைப்பொருள் silva-138-99-nb-வகைப்படுத்தியைப் பயன்படுத்தி செய்யப்பட்டன.
அனைத்து சோதனை தரவுகளும் இயல்பான தன்மை (ஷாபிரோ-வில்க்ஸ்) மற்றும் மாறுபாடுகளின் ஒருமைப்பாடு (லெவனின் சோதனை) ஆகியவற்றிற்காக சரிபார்க்கப்பட்டன. தரவுத் தொகுப்பு அளவுரு பகுப்பாய்வின் அனுமானங்களை பூர்த்தி செய்யாததால், உருமாற்றம் எச்சங்களை தரப்படுத்தத் தவறியதால், லார்வா புதிய எடையில் சிகிச்சையின் விளைவை மதிப்பிடுவதற்கு இரண்டு காரணிகளுடன் [நேரம் (மூன்று-கட்டம் 2, 5, மற்றும் 8 நாள் நேர புள்ளிகள்) மற்றும் பூஞ்சைக் கொல்லி] ஒரு அளவுரு அல்லாத இரு-வழி ANOVA (க்ருஸ்கல்-வாலிஸ்) ஐச் செய்தோம், பின்னர் வில்காக்சன் சோதனையைப் பயன்படுத்தி பிந்தைய தற்காலிக அளவுரு அல்லாத ஜோடிவாரி ஒப்பீடுகள் செய்யப்பட்டன. மூன்று பூஞ்சைக் கொல்லி செறிவுகளில் உயிர்வாழ்வதில் பூஞ்சைக் கொல்லிகளின் விளைவுகளை ஒப்பிட்டுப் பார்க்க, பாய்சன் விநியோகத்துடன் கூடிய பொதுவான நேரியல் மாதிரியை (GLM) பயன்படுத்தினோம். வேறுபட்ட மிகுதி பகுப்பாய்விற்கு, ஆம்ப்ளிகான் வரிசை மாறுபாடுகளின் எண்ணிக்கை (ASVகள்) இன அளவில் சரிந்தது. 16S (மரபணு நிலை) மற்றும் 18S ஒப்பீட்டு மிகுதியைப் பயன்படுத்தும் குழுக்களுக்கு இடையேயான வேறுபட்ட மிகுதியின் ஒப்பீடுகள், பீட்டா பூஜ்ஜிய-உயர்த்தப்பட்ட (BEZI) குடும்ப விநியோகங்களுடன் நிலை, அளவு மற்றும் வடிவம் (GAMLSS) ஆகியவற்றிற்கான பொதுவான சேர்க்கை மாதிரியைப் பயன்படுத்தி நிகழ்த்தப்பட்டன, அவை ஒரு மேக்ரோவில் மாதிரியாக இருந்தன. மைக்ரோபயோம் R43 (v1.1) இல். 1). வேறுபட்ட பகுப்பாய்விற்கு முன் மைட்டோகாண்ட்ரியல் மற்றும் குளோரோபிளாஸ்ட் இனங்களை அகற்றவும். 18S இன் வெவ்வேறு வகைபிரித்தல் நிலைகள் காரணமாக, ஒவ்வொரு டாக்ஸனின் மிகக் குறைந்த நிலை மட்டுமே வேறுபட்ட பகுப்பாய்வுகளுக்குப் பயன்படுத்தப்பட்டது. அனைத்து புள்ளிவிவர பகுப்பாய்வுகளும் R (v. 3.4.3., CRAN திட்டம்) (குழு 2013) ஐப் பயன்படுத்தி செய்யப்பட்டன.
மான்கோசெப், பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் ட்ரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபின் ஆகியவற்றின் வெளிப்பாடு O. கார்னிஃப்ரான்களில் உடல் எடை அதிகரிப்பைக் கணிசமாகக் குறைத்தது (படம் 1). மதிப்பிடப்பட்ட மூன்று அளவுகளிலும் இந்த விளைவுகள் தொடர்ந்து காணப்பட்டன (படம் 1a–c). சைக்ளோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் மைக்ளோபியூட்டானில் லார்வாக்களின் எடையைக் கணிசமாகக் குறைக்கவில்லை.
நான்கு உணவு சிகிச்சைகளின் கீழ் மூன்று நேர புள்ளிகளில் அளவிடப்பட்ட தண்டு துளைப்பான் லார்வாக்களின் சராசரி புதிய எடை (ஒரே மாதிரியான மகரந்த தீவனம் + பூஞ்சைக் கொல்லி: கட்டுப்பாடு, 0.1X, 0.5X மற்றும் 1X அளவுகள்). (அ) குறைந்த அளவு (0.1X): முதல் முறை புள்ளி (நாள் 1): χ2: 30.99, DF = 6; P < 0.0001, இரண்டாவது முறை புள்ளி (நாள் 5): 22.83, DF = 0.0009; மூன்றாவது முறை; புள்ளி (நாள் 8): χ2: 28.39, DF = 6; (ஆ) அரை அளவு (0.5X): முதல் முறை புள்ளி (நாள் 1): χ2: 35.67, DF = 6; P < 0.0001, இரண்டாவது முறை புள்ளி (நாள் 1). ): χ2: 15.98, DF = 6; P = 0.0090; மூன்றாவது முறை புள்ளி (நாள் 8) χ2: 16.47, DF = 6; (c) தளம் அல்லது முழு அளவு (1X): முதல் முறை புள்ளி (நாள் 1) χ2: 20.64, P = 6; P = 0.0326, இரண்டாவது முறை புள்ளி (நாள் 5): χ2: 22.83, DF = 6; P = 0.0009; மூன்றாவது முறை புள்ளி (நாள் 8): χ2: 28.39, DF = 6; மாறுபாட்டின் அளவுரு அல்லாத பகுப்பாய்வு. பார்கள் ஜோடிவரிசை ஒப்பீடுகளின் சராசரி ± SE ஐக் குறிக்கின்றன (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05, **P ≤ 0.001, ***P ≤ 0.0001.
மிகக் குறைந்த அளவில் (0.1X), லார்வாக்களின் உடல் எடை ட்ரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபினுடன் 60%, மான்கோசெப்புடன் 49%, மைக்ளோபியூட்டானிலுடன் 48% மற்றும் பைரிதிஸ்ட்ரோபினுடன் 46% குறைக்கப்பட்டது (படம் 1a). பாதி கள அளவை (0.5X) வெளிப்படுத்தியபோது, ​​மான்கோசெப் லார்வாக்களின் உடல் எடை 86%, பைரிதியோஸ்ட்ரோபினுடன் 52% மற்றும் ட்ரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபினுடன் 50% குறைக்கப்பட்டது (படம் 1b). மான்கோசெப்பின் முழு கள அளவை (1X) எடுத்துக்கொண்டால் லார்வாக்களின் எடை 82%, பைரிதியோஸ்ட்ரோபினுடன் 70% மற்றும் ட்ரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபின், மைக்ளோபியூட்டானில் மற்றும் சாங்கார்டு தோராயமாக 30% (படம் 1c) குறைந்தது.
மான்கோசெப் சிகிச்சை அளிக்கப்பட்ட மகரந்தத்தை உண்ணும் லார்வாக்களில் இறப்பு அதிகமாக இருந்தது, அதைத் தொடர்ந்து பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் ட்ரைஃப்ளோசிஸ்ட்ரோபின் ஆகியவை இருந்தன. மான்கோசெப் மற்றும் பைரிடிசோலின் அளவுகள் அதிகரித்ததால் இறப்பு அதிகரித்தது (படம் 2; அட்டவணை 2). இருப்பினும், ட்ரைஃப்ளோசிஸ்ட்ரோபின் செறிவு அதிகரித்ததால் சோள துளைப்பான் இறப்பு சற்று அதிகரித்தது; கட்டுப்பாட்டு சிகிச்சைகளுடன் ஒப்பிடும்போது சைப்ரோடினில் மற்றும் கேப்டன் இறப்பை கணிசமாக அதிகரிக்கவில்லை.
ஆறு வெவ்வேறு பூஞ்சைக் கொல்லிகளுடன் தனித்தனியாக சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மகரந்தத்தை உட்கொண்ட பிறகு துளைப்பான் ஈ லார்வாக்களின் இறப்பு ஒப்பிடப்பட்டது. மான்கோசெப் மற்றும் பென்டோபிரமைடு ஆகியவை சோளப் புழுக்களுக்கு வாய்வழி வெளிப்பாட்டிற்கு அதிக உணர்திறன் கொண்டவை (GLM: χ = 29.45, DF = 20, P = 0.0059) (கோடு, சாய்வு = 0.29, P < 0.001; சாய்வு = 0.24, P <0.00)).
சராசரியாக, அனைத்து சிகிச்சைகளிலும், 39.05% நோயாளிகள் பெண்கள் மற்றும் 60.95% ஆண்கள். கட்டுப்பாட்டு சிகிச்சைகளில், குறைந்த அளவு (0.1X) மற்றும் அரை அளவு (0.5X) ஆய்வுகளில் பெண்களின் விகிதம் 40% ஆகவும், கள அளவு (1X) ஆய்வுகளில் 30% ஆகவும் இருந்தது. 0.1X டோஸில், மான்கோசெப் மற்றும் மைக்ளோபியூட்டானில் ஆகியவற்றால் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மகரந்தம் ஊட்டப்பட்ட லார்வாக்களில், பெரியவர்களில் 33.33% பெண்கள், பெரியவர்களில் 22% பெண்கள், வயது வந்த லார்வாக்களில் 44% பெண்கள், வயது வந்த லார்வாக்களில் 44% பெண்கள். பெண், வயது வந்த லார்வாக்களில் 41% பெண்கள், மற்றும் கட்டுப்பாடுகள் 31% (படம் 3a). 0.5 மடங்கு மருந்தளவைப் பயன்படுத்தும்போது, ​​மான்கோசெப் மற்றும் பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் குழுவில் 33% வயது வந்த புழுக்கள் பெண்களாகவும், ட்ரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபின் குழுவில் 36%, மைக்ளோபியூட்டானில் குழுவில் 41% மற்றும் சைப்ரோஸ்ட்ரோபின் குழுவில் 46% ஆகவும் இருந்தன. இந்த எண்ணிக்கை குழுவில் 53% ஆக இருந்தது. கேப்டன் குழுவில் மற்றும் கட்டுப்பாட்டு குழுவில் 38% (படம் 3b). 1X டோஸில், மான்கோசெப் குழுவில் 30% பெண்கள், பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் குழுவில் 36%, ட்ரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபின் குழுவில் 44%, மைக்ளோபியூட்டானில் குழுவில் 38%, கட்டுப்பாட்டு குழுவில் 50% பெண்கள் - 38.5% (படம் 3c).
லார்வா நிலை பூஞ்சைக் கொல்லி வெளிப்பாட்டிற்குப் பிறகு பெண் மற்றும் ஆண் துளைப்பான்களின் சதவீதம். (அ) குறைந்த அளவு (0.1X). ​​(ஆ) பாதி அளவு (0.5X). (இ) கள அளவு அல்லது முழு அளவு (1X).
16S வரிசை பகுப்பாய்வு, மான்கோசெப் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மகரந்தத்தை உண்ணும் லார்வாக்களுக்கும் சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தத்தை உண்ணும் லார்வாக்களுக்கும் இடையில் பாக்டீரியா குழு வேறுபடுவதைக் காட்டியது (படம் 4a). மகரந்தத்தை உண்ணும் சிகிச்சையளிக்கப்படாத லார்வாக்களின் நுண்ணுயிர் குறியீடு, மான்கோசெப் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மகரந்தத்தை உண்ணும் லார்வாக்களை விட அதிகமாக இருந்தது (படம் 4b). குழுக்களிடையே காணப்பட்ட செழுமையில் உள்ள வேறுபாடு புள்ளிவிவர ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்கதாக இல்லாவிட்டாலும், சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தத்தை உண்ணும் லார்வாக்களுக்குக் காணப்பட்டதை விட இது கணிசமாகக் குறைவாக இருந்தது (படம் 4c). கட்டுப்பாட்டு மகரந்தத்தை உண்ணும் லார்வாக்களின் நுண்ணுயிரிகள் மான்கோசெப் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட லார்வாக்களை உண்ணும் லார்வாக்களை விட மிகவும் வேறுபட்டவை என்பதை ஒப்பீட்டு மிகுதி காட்டுகிறது (படம் 5a). கட்டுப்பாட்டு மகரந்தத்தை உண்ணும் லார்வாக்களுக்கு 28 வகைகளின் இருப்பை விளக்க பகுப்பாய்வு வெளிப்படுத்தியது மற்றும் மான்கோசெப் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மாதிரிகள் (படம் 5b). c 18S வரிசைமுறையைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் எதையும் வெளிப்படுத்தவில்லை (துணை படம் 2).
16S வரிசைகளை அடிப்படையாகக் கொண்ட SAV சுயவிவரங்கள், ஃபைலம் மட்டத்தில் ஷானன் செழுமை மற்றும் கவனிக்கப்பட்ட செழுமையுடன் ஒப்பிடப்பட்டன. (அ) சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தத்தால் உண்ணப்பட்ட அல்லது கட்டுப்படுத்தப்பட்ட (நீலம்) மற்றும் மான்கோசெப்-உணவளிக்கப்பட்ட லார்வாக்களில் (ஆரஞ்சு) ஒட்டுமொத்த நுண்ணுயிர் சமூக அமைப்பை அடிப்படையாகக் கொண்ட முதன்மை ஒருங்கிணைப்பு பகுப்பாய்வு (PCoA). ஒவ்வொரு தரவு புள்ளியும் ஒரு தனி மாதிரியைக் குறிக்கிறது. PCoA பன்முகத்தன்மை கொண்ட t விநியோகத்தின் பிரே-கர்டிஸ் தூரத்தைப் பயன்படுத்தி கணக்கிடப்பட்டது. ஓவல்கள் 80% நம்பிக்கை அளவைக் குறிக்கின்றன. (ஆ) பாக்ஸ்பிளாட், மூல ஷானன் செல்வத் தரவு (புள்ளிகள்) மற்றும் இ. கவனிக்கத்தக்க செல்வம். பாக்ஸ்பிளாட்கள் சராசரி கோடு, இடைக்கால வரம்பு (IQR) மற்றும் 1.5 × IQR (n = 3) க்கான பெட்டிகளைக் காட்டுகின்றன.
மான்கோசெப் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மற்றும் சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தத்தை உண்ணும் லார்வாக்களின் நுண்ணுயிர் சமூகங்களின் கலவை. (அ) லார்வாக்களில் நுண்ணுயிர் வகைகளின் ஒப்பீட்டு மிகுதி. (ஆ) அடையாளம் காணப்பட்ட நுண்ணுயிர் சமூகங்களின் வெப்ப வரைபடம். டெல்ஃப்டியா (முரண்பாடுகள் விகிதம் (OR) = 0.67, P = 0.0030) மற்றும் சூடோமோனாஸ் (OR = 0.3, P = 0.0074), மைக்ரோபாக்டீரியம் (OR = 0.75, P = 0.0617) (OR = 1.5, P = 0.0060); வெப்ப வரைபட வரிசைகள் தொடர்பு தூரம் மற்றும் சராசரி இணைப்பைப் பயன்படுத்தி தொகுக்கப்பட்டுள்ளன.
எங்கள் முடிவுகள், பூக்கும் போது பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் தொடர்பு (மேன்கோசெப்) மற்றும் அமைப்பு ரீதியான (பைரோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் ட்ரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபின்) பூஞ்சைக் கொல்லிகளை வாய்வழியாக வெளிப்படுத்துவது, மக்காச்சோள லார்வாக்களின் எடை அதிகரிப்பையும் இறப்பையும் கணிசமாகக் குறைத்ததாகக் காட்டுகின்றன. கூடுதலாக, முன்கூட்டிய கட்டத்தில் மேன்கோசெப் நுண்ணுயிரிகளின் பன்முகத்தன்மை மற்றும் செழுமையைக் கணிசமாகக் குறைத்தது. மற்றொரு அமைப்பு ரீதியான பூஞ்சைக் கொல்லியான மைக்ளோபியூட்டானில், மூன்று அளவுகளிலும் லார்வா உடல் எடை அதிகரிப்பைக் கணிசமாகக் குறைத்தது. இந்த விளைவு இரண்டாவது (நாள் 5) மற்றும் மூன்றாவது (நாள் 8) நேரப் புள்ளிகளில் தெளிவாகத் தெரிந்தது. இதற்கு நேர்மாறாக, கட்டுப்பாட்டுக் குழுவோடு ஒப்பிடும்போது சைப்ரோடினில் மற்றும் கேப்டன் எடை அதிகரிப்பு அல்லது உயிர்வாழ்வைக் கணிசமாகக் குறைக்கவில்லை. எங்களுக்குத் தெரிந்தவரை, நேரடி மகரந்த வெளிப்பாடு மூலம் சோளப் பயிர்களைப் பாதுகாக்கப் பயன்படுத்தப்படும் பல்வேறு பூஞ்சைக் கொல்லிகளின் கள விகிதங்களின் விளைவுகளைத் தீர்மானிப்பதில் இந்த வேலை முதன்மையானது.
கட்டுப்பாட்டு சிகிச்சைகளுடன் ஒப்பிடும்போது அனைத்து பூஞ்சைக் கொல்லி சிகிச்சைகளும் உடல் எடை அதிகரிப்பைக் கணிசமாகக் குறைத்தன. மான்கோசெப் லார்வா உடல் எடை அதிகரிப்பில் சராசரியாக 51% குறைப்புடன் மிகப்பெரிய விளைவைக் கொண்டிருந்தது, அதைத் தொடர்ந்து பைரிதியோஸ்ட்ரோபின். இருப்பினும், மற்ற ஆய்வுகள் பூஞ்சைக் கொல்லிகளின் கள அளவுகள் லார்வா நிலைகளில் பாதகமான விளைவுகளைப் புகாரளிக்கவில்லை44. டைதியோகார்பமேட் பயோசைடுகள் குறைந்த கடுமையான நச்சுத்தன்மையைக் கொண்டிருப்பதாகக் காட்டப்பட்டாலும்45, மான்கோசெப் போன்ற எத்திலீன் பிஸ்டிதியோகார்பமேட்டுகள் (EBDCS) யூரியா எத்திலீன் சல்பைடாக சிதைக்கக்கூடும். மற்ற விலங்குகளில் அதன் பிறழ்வு விளைவுகளைக் கருத்தில் கொண்டு, இந்த சிதைவு தயாரிப்பு கவனிக்கப்பட்ட விளைவுகளுக்கு காரணமாக இருக்கலாம்46,47. முந்தைய ஆய்வுகள் எத்திலீன் தியோரியாவின் உருவாக்கம் உயர்ந்த வெப்பநிலை48, ஈரப்பதம் அளவுகள்49 மற்றும் தயாரிப்பு சேமிப்பின் நீளம்50 போன்ற காரணிகளால் பாதிக்கப்படுகிறது என்பதைக் காட்டுகின்றன. பயோசைடுகளுக்கான சரியான சேமிப்பு நிலைமைகள் இந்த பக்க விளைவுகளைத் தணிக்கும். கூடுதலாக, ஐரோப்பிய உணவு பாதுகாப்பு ஆணையம் பைரிதியோபைட்டின் நச்சுத்தன்மை குறித்து கவலை தெரிவித்துள்ளது, இது மற்ற விலங்குகளின் செரிமான அமைப்புகளுக்கு புற்றுநோயை உண்டாக்கும் என்று காட்டப்பட்டுள்ளது51.
மான்கோசெப், பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் ட்ரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபின் ஆகியவற்றை வாய்வழியாக எடுத்துக்கொள்வது சோள துளைப்பான் லார்வாக்களின் இறப்பை அதிகரிக்கிறது. இதற்கு நேர்மாறாக, மைக்ளோபியூட்டானில், சிப்ரோசைக்ளின் மற்றும் கேப்டன் ஆகியவை இறப்பில் எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தவில்லை. இந்த முடிவுகள் லாடர்னர் மற்றும் பலரிடமிருந்து வேறுபடுகின்றன.52, அவர்கள் கேப்டன் வயது வந்த O. லிக்னேரியா மற்றும் அபிஸ் மெல்லிஃபெரா L. (ஹைமனோப்டெரா, அபிசிடே) உயிர்வாழ்வைக் கணிசமாகக் குறைத்தது என்பதைக் காட்டியது. கூடுதலாக, கேப்டன் மற்றும் போஸ்கலிட் போன்ற பூஞ்சைக் கொல்லிகள் லார்வா இறப்பை ஏற்படுத்துவதாகக் கண்டறியப்பட்டுள்ளது52,53,54 அல்லது உணவளிக்கும் நடத்தையை மாற்றுவதாகக் கண்டறியப்பட்டுள்ளது55. இந்த மாற்றங்கள், மகரந்தத்தின் ஊட்டச்சத்து தரத்தையும் இறுதியில் லார்வா நிலையின் ஆற்றல் ஆதாயத்தையும் பாதிக்கலாம். கட்டுப்பாட்டுக் குழுவில் காணப்பட்ட இறப்பு மற்ற ஆய்வுகளுடன் ஒத்துப்போகிறது 56,57.
எங்கள் ஆய்வில் காணப்பட்ட ஆண்-சாதகமான பாலின விகிதம், போதுமான இனச்சேர்க்கையின்மை மற்றும் பூக்கும் போது மோசமான வானிலை போன்ற காரணிகளால் விளக்கப்படலாம், இது முன்னர் வைசென்ஸ் மற்றும் போஷ் ஆகியோரால் O. கார்னுட்டாவிற்கு பரிந்துரைக்கப்பட்டது. எங்கள் ஆய்வில் பெண் மற்றும் ஆண் இனச்சேர்க்கைக்கு நான்கு நாட்கள் இருந்தபோதிலும் (பொதுவாக வெற்றிகரமான இனச்சேர்க்கைக்கு போதுமான காலம் என்று கருதப்படுகிறது), மன அழுத்தத்தைக் குறைக்க நாங்கள் வேண்டுமென்றே ஒளியின் தீவிரத்தை குறைத்தோம். இருப்பினும், இந்த மாற்றம் தற்செயலாக இனச்சேர்க்கை செயல்பாட்டில் தலையிடக்கூடும்61. கூடுதலாக, தேனீக்கள் மழை மற்றும் குறைந்த வெப்பநிலை (<5°C) உட்பட பல நாட்கள் பாதகமான வானிலையை அனுபவிக்கின்றன, இது இனச்சேர்க்கை வெற்றியையும் எதிர்மறையாக பாதிக்கும்4,23.
எங்கள் ஆய்வு முழு லார்வா நுண்ணுயிரியிலும் கவனம் செலுத்தியிருந்தாலும், தேனீ ஊட்டச்சத்து மற்றும் பூஞ்சைக் கொல்லி வெளிப்பாட்டிற்கு முக்கியமானதாக இருக்கும் பாக்டீரியா சமூகங்களுக்கிடையேயான சாத்தியமான உறவுகள் பற்றிய நுண்ணறிவை எங்கள் முடிவுகள் வழங்குகின்றன. எடுத்துக்காட்டாக, சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தத்தை உட்கொள்ளும் லார்வாக்களில், புரோட்டியோபாக்டீரியா மற்றும் ஆக்டினோபாக்டீரியா ஆகிய பாக்டீரியா குழுக்கள் ஆதிக்கம் செலுத்தி, முக்கியமாக ஏரோபிக் அல்லது ஃபேக்கல்டிவ் ஏரோபிக் ஆகும். பொதுவாக தனித்த தேனீ இனங்களுடன் தொடர்புடைய டெல்ஃப்ட் பாக்டீரியாக்கள், ஆண்டிபயாடிக் செயல்பாட்டைக் கொண்டிருப்பதாக அறியப்படுகிறது, இது நோய்க்கிருமிகளுக்கு எதிராக ஒரு சாத்தியமான பாதுகாப்புப் பங்கைக் குறிக்கிறது. மற்றொரு பாக்டீரியா இனமான சூடோமோனாஸ், சிகிச்சையளிக்கப்படாத மகரந்தத்தை உண்ணும் லார்வாக்களில் ஏராளமாக இருந்தது, ஆனால் மேன்கோசெப்-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட லார்வாக்களில் கணிசமாகக் குறைக்கப்பட்டது. சூடோமோனாஸை O. bicornis35 மற்றும் பிற தனித்த குளவிகள்34 ஆகியவற்றில் மிகவும் மிகுதியான வகைகளில் ஒன்றாக அடையாளம் காணும் முந்தைய ஆய்வுகளை எங்கள் முடிவுகள் ஆதரிக்கின்றன. O. கார்னிஃப்ரான்களின் ஆரோக்கியத்தில் சூடோமோனாஸின் பங்கிற்கான சோதனை சான்றுகள் ஆய்வு செய்யப்படவில்லை என்றாலும், இந்த பாக்டீரியம், வண்டு பேடெரஸ் ஃபுசிப்ஸில் பாதுகாப்பு நச்சுகளின் தொகுப்பை ஊக்குவிப்பதாகவும், விட்ரோ 35, 65 இல் அர்ஜினைன் வளர்சிதை மாற்றத்தை ஊக்குவிப்பதாகவும் காட்டப்பட்டுள்ளது. இந்த அவதானிப்புகள் O. கார்னிஃப்ரானின் லார்வாக்களின் வளர்ச்சி நேரத்தில் வைரஸ் மற்றும் பாக்டீரியா பாதுகாப்பில் ஒரு சாத்தியமான பங்கைக் குறிக்கின்றன. மைக்ரோபாக்டீரியம் என்பது எங்கள் ஆய்வில் அடையாளம் காணப்பட்ட மற்றொரு இனமாகும், இது பட்டினி நிலைமைகளின் கீழ் கருப்பு சிப்பாய் ஈ லார்வாக்களில் அதிக எண்ணிக்கையில் இருப்பதாகக் கூறப்படுகிறது66. O. கார்னிஃப்ரானின் லார்வாக்களில், மன அழுத்த நிலைமைகளின் கீழ் குடல் நுண்ணுயிரியலின் சமநிலை மற்றும் மீள்தன்மைக்கு மைக்ரோபாக்டீரியா பங்களிக்கக்கூடும். கூடுதலாக, ரோடோகாக்கஸ் O. கார்னிஃப்ரானின் லார்வாக்களில் காணப்படுகிறது மற்றும் அதன் நச்சு நீக்கும் திறன்களுக்கு பெயர் பெற்றது67. இந்த இனம் A. ஃப்ளோரியாவின் குடலிலும் காணப்படுகிறது, ஆனால் மிகக் குறைந்த அளவில்68. லார்வாக்களில் வளர்சிதை மாற்ற செயல்முறைகளை மாற்றக்கூடிய ஏராளமான நுண்ணுயிர் டாக்ஸாக்களில் பல மரபணு மாறுபாடுகள் இருப்பதை எங்கள் முடிவுகள் நிரூபிக்கின்றன. இருப்பினும், O. கார்னிஃப்ரான்களின் செயல்பாட்டு பன்முகத்தன்மையைப் பற்றிய சிறந்த புரிதல் தேவை.
சுருக்கமாக, மான்கோசெப், பைரிதியோஸ்ட்ரோபின் மற்றும் ட்ரைஃப்ளோக்ஸிஸ்ட்ரோபின் ஆகியவை உடல் எடை அதிகரிப்பைக் குறைத்து சோள துளைப்பான் லார்வாக்களின் இறப்பை அதிகரித்ததாக முடிவுகள் குறிப்பிடுகின்றன. மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களில் பூஞ்சைக் கொல்லிகளின் விளைவுகள் குறித்து அதிகரித்து வரும் கவலை இருந்தபோதிலும், இந்த சேர்மங்களின் எஞ்சிய வளர்சிதை மாற்றங்களின் விளைவுகளை நன்கு புரிந்து கொள்ள வேண்டிய அவசியம் உள்ளது. பூஞ்சைக் கொல்லிகளைத் தேர்ந்தெடுத்து, பயன்பாட்டு நேரத்தை மாற்றுவதன் மூலம் அல்லது குறைவான தீங்கு விளைவிக்கும் மாற்றுகளைப் பயன்படுத்துவதை ஊக்குவிப்பதன் மூலம் விவசாயிகள் பழ மரம் பூப்பதற்கு முன்பும் பின்பும் சில பூஞ்சைக் கொல்லிகளைப் பயன்படுத்துவதைத் தவிர்க்க உதவும் ஒருங்கிணைந்த மகரந்தச் சேர்க்கை மேலாண்மை திட்டங்களுக்கான பரிந்துரைகளில் இந்த முடிவுகளை இணைக்கலாம். 36. பூச்சிக்கொல்லிகளைப் பயன்படுத்துவதில் பரிந்துரைகளை உருவாக்குவதற்கு இந்தத் தகவல் முக்கியமானது, அதாவது ஏற்கனவே உள்ள தெளிப்பு திட்டங்களை சரிசெய்தல் மற்றும் பூஞ்சைக் கொல்லிகளைத் தேர்ந்தெடுக்கும்போது தெளிப்பு நேரத்தை மாற்றுதல் அல்லது குறைவான ஆபத்தான மாற்றுகளைப் பயன்படுத்துவதை ஊக்குவித்தல். பாலின விகிதம், உணவளிக்கும் நடத்தை, குடல் நுண்ணுயிரி மற்றும் சோள துளைப்பான் எடை இழப்பு மற்றும் இறப்புக்கு அடிப்படையான மூலக்கூறு வழிமுறைகள் ஆகியவற்றில் பூஞ்சைக் கொல்லிகளின் பாதகமான விளைவுகள் குறித்து மேலும் ஆராய்ச்சி தேவை.
படங்கள் 1 மற்றும் 2 இல் உள்ள மூல தரவு 1, 2 மற்றும் 3 ஆகியவை figshare தரவு களஞ்சியமான DOI இல் டெபாசிட் செய்யப்பட்டுள்ளன: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 மற்றும் https://doi.org/10.6084/m9. figshare.24996233. தற்போதைய ஆய்வில் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட வரிசைகள் (படங்கள் 4, 5) NCBI SRA களஞ்சியத்தில் அணுகல் எண் PRJNA1023565 இன் கீழ் கிடைக்கின்றன.
போஷ், ஜே. மற்றும் கெம்ப், WP விவசாய பயிர்களின் மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களாக தேனீ இனங்களை உருவாக்குதல் மற்றும் நிறுவுதல்: ஒஸ்மியா இனத்தின் உதாரணம். (ஹைமனோப்டெரா: மெகாசிலிடே) மற்றும் பழ மரங்கள். காளை. ந்டோமோர். வளம். 92, 3–16 (2002).
பார்க்கர், எம்.ஜி. மற்றும் பலர். நியூயார்க் மற்றும் பென்சில்வேனியாவில் ஆப்பிள் விவசாயிகளிடையே மகரந்தச் சேர்க்கை நடைமுறைகள் மற்றும் மாற்று மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களின் கருத்துக்கள். புதுப்பிப்பு. விவசாயம். உணவு அமைப்புகள். 35, 1–14 (2020).
கோச் ஐ., லான்ஸ்டோர்ஃப் ஈ.டபிள்யூ, ஆர்ட்ஸ் டி.ஆர், பிட்ஸ்-சிங்கர் டி.எல் மற்றும் ரிக்கெட்ஸ் டி.எச். பூர்வீக தேனீக்களைப் பயன்படுத்தி பாதாம் மகரந்தச் சேர்க்கையின் சூழலியல் மற்றும் பொருளாதாரம். ஜே. பொருளாதாரம். என்டோமோர். 111, 16–25 (2018).
லீ, இ., ஹீ, ஒய்., மற்றும் பார்க், ஒய்.-எல். டிராகோபன் பினாலஜியில் காலநிலை மாற்றத்தின் விளைவுகள்: மக்கள்தொகை மேலாண்மைக்கான தாக்கங்கள். ஏறுதல். மாற்றம் 150, 305–317 (2018).
ஆர்ட்ஸ், டிஆர் மற்றும் பிட்ஸ்-சிங்கர், டிஎல். இரண்டு நிர்வகிக்கப்பட்ட தனித்த தேனீக்களின் (ஆஸ்மியா லிக்னேரியா மற்றும் மெகாசைல் ரோட்டுண்டாட்டா) கூடு கட்டும் நடத்தையில் பூஞ்சைக் கொல்லி மற்றும் துணை தெளிப்புகளின் விளைவு. PloS One 10, e0135688 (2015).
பியூவைஸ், எஸ். மற்றும் பலர். குறைந்த நச்சுத்தன்மை கொண்ட பயிர் பூஞ்சைக் கொல்லி (ஃபென்புகோனசோல்) ஆண் இனப்பெருக்க தர சமிக்ஞைகளில் தலையிடுகிறது, இதன் விளைவாக காட்டு தனித்த தேனீக்களில் இனச்சேர்க்கை வெற்றி குறைகிறது. ஜே. ஆப்ஸ். சூழலியல். 59, 1596–1607 (2022).
ஸ்கோலாஸ்ட்ரா எஃப். மற்றும் பலர். நியோனிகோட்டினாய்டு பூச்சிக்கொல்லிகள் மற்றும் எர்கோஸ்டெரால் உயிரியல் தொகுப்பு மூன்று தேனீ இனங்களில் ஒருங்கிணைந்த பூஞ்சைக் கொல்லி இறப்பை அடக்குகிறது. பூச்சி கட்டுப்பாடு. அறிவியல். 73, 1236–1243 (2017).
குஹ்னேமன் ஜேஜி, கில்லுங் ஜே, வான் டைக் எம்டி, ஃபோர்டைஸ் ஆர்எஃப். மற்றும் டான்ஃபோர்த் பிஎன் தனி குளவி லார்வாக்கள் தண்டு-கூடு கட்டும் தேனீக்களுக்கு மகரந்தத்தால் வழங்கப்படும் பாக்டீரியா பன்முகத்தன்மையை மாற்றுகின்றன. ஆஸ்மியா கார்னிஃப்ரான்கள் (மெகாசிலிடே). முன். நுண்ணுயிரி. 13, 1057626 (2023).
தரம்பால் பி.எஸ்., டான்ஃபோர்த் பி.என் மற்றும் ஸ்டெஃபன் எஸ்.ஏ. புளிக்கவைக்கப்பட்ட மகரந்தத்தில் உள்ள எக்டோசிம்பியோடிக் நுண்ணுயிரிகள் மகரந்தத்தைப் போலவே தனித்த தேனீக்களின் வளர்ச்சிக்கு முக்கியமானவை. சூழலியல். பரிணாமம். 12. e8788 (2022).
கெல்டெரர் எம், மனிசி எல்எம், கபுடோ எஃப் மற்றும் தல்ஹைமர் எம். மறு விதைப்பு நோய்களைக் கட்டுப்படுத்த ஆப்பிள் பழத்தோட்டங்களில் வரிசைகளுக்கு இடையே நடவு: நுண்ணுயிர் குறிகாட்டிகளை அடிப்படையாகக் கொண்ட ஒரு நடைமுறை செயல்திறன் ஆய்வு. தாவர மண் 357, 381–393 (2012).
மார்ட்டின் பி.எல்., கிராவ்சிக் டி., கோடடாடி எஃப்., அச்சிமோவிச் எஸ்.ஜி. மற்றும் பீட்டர் கே.ஏ. மத்திய அட்லாண்டிக் அமெரிக்காவில் ஆப்பிள்களின் கசப்பான அழுகல்: காரணமான இனங்களின் மதிப்பீடு மற்றும் பிராந்திய வானிலை நிலைமைகள் மற்றும் சாகுபடி உணர்திறன் ஆகியவற்றின் தாக்கம். பைட்டோபாதாலஜி 111, 966–981 (2021).
கல்லன் எம்ஜி, தாம்சன் எல்ஜே, கரோலன் ஜேகே, ஸ்டவுட் ஜேகே. மற்றும் ஸ்டான்லி டிஏ பூஞ்சைக் கொல்லிகள், களைக்கொல்லிகள் மற்றும் தேனீக்கள்: தற்போதுள்ள ஆராய்ச்சி மற்றும் முறைகள் பற்றிய முறையான மதிப்பாய்வு. PLoS One 14, e0225743 (2019).
பில்லிங், ED மற்றும் ஜெப்சன், PC தேனீக்கள் (Apis mellifera) மீது EBI பூஞ்சைக் கொல்லிகள் மற்றும் பைரித்ராய்டு பூச்சிக்கொல்லிகளின் ஒருங்கிணைந்த விளைவுகள். அறிவியலைத் தாக்கும். 39, 293–297 (1993).
முசென், ஈசி, லோபஸ், ஜேஇ மற்றும் பெங், சிஒய் தேனீ லார்வாக்களின் வளர்ச்சி மற்றும் வளர்ச்சியில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பூஞ்சைக் கொல்லிகளின் விளைவு அபிஸ் மெல்லிஃபெரா எல். (ஹைமனோப்டெரா: அபிடே). புதன்கிழமை. என்டோமோர். 33, 1151-1154 (2004).
வான் டைக், எம்., முல்லன், இ., விக்ஸ்டெட், டி., மற்றும் மெக்ஆர்ட், எஸ். மரத்தோட்டங்களில் மகரந்தச் சேர்க்கையாளர்களைப் பாதுகாக்க பூச்சிக்கொல்லி பயன்பாட்டிற்கான முடிவு வழிகாட்டி (கார்னெல் பல்கலைக்கழகம், 2018).
இவாசகி, ஜே.எம் மற்றும் ஹோகெண்டூர்ன், கே. பூச்சிக்கொல்லிகள் அல்லாதவற்றுக்கு தேனீக்களின் வெளிப்பாடு: முறைகள் மற்றும் அறிக்கையிடப்பட்ட முடிவுகளின் மதிப்பாய்வு. விவசாயம். சுற்றுச்சூழல் அமைப்பு. புதன்கிழமை. 314, 107423 (2021).
கோபிட் ஏஎம், கிளிங்கர் இ, காக்ஸ்-ஃபாஸ்டர் டிஎல், ராமிரெஸ் ஆர்ஏ. மற்றும் பிட்ஸ்-சிங்கர் டிஎல். ஆஸ்மியா லிக்னேரியாவின் (ஹைமனோப்டெரா: மெகாசிலிடே) லார்வா வளர்ச்சியில் விநியோக வகை மற்றும் பூச்சிக்கொல்லி வெளிப்பாட்டின் விளைவு. புதன்கிழமை. நெட்டோமோர். 51, 240–251 (2022).
கோபிட் ஏஎம் மற்றும் பிட்ஸ்-சிங்கர் டிஎல் தனிமையான வெற்று-கூடு தேனீக்களுக்கு பூச்சிக்கொல்லி வெளிப்பாட்டின் பாதைகள். புதன்கிழமை. நெட்டோமோர். 47, 499–510 (2018).
பான், என்.டி மற்றும் பலர். வயது வந்த ஜப்பானிய தோட்டத் தேனீக்களில் (ஓஸ்மியா கார்னிஃப்ரான்ஸ்) பூச்சிக்கொல்லி நச்சுத்தன்மையை மதிப்பிடுவதற்கான ஒரு புதிய உட்கொள்ளல் உயிரியல் பகுப்பாய்வு நெறிமுறை. அறிவியல். அறிக்கைகள் 10, 9517 (2020).