தாவர அத்தியாவசிய எண்ணெய்களை அடிப்படையாகக் கொண்ட டெர்பீன் சேர்மங்களை ஒரு லார்விசைடல் மற்றும் ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு (டிப்டெரா: குலிசிடே) எதிரான முதிர்ந்த மருந்தாக இணைத்தல்.

Nature.com ஐப் பார்வையிட்டதற்கு நன்றி. நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவியின் பதிப்பில் CSS ஆதரவு குறைவாகவே உள்ளது. சிறந்த முடிவுகளுக்கு, உங்கள் உலாவியின் புதிய பதிப்பைப் பயன்படுத்துமாறு பரிந்துரைக்கிறோம் (அல்லது Internet Explorer இல் இணக்கத்தன்மை பயன்முறையை முடக்கவும்). இதற்கிடையில், தொடர்ச்சியான ஆதரவை உறுதிசெய்ய, ஸ்டைலிங் அல்லது ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் தளத்தைக் காட்டுகிறோம்.
தாவரங்களிலிருந்து பெறப்பட்ட பூச்சிக்கொல்லி சேர்மங்களின் சேர்க்கைகள் பூச்சிகளுக்கு எதிராக ஒருங்கிணைந்த அல்லது விரோதமான தொடர்புகளை வெளிப்படுத்தக்கூடும். ஏடிஸ் கொசுக்களால் பரவும் நோய்கள் விரைவாகப் பரவுவதாலும், பாரம்பரிய பூச்சிக்கொல்லிகளுக்கு ஏடிஸ் கொசுக்களின் அதிகரித்து வரும் எதிர்ப்புத் திறனாலும், ஏடிஸ் எஜிப்டியின் லார்வா மற்றும் வயதுவந்த நிலைகளுக்கு எதிராக தாவர அத்தியாவசிய எண்ணெய்களை அடிப்படையாகக் கொண்ட டெர்பீன் சேர்மங்களின் இருபத்தெட்டு சேர்க்கைகள் உருவாக்கப்பட்டு சோதிக்கப்பட்டன. ஐந்து தாவர அத்தியாவசிய எண்ணெய்கள் (EOs) ஆரம்பத்தில் அவற்றின் லார்விசைடல் மற்றும் வயதுவந்தோர் பயன்பாட்டு செயல்திறனுக்காக மதிப்பீடு செய்யப்பட்டன, மேலும் GC-MS முடிவுகளின் அடிப்படையில் ஒவ்வொரு EOவிலும் இரண்டு முக்கிய சேர்மங்கள் அடையாளம் காணப்பட்டன. முக்கியமாக அடையாளம் காணப்பட்ட சேர்மங்கள் வாங்கப்பட்டன, அதாவது டயல்லைல் டைசல்பைடு, டயல்லைல் ட்ரைசல்பைடு, கார்வோன், லிமோனீன், யூஜெனால், மெத்தில் யூஜெனால், யூகலிப்டால், யூடெஸ்மால் மற்றும் கொசு ஆல்பா-பினீன். இந்த சேர்மங்களின் பைனரி சேர்க்கைகள் பின்னர் சப்லெதல் அளவுகளைப் பயன்படுத்தி தயாரிக்கப்பட்டன, மேலும் அவற்றின் ஒருங்கிணைந்த மற்றும் விரோத விளைவுகள் சோதிக்கப்பட்டு தீர்மானிக்கப்பட்டன. சிறந்த லார்விசைடல் கலவைகள் லிமோனீனை டயாலில் டைசல்பைடுடன் கலப்பதன் மூலம் பெறப்படுகின்றன, மேலும் சிறந்த வயதுவந்தோரைக் கொல்லும் கலவைகள் கார்வோனை லிமோனீனுடன் கலப்பதன் மூலம் பெறப்படுகின்றன. வணிக ரீதியாகப் பயன்படுத்தப்படும் செயற்கை லார்விசைடல் டெம்போஸ் மற்றும் வயதுவந்தோருக்கான மருந்து மாலதியோன் ஆகியவை தனித்தனியாகவும் டெர்பெனாய்டுகளுடன் பைனரி சேர்க்கைகளிலும் சோதிக்கப்பட்டன. டெமெபோஸ் மற்றும் டயாலில் டைசல்பைடு மற்றும் மாலதியோன் மற்றும் யூடெஸ்மால் ஆகியவற்றின் கலவை மிகவும் பயனுள்ள கலவையாக இருந்தது என்பதை முடிவுகள் காட்டுகின்றன. இந்த சக்திவாய்ந்த சேர்க்கைகள் ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிராகப் பயன்படுத்துவதற்கான திறனைக் கொண்டுள்ளன.
தாவர அத்தியாவசிய எண்ணெய்கள் (EOs) பல்வேறு உயிரியல் ரீதியாகச் செயல்படும் சேர்மங்களைக் கொண்ட இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்றப் பொருட்கள் மற்றும் செயற்கை பூச்சிக்கொல்லிகளுக்கு மாற்றாக பெருகிய முறையில் முக்கியத்துவம் பெறுகின்றன. அவை சுற்றுச்சூழலுக்கு உகந்தவை மற்றும் பயனர் நட்பு மட்டுமல்ல, அவை பல்வேறு உயிரியல் ரீதியாகச் செயல்படும் சேர்மங்களின் கலவையாகும், இது மருந்து எதிர்ப்பை உருவாக்கும் வாய்ப்பையும் குறைக்கிறது1. GC-MS தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தி, ஆராய்ச்சியாளர்கள் பல்வேறு தாவர அத்தியாவசிய எண்ணெய்களின் கூறுகளை ஆய்வு செய்து 17,500 நறுமணத் தாவரங்களிலிருந்து 3,000 க்கும் மேற்பட்ட சேர்மங்களை அடையாளம் கண்டுள்ளனர்2, அவற்றில் பெரும்பாலானவை பூச்சிக்கொல்லி பண்புகளுக்காக சோதிக்கப்பட்டன மற்றும் பூச்சிக்கொல்லி விளைவுகளைக் கொண்டிருப்பதாக அறிவிக்கப்பட்டுள்ளது3,4. சில ஆய்வுகள், சேர்மத்தின் முக்கிய கூறுகளின் நச்சுத்தன்மை அதன் கச்சா எத்திலீன் ஆக்சைடைப் போலவே அல்லது அதை விட அதிகமாகவோ இருப்பதை எடுத்துக்காட்டுகின்றன. ஆனால் தனிப்பட்ட சேர்மங்களின் பயன்பாடு மீண்டும் எதிர்ப்பை வளர்ப்பதற்கு இடமளிக்கக்கூடும், இது வேதியியல் பூச்சிக்கொல்லிகளைப் போலவே5,6. எனவே, பூச்சிக்கொல்லி செயல்திறனை மேம்படுத்தவும், இலக்கு பூச்சி எண்ணிக்கையில் எதிர்ப்பின் சாத்தியக்கூறுகளைக் குறைக்கவும் எத்திலீன் ஆக்சைடு அடிப்படையிலான சேர்மங்களின் கலவைகளைத் தயாரிப்பதில் தற்போதைய கவனம் உள்ளது. EO-களில் உள்ள தனிப்பட்ட செயலில் உள்ள சேர்மங்கள், EO-வின் ஒட்டுமொத்த செயல்பாட்டை பிரதிபலிக்கும் சேர்க்கைகளில் சினெர்ஜிஸ்டிக் அல்லது விரோத விளைவுகளை வெளிப்படுத்தக்கூடும், இது முந்தைய ஆராய்ச்சியாளர்களால் நடத்தப்பட்ட ஆய்வுகளில் நன்கு வலியுறுத்தப்பட்டுள்ளது7,8. திசையன் கட்டுப்பாட்டுத் திட்டத்தில் EO மற்றும் அதன் கூறுகளும் அடங்கும். அத்தியாவசிய எண்ணெய்களின் கொசுக்கொல்லி செயல்பாடு குலெக்ஸ் மற்றும் அனோபிலிஸ் கொசுக்களில் விரிவாக ஆய்வு செய்யப்பட்டுள்ளது. ஒட்டுமொத்த நச்சுத்தன்மையை அதிகரிக்கவும் பக்க விளைவுகளைக் குறைக்கவும் வணிக ரீதியாகப் பயன்படுத்தப்படும் செயற்கை பூச்சிக்கொல்லிகளுடன் பல்வேறு தாவரங்களை இணைப்பதன் மூலம் பயனுள்ள பூச்சிக்கொல்லிகளை உருவாக்க பல ஆய்வுகள் முயற்சித்துள்ளன9. ஆனால் ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிரான இத்தகைய சேர்மங்களின் ஆய்வுகள் அரிதாகவே உள்ளன. மருத்துவ அறிவியலில் முன்னேற்றங்கள் மற்றும் மருந்துகள் மற்றும் தடுப்பூசிகளின் வளர்ச்சி சில திசையன் மூலம் பரவும் நோய்களை எதிர்த்துப் போராட உதவியுள்ளன. ஆனால் ஏடிஸ் எஜிப்டி கொசுவால் பரவும் வைரஸின் வெவ்வேறு செரோடைப்கள் இருப்பது தடுப்பூசி திட்டங்களின் தோல்விக்கு வழிவகுத்தது. எனவே, இதுபோன்ற நோய்கள் ஏற்படும்போது, ​​நோய் பரவுவதைத் தடுப்பதற்கான ஒரே வழி நோய்க்கிருமி கட்டுப்பாட்டுத் திட்டங்களே. தற்போதைய சூழ்நிலையில், ஏடிஸ் எஜிப்டியைக் கட்டுப்படுத்துவது மிகவும் முக்கியமானது, ஏனெனில் இது பல்வேறு வைரஸ்கள் மற்றும் டெங்கு காய்ச்சல், ஜிகா, டெங்கு ரத்தக்கசிவு காய்ச்சல், மஞ்சள் காய்ச்சல் போன்றவற்றை ஏற்படுத்தும் அவற்றின் செரோடைப்களின் முக்கிய திசையன் ஆகும். மிகவும் குறிப்பிடத்தக்க விஷயம் என்னவென்றால், கிட்டத்தட்ட அனைத்து நோய்க்கிருமிகளால் பரவும் ஏடிஸ் மூலம் பரவும் நோய்களின் எண்ணிக்கையும் எகிப்தில் ஒவ்வொரு ஆண்டும் அதிகரித்து வருகிறது மற்றும் உலகளவில் அதிகரித்து வருகிறது. எனவே, இந்த சூழலில், ஏடிஸ் எஜிப்டி மக்களுக்கு சுற்றுச்சூழல் நட்பு மற்றும் பயனுள்ள கட்டுப்பாட்டு நடவடிக்கைகளை உருவாக்க வேண்டிய அவசியம் உள்ளது. இது சம்பந்தமாக சாத்தியமான வேட்பாளர்கள் EOக்கள், அவற்றின் கூறு சேர்மங்கள் மற்றும் அவற்றின் சேர்க்கைகள் ஆகும். எனவே, இந்த ஆய்வு ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிராக பூச்சிக்கொல்லி பண்புகள் (அதாவது, புதினா, புனித துளசி, யூகலிப்டஸ் புள்ளியிடப்பட்ட, அல்லியம் சல்பர் மற்றும் மெலலூகா) கொண்ட ஐந்து தாவரங்களிலிருந்து முக்கிய தாவர EO சேர்மங்களின் பயனுள்ள ஒருங்கிணைந்த சேர்க்கைகளை அடையாளம் காண முயற்சித்தது.
தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட அனைத்து EO-களும் 0.42 முதல் 163.65 ppm வரையிலான 24-h LC50 உடன் Aedes aegypti-க்கு எதிரான சாத்தியமான லார்விசைடல் செயல்பாட்டைக் காட்டின. 24 மணிநேரத்தில் 0.42 ppm என்ற LC50 மதிப்புடன் மிளகுக்கீரை (Mp) EO-க்கு அதிகபட்ச லார்விசைடல் செயல்பாடு பதிவு செய்யப்பட்டது, அதைத் தொடர்ந்து 24 மணிநேரத்தில் 16.19 ppm என்ற LC50 மதிப்புடன் பூண்டு (As) பதிவு செய்யப்பட்டது (அட்டவணை 1).
Ocimum Saintum, Os EO தவிர, மற்ற நான்கு திரையிடப்பட்ட EO-களும் வெளிப்படையான ஒவ்வாமை விளைவுகளைக் காட்டின, LC50 மதிப்புகள் 24 மணி நேர வெளிப்பாடு காலத்தில் 23.37 முதல் 120.16 ppm வரை இருந்தன. தைமோபிலஸ் ஸ்ட்ரைட்டா (Cl) EO, 23.37 ppm என்ற LC50 மதிப்புள்ள பெரியவர்களை வெளிப்படுத்திய 24 மணி நேரத்திற்குள் கொல்வதில் மிகவும் பயனுள்ளதாக இருந்தது, அதைத் தொடர்ந்து 101.91 ppm என்ற LC50 மதிப்பைக் கொண்ட யூகலிப்டஸ் மாகுலாட்டா (Em) (அட்டவணை 1). மறுபுறம், Os-க்கான LC50 மதிப்பு இன்னும் தீர்மானிக்கப்படவில்லை, ஏனெனில் அதிக அளவு 53% என்ற மிக உயர்ந்த இறப்பு விகிதம் பதிவு செய்யப்பட்டது (துணை படம் 3).
ஒவ்வொரு EO-விலும் உள்ள இரண்டு முக்கிய கூறு சேர்மங்கள் அடையாளம் காணப்பட்டு NIST நூலக தரவுத்தள முடிவுகள், GC குரோமடோகிராம் பரப்பளவு சதவீதம் மற்றும் MS நிறமாலை முடிவுகள் (அட்டவணை 2) ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன. EO A-க்கு, அடையாளம் காணப்பட்ட முக்கிய சேர்மங்கள் டயாலில் டைசல்பைடு மற்றும் டயாலில் ட்ரைசல்பைடு; EO Mp-க்கு அடையாளம் காணப்பட்ட முக்கிய சேர்மங்கள் கார்வோன் மற்றும் லிமோனீன், EO Em-க்கு அடையாளம் காணப்பட்ட முக்கிய சேர்மங்கள் யூடெஸ்மால் மற்றும் யூகலிப்டால்; EO Os-க்கு, அடையாளம் காணப்பட்ட முக்கிய சேர்மங்கள் யூஜெனால் மற்றும் மெத்தில் யூஜெனால், மற்றும் EO Cl-க்கு, அடையாளம் காணப்பட்ட முக்கிய சேர்மங்கள் யூஜெனால் மற்றும் α-பினீன் (படம் 1, துணை புள்ளிவிவரங்கள் 5–8, துணை அட்டவணை 1–5).
தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட அத்தியாவசிய எண்ணெய்களின் முக்கிய டெர்பெனாய்டுகளின் நிறை நிறமாலை அளவீட்டின் முடிவுகள் (A-diallyl disulfide; B-diallyl trisulfide; C-eugenol; D-methyl eugenol; E-limonene; F-நறுமண செபரோன்; G-α-pinene; H-cineole; R-eudamol).
மொத்தம் ஒன்பது சேர்மங்கள் (டயாலில் டைசல்பைடு, டயாலில் ட்ரைசல்பைடு, யூஜெனால், மெத்தில் யூஜெனால், கார்வோன், லிமோனீன், யூகலிப்டால், யூடெஸ்மால், α-பினீன்) EO இன் முக்கிய கூறுகளாக இருக்கும் பயனுள்ள சேர்மங்களாக அடையாளம் காணப்பட்டன, மேலும் அவை லார்வா நிலைகளில் ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிராக தனித்தனியாக உயிரியல் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. 24 மணிநேர வெளிப்பாட்டிற்குப் பிறகு 2.25 பிபிஎம் என்ற எல்சி50 மதிப்புடன் யூடெஸ்மால் என்ற சேர்மம் மிக உயர்ந்த லார்விசைடல் செயல்பாட்டைக் கொண்டிருந்தது. டயாலில் டைசல்பைடு மற்றும் டயாலில் ட்ரைசல்பைடு ஆகிய சேர்மங்களும் சாத்தியமான லார்விசைடல் விளைவுகளைக் கொண்டிருப்பதாகக் கண்டறியப்பட்டுள்ளது, சராசரி சப்லெத்தல் டோஸ்கள் 10-20 பிபிஎம் வரம்பில் உள்ளன. 63.35 பிபிஎம், 139.29 பிபிஎம் என்ற எல்சி50 மதிப்புகளுடன் யூஜெனால், லிமோனீன் மற்றும் யூகலிப்டால் சேர்மங்களுக்கு மிதமான லார்விசைடல் செயல்பாடு மீண்டும் காணப்பட்டது. மற்றும் 24 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு முறையே 181.33 பிபிஎம் (அட்டவணை 3). இருப்பினும், அதிக அளவுகளில் கூட மெத்தில் யூஜெனால் மற்றும் கார்வோனின் குறிப்பிடத்தக்க லார்விசைடல் திறன் எதுவும் கண்டறியப்படவில்லை, எனவே LC50 மதிப்புகள் கணக்கிடப்படவில்லை (அட்டவணை 3). செயற்கை லார்விசைடான டெமெபோஸ், 24 மணிநேர வெளிப்பாட்டில் ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிராக சராசரியாக 0.43 பிபிஎம் செறிவைக் கொண்டிருந்தது (அட்டவணை 3, துணை அட்டவணை 6).
ஏழு சேர்மங்கள் (டயாலில் டைசல்பைடு, டயாலில் ட்ரைசல்பைடு, யூகலிப்டால், α-பினீன், யூடெஸ்மால், லிமோனீன் மற்றும் கார்வோன்) பயனுள்ள EO இன் முக்கிய சேர்மங்களாக அடையாளம் காணப்பட்டன, மேலும் அவை வயது வந்த எகிப்திய ஏடிஸ் கொசுக்களுக்கு எதிராக தனித்தனியாக சோதிக்கப்பட்டன. ப்ரோபிட் பின்னடைவு பகுப்பாய்வின்படி, யூடெஸ்மால் 1.82 பிபிஎம் எல்சி50 மதிப்புடன் அதிக ஆற்றலைக் கொண்டிருப்பதாகக் கண்டறியப்பட்டது, அதைத் தொடர்ந்து யூகலிப்டால் 24 மணி நேர வெளிப்பாடு நேரத்தில் 17.60 பிபிஎம் எல்சி50 மதிப்புடன் உள்ளது. சோதிக்கப்பட்ட மீதமுள்ள ஐந்து சேர்மங்கள் 140.79 முதல் 737.01 பிபிஎம் வரையிலான எல்சி50களைக் கொண்ட பெரியவர்களுக்கு மிதமான தீங்கு விளைவித்தன (அட்டவணை 3). செயற்கை ஆர்கனோபாஸ்பரஸ் மாலத்தியான் யூடெஸ்மாலை விட குறைவான சக்தி வாய்ந்தது மற்றும் மற்ற ஆறு சேர்மங்களை விட அதிகமாக இருந்தது, 24 மணி நேர வெளிப்பாடு காலத்தில் எல்சி50 மதிப்பு 5.44 பிபிஎம் (அட்டவணை 3, துணை அட்டவணை 6).
1:1 விகிதத்தில் அவற்றின் LC50 அளவுகளின் பைனரி சேர்க்கைகளை உருவாக்க ஏழு சக்திவாய்ந்த ஈய சேர்மங்கள் மற்றும் ஆர்கனோபாஸ்பரஸ் டேம்போசேட் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன. மொத்தம் 28 பைனரி சேர்க்கைகள் தயாரிக்கப்பட்டு ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிரான அவற்றின் லார்விசைடல் செயல்திறனுக்காக சோதிக்கப்பட்டன. ஒன்பது சேர்க்கைகள் சினெர்ஜிஸ்டிக் என்று கண்டறியப்பட்டது, 14 சேர்க்கைகள் எதிரெதிர், மற்றும் ஐந்து சேர்க்கைகள் லார்விசைடல் அல்ல. சினெர்ஜிஸ்டிக் சேர்க்கைகளில், டயல்லைல் டைசல்பைடு மற்றும் டெமோஃபோல் ஆகியவற்றின் கலவை மிகவும் பயனுள்ளதாக இருந்தது, 24 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு 100% இறப்பு காணப்பட்டது (அட்டவணை 4). இதேபோல், டயல்லைல் டைசல்பைடு மற்றும் யூஜெனோல் தைமெட்பாஸுடன் லிமோனீனின் கலவைகள் 98.3% லார்வா இறப்புடன் நல்ல திறனைக் காட்டின (அட்டவணை 5). மீதமுள்ள 4 சேர்க்கைகள், அதாவது யூடெஸ்மால் பிளஸ் யூகலிப்டால், யூடெஸ்மால் பிளஸ் லிமோனீன், யூகலிப்டால் பிளஸ் ஆல்பா-பினீன், ஆல்பா-பினீன் பிளஸ் டெமெபோஸ், குறிப்பிடத்தக்க லார்விசைடல் செயல்திறனைக் காட்டின, காணப்பட்ட இறப்பு விகிதங்கள் 90% ஐ விட அதிகமாக இருந்தன. எதிர்பார்க்கப்படும் இறப்பு விகிதம் 60-75% க்கு அருகில் உள்ளது. (அட்டவணை 4). இருப்பினும், α-பினீன் அல்லது யூகலிப்டஸுடன் லிமோனீனின் கலவையானது விரோதமான எதிர்வினைகளைக் காட்டியது. அதேபோல், யூஜெனால் அல்லது யூகலிப்டஸ் அல்லது யூடெஸ்மால் அல்லது டயல் ட்ரைசல்பைடுடன் டெமெஃபோஸின் கலவைகள் விரோதமான விளைவுகளைக் கொண்டிருப்பதாகக் கண்டறியப்பட்டுள்ளது. அதேபோல், டயல் டைசல்பைடு மற்றும் டயல் ட்ரைசல்பைடு மற்றும் இந்த சேர்மங்களில் ஏதேனும் ஒன்றை யூடெஸ்மால் அல்லது யூஜெனோலுடன் இணைப்பது அவற்றின் லார்விசைடல் செயல்பாட்டில் விரோதமானது. யூடெஸ்மாலை யூஜெனால் அல்லது α-பினீனுடன் இணைப்பதன் மூலமும் விரோதம் பதிவாகியுள்ளது.
வயதுவந்தோரின் அமில செயல்பாட்டிற்காக சோதிக்கப்பட்ட 28 பைனரி கலவைகளில், 7 சேர்க்கைகள் ஒருங்கிணைந்தவை, 6 எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தவில்லை, 15 சேர்க்கைகள் விரோதமானவை. யூகலிப்டஸுடன் யூடெஸ்மால் மற்றும் கார்வோனுடன் லிமோனீன் ஆகியவற்றின் கலவைகள் மற்ற ஒருங்கிணைந்த சேர்க்கைகளை விட மிகவும் பயனுள்ளதாக இருப்பது கண்டறியப்பட்டது, இறப்பு விகிதம் 24 மணி நேரத்தில் முறையே 76% மற்றும் 100% ஆகும் (அட்டவணை 5). லிமோனீன் மற்றும் டயல் ட்ரைசல்பைடு தவிர அனைத்து சேர்மங்களின் சேர்க்கைகளுடனும் மாலதியோன் ஒரு ஒருங்கிணைந்த விளைவை வெளிப்படுத்துவதாகக் கண்டறியப்பட்டுள்ளது. மறுபுறம், டயல் டைசல்பைடு மற்றும் டயல் ட்ரைசல்பைடு மற்றும் யூகலிப்டஸ், அல்லது யூகலிப்டால், அல்லது கார்வோன் அல்லது லிமோனீனுடன் அவற்றில் ஏதேனும் ஒன்றின் கலவைக்கும் இடையே விரோதம் கண்டறியப்பட்டுள்ளது. இதேபோல், யூடெஸ்மால் அல்லது லிமோனீனுடன் α-பினீன், கார்வோன் அல்லது லிமோனீனுடன் யூகலிப்டால், மற்றும் யூடெஸ்மால் அல்லது மாலத்தியானுடன் லிமோனீன் ஆகியவற்றின் சேர்க்கைகள் விரோதமான லார்விசைடல் விளைவுகளைக் காட்டின. மீதமுள்ள ஆறு சேர்க்கைகளுக்கு, எதிர்பார்க்கப்பட்ட மற்றும் கவனிக்கப்பட்ட இறப்புக்கு இடையே குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடு இல்லை (அட்டவணை 5).
ஒருங்கிணைந்த விளைவுகள் மற்றும் சப்லெத்தல் அளவுகளின் அடிப்படையில், அதிக எண்ணிக்கையிலான ஏடிஸ் எஜிப்டி கொசுக்களுக்கு எதிரான அவற்றின் லார்விசைடல் நச்சுத்தன்மை இறுதியில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டு மேலும் சோதிக்கப்பட்டது. யூஜெனால்-லிமோனீன், டயல் டைசல்பைட்-லிமோனீன் மற்றும் டயல் டைசல்பைட்-டைம்போஸ் ஆகிய பைனரி சேர்க்கைகளைப் பயன்படுத்தி காணப்பட்ட லார்வா இறப்பு 100% என்றும், எதிர்பார்க்கப்படும் லார்வா இறப்பு முறையே 76.48%, 72.16% மற்றும் 63.4% என்றும் முடிவுகள் காட்டுகின்றன (அட்டவணை 6). . லிமோனீன் மற்றும் யூட்ஸ்மால் ஆகியவற்றின் கலவை ஒப்பீட்டளவில் குறைவான செயல்திறன் கொண்டது, 24 மணி நேர வெளிப்பாடு காலத்தில் 88% லார்வா இறப்பு காணப்பட்டது (அட்டவணை 6). சுருக்கமாக, தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட நான்கு பைனரி சேர்க்கைகள் பெரிய அளவில் பயன்படுத்தப்படும்போது ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிரான சினெர்ஜிஸ்டிக் லார்விசைடல் விளைவுகளையும் நிரூபித்தன (அட்டவணை 6).
வயது வந்த ஏடிஸ் எஜிப்டியின் பெரிய எண்ணிக்கையைக் கட்டுப்படுத்த, அடல்டோசிடல் பயோஅசேக்கு மூன்று சினெர்ஜிஸ்டிக் சேர்க்கைகள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன. பெரிய பூச்சி காலனிகளில் சோதிக்க சேர்க்கைகளைத் தேர்ந்தெடுக்க, முதலில் இரண்டு சிறந்த சினெர்ஜிஸ்டிக் டெர்பீன் சேர்க்கைகளில் கவனம் செலுத்தினோம், அதாவது கார்வோன் பிளஸ் லிமோனீன் மற்றும் யூகலிப்டால் பிளஸ் யூடெஸ்மால். இரண்டாவதாக, செயற்கை ஆர்கனோபாஸ்பேட் மாலத்தியான் மற்றும் டெர்பெனாய்டுகளின் கலவையிலிருந்து சிறந்த சினெர்ஜிஸ்டிக் சேர்க்கை தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டது. அதிக அளவில் காணப்பட்ட இறப்பு மற்றும் வேட்பாளர் பொருட்களின் மிகக் குறைந்த LC50 மதிப்புகள் காரணமாக, பெரிய பூச்சி காலனிகளில் சோதனை செய்வதற்கு மாலத்தியான் மற்றும் யூடெஸ்மால் ஆகியவற்றின் கலவையே சிறந்த கலவை என்று நாங்கள் நம்புகிறோம். மாலத்தியான் α-பினீன், டயல்லைல் டைசல்பைட், யூகலிப்டஸ், கார்வோன் மற்றும் யூடெஸ்மால் ஆகியவற்றுடன் இணைந்து சினெர்ஜிசத்தை வெளிப்படுத்துகிறது. ஆனால் LC50 மதிப்புகளைப் பார்த்தால், யூடெஸ்மால் மிகக் குறைந்த மதிப்பைக் கொண்டுள்ளது (2.25 ppm). மாலத்தியான், α-பினீன், டயல்லைல் டைசல்பைடு, யூகலிப்டால் மற்றும் கார்வோன் ஆகியவற்றின் கணக்கிடப்பட்ட LC50 மதிப்புகள் முறையே 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 மற்றும் 140.79 ppm ஆகும். இந்த மதிப்புகள் மாலத்தியான் மற்றும் யூடெஸ்மால் ஆகியவற்றின் கலவையானது மருந்தளவு அடிப்படையில் உகந்த கலவையாகும் என்பதைக் குறிக்கிறது. கார்வோன் மற்றும் லிமோனீன் மற்றும் யூடெஸ்மால் மற்றும் மாலத்தியான் ஆகியவற்றின் சேர்க்கைகள் 100% இறப்பு விகிதத்தைக் கொண்டிருந்தன, எதிர்பார்க்கப்படும் இறப்பு விகிதம் 61% முதல் 65% வரை இருந்தது. மற்றொரு கலவையான யூடெஸ்மால் மற்றும் யூகலிப்டால், 24 மணிநேர வெளிப்பாட்டிற்குப் பிறகு 78.66% இறப்பு விகிதத்தைக் காட்டியது, எதிர்பார்க்கப்படும் இறப்பு விகிதம் 60% உடன் ஒப்பிடும்போது. தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட மூன்று சேர்க்கைகளும் வயதுவந்த ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிராக பெரிய அளவில் பயன்படுத்தப்பட்டாலும் ஒருங்கிணைந்த விளைவுகளைக் காட்டின (அட்டவணை 6).
இந்த ஆய்வில், Mp, As, Os, Em மற்றும் Cl போன்ற தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட தாவர EOக்கள், Aedes aegyptiயின் லார்வா மற்றும் முதிர்ந்த நிலைகளில் நம்பிக்கைக்குரிய ஆபத்தான விளைவுகளைக் காட்டின. Mp EO 0.42 ppm என்ற LC50 மதிப்புடன் அதிக லார்விசைடல் செயல்பாட்டைக் கொண்டிருந்தது, அதைத் தொடர்ந்து As, Os மற்றும் Em EOக்கள் 24 மணிநேரத்திற்குப் பிறகு 50 ppm க்கும் குறைவான LC50 மதிப்பைக் கொண்டிருந்தன. இந்த முடிவுகள் கொசுக்கள் மற்றும் பிற டிப்டெரஸ் ஈக்கள் பற்றிய முந்தைய ஆய்வுகளுடன் ஒத்துப்போகின்றன. Cl இன் லார்விசைடல் ஆற்றல் மற்ற அத்தியாவசிய எண்ணெய்களை விடக் குறைவாக இருந்தாலும், 24 மணிநேரத்திற்குப் பிறகு 163.65 ppm என்ற LC50 மதிப்புடன், அதன் வயதுவந்த திறன் 24 மணிநேரத்திற்குப் பிறகு 23.37 ppm என்ற LC50 மதிப்புடன் மிக அதிகமாக உள்ளது. Mp, As மற்றும் Em EOக்கள் 24 மணிநேர வெளிப்பாட்டில் 100–120 ppm வரம்பில் LC50 மதிப்புகளுடன் நல்ல ஒவ்வாமை எதிர்ப்பு திறனைக் காட்டின, ஆனால் அவற்றின் லார்விசைடல் செயல்திறனை விட ஒப்பீட்டளவில் குறைவாக இருந்தன. மறுபுறம், EO Os மிக உயர்ந்த சிகிச்சை அளவிலும் கூட மிகக் குறைவான ஒவ்வாமை எதிர்ப்பு விளைவைக் காட்டியது. இதனால், தாவரங்களுக்கு எத்திலீன் ஆக்சைட்டின் நச்சுத்தன்மை கொசுக்களின் வளர்ச்சி நிலையைப் பொறுத்து மாறுபடலாம் என்று முடிவுகள் குறிப்பிடுகின்றன. இது பூச்சியின் உடலில் EOக்களின் ஊடுருவல் விகிதம், குறிப்பிட்ட இலக்கு நொதிகளுடனான அவற்றின் தொடர்பு மற்றும் ஒவ்வொரு வளர்ச்சி நிலையிலும் கொசுவின் நச்சு நீக்கும் திறன் ஆகியவற்றையும் சார்ந்துள்ளது16. எத்திலீன் ஆக்சைட்டின் உயிரியல் செயல்பாட்டில் முக்கிய கூறு கலவை ஒரு முக்கிய காரணியாக இருப்பதாக ஏராளமான ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன, ஏனெனில் இது மொத்த சேர்மங்களில் பெரும்பகுதியைக் கொண்டுள்ளது3,12,17,18. எனவே, ஒவ்வொரு EOவிலும் இரண்டு முக்கிய சேர்மங்களைக் கருத்தில் கொண்டோம். GC-MS முடிவுகளின் அடிப்படையில், டயாலில் டைசல்பைடு மற்றும் டயாலில் ட்ரைசல்பைடு ஆகியவை EO As இன் முக்கிய சேர்மங்களாக அடையாளம் காணப்பட்டன, இது முந்தைய அறிக்கைகளுடன் ஒத்துப்போகிறது19,20,21. முந்தைய அறிக்கைகள் மெந்தோல் அதன் முக்கிய சேர்மங்களில் ஒன்று என்று சுட்டிக்காட்டினாலும், கார்வோன் மற்றும் லிமோனீன் மீண்டும் Mp EO22,23 இன் முக்கிய சேர்மங்களாக அடையாளம் காணப்பட்டன. Os EO இன் கலவை சுயவிவரம் யூஜெனால் மற்றும் மெத்தில் யூஜெனால் ஆகியவை முக்கிய சேர்மங்கள் என்பதைக் காட்டியது, இது முந்தைய ஆராய்ச்சியாளர்களின் கண்டுபிடிப்புகளைப் போன்றது16,24. யூகலிப்டால் மற்றும் யூகலிப்டால் ஆகியவை Em இலை எண்ணெயில் உள்ள முக்கிய சேர்மங்களாக அறிவிக்கப்பட்டுள்ளன, இது சில ஆராய்ச்சியாளர்களின் கண்டுபிடிப்புகளுடன் ஒத்துப்போகிறது25,26 ஆனால் ஓலாலேட் மற்றும் பலரின் கண்டுபிடிப்புகளுக்கு முரணானது.27. மெலலூகா அத்தியாவசிய எண்ணெயில் சினியோல் மற்றும் α-பினீனின் ஆதிக்கம் காணப்பட்டது, இது முந்தைய ஆய்வுகளைப் போன்றது28,29. வெவ்வேறு இடங்களில் ஒரே தாவர இனங்களிலிருந்து பிரித்தெடுக்கப்படும் அத்தியாவசிய எண்ணெய்களின் கலவை மற்றும் செறிவு ஆகியவற்றில் குறிப்பிட்ட வேறுபாடுகள் பதிவாகியுள்ளன, மேலும் இந்த ஆய்வில் அவை காணப்பட்டன, அவை புவியியல் தாவர வளர்ச்சி நிலைமைகள், அறுவடை நேரம், வளர்ச்சி நிலை அல்லது தாவர வயது. வேதியியல் வகைகளின் தோற்றம் போன்றவைகளால் பாதிக்கப்படுகின்றன. 22,30,31,32. அடையாளம் காணப்பட்ட முக்கிய சேர்மங்கள் பின்னர் வாங்கப்பட்டு அவற்றின் லார்விசைடல் விளைவுகள் மற்றும் வயதுவந்த ஏடிஸ் எஜிப்டி கொசுக்களின் மீதான விளைவுகளுக்காக சோதிக்கப்பட்டன. டயல் டைசல்பைட்டின் லார்விசைடல் செயல்பாடு கச்சா EO As உடன் ஒப்பிடத்தக்கது என்பதை முடிவுகள் காட்டுகின்றன. ஆனால் டயல் ட்ரைசல்பைட்டின் செயல்பாடு EO As ஐ விட அதிகமாக உள்ளது. இந்த முடிவுகள் கிம்பாரிஸ் மற்றும் பலர் கியூலெக்ஸ் பிலிப்பைன்ஸில் பெற்றதைப் போன்றது. இருப்பினும், இந்த இரண்டு சேர்மங்களும் இலக்கு கொசுக்களுக்கு எதிராக நல்ல தன்னியக்க செயல்பாட்டைக் காட்டவில்லை, இது டெனெப்ரியோ மோலிட்டரில் பிளாட்டா-ரூடா மற்றும் பலர் 34 இன் முடிவுகளுடன் ஒத்துப்போகிறது. ஓஎஸ் EO ஏடிஸ் எஜிப்டியின் லார்வா நிலைக்கு எதிராக செயல்படுகிறது, ஆனால் வயதுவந்த நிலைக்கு எதிராக அல்ல. முக்கிய தனிப்பட்ட சேர்மங்களின் லார்விசைடல் செயல்பாடு கச்சா Os EO ஐ விட குறைவாக உள்ளது என்பது நிறுவப்பட்டுள்ளது. இது கச்சா எத்திலீன் ஆக்சைடில் மற்ற சேர்மங்களுக்கும் அவற்றின் தொடர்புகளுக்கும் ஒரு பங்கைக் குறிக்கிறது. மெத்தில் யூஜெனால் மட்டுமே மிகக் குறைவான செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது, அதேசமயம் யூஜெனால் மட்டுமே மிதமான லார்விசைடல் செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது. இந்த முடிவு ஒருபுறம், 35,36 என்பதை உறுதிப்படுத்துகிறது, மறுபுறம், முந்தைய ஆராய்ச்சியாளர்களின் முடிவுகளுக்கு முரணானது37,38. யூஜெனால் மற்றும் மெத்தில்யூஜெனோலின் செயல்பாட்டுக் குழுக்களில் உள்ள வேறுபாடுகள் ஒரே இலக்கு பூச்சிக்கு வெவ்வேறு நச்சுத்தன்மையை ஏற்படுத்தக்கூடும்39. லிமோனீன் மிதமான லார்விசைடல் செயல்பாட்டைக் கொண்டிருப்பதாகக் கண்டறியப்பட்டது, அதே நேரத்தில் கார்வோனின் விளைவு மிகக் குறைவு. இதேபோல், வயதுவந்த பூச்சிகளுக்கு லிமோனீனின் ஒப்பீட்டளவில் குறைந்த நச்சுத்தன்மை மற்றும் கார்வோனின் அதிக நச்சுத்தன்மை சில முந்தைய ஆய்வுகளின் முடிவுகளை ஆதரிக்கிறது40 ஆனால் மற்றவற்றுக்கு முரணானது41. இன்ட்ராசைக்ளிக் மற்றும் எக்சோசைக்ளிக் நிலைகள் இரண்டிலும் இரட்டைப் பிணைப்புகள் இருப்பது லார்விசைடுகளாக இந்த சேர்மங்களின் நன்மைகளை அதிகரிக்கக்கூடும்3,41, அதே நேரத்தில் நிறைவுறா ஆல்பா மற்றும் பீட்டா கார்பன்களைக் கொண்ட கீட்டோனான கார்வோன், பெரியவர்களில் நச்சுத்தன்மைக்கு அதிக ஆற்றலை வெளிப்படுத்தக்கூடும்42. இருப்பினும், லிமோனீன் மற்றும் கார்வோனின் தனிப்பட்ட பண்புகள் மொத்த EO Mp ஐ விட மிகக் குறைவு (அட்டவணை 1, அட்டவணை 3). பரிசோதிக்கப்பட்ட டெர்பெனாய்டுகளில், யூடெஸ்மால் 2.5 ppm க்கும் குறைவான LC50 மதிப்புடன் மிகப்பெரிய லார்விசைடு மற்றும் வயதுவந்த செயல்பாட்டைக் கொண்டிருப்பதாகக் கண்டறியப்பட்டது, இது ஏடிஸ் கொசுக்களைக் கட்டுப்படுத்துவதற்கான ஒரு நம்பிக்கைக்குரிய சேர்மமாக அமைகிறது. அதன் செயல்திறன் முழு EO Em ஐ விட சிறந்தது, இருப்பினும் இது செங் மற்றும் பலரின் கண்டுபிடிப்புகளுடன் ஒத்துப்போகவில்லை. யூடெஸ்மால் என்பது யூகலிப்டஸ் போன்ற ஆக்ஸிஜனேற்றப்பட்ட மோனோடெர்பீன்களை விட குறைவான ஆவியாகும் இரண்டு ஐசோபிரீன் அலகுகளைக் கொண்ட ஒரு செஸ்குவிடர்பீன் ஆகும், எனவே பூச்சிக்கொல்லியாக அதிக ஆற்றலைக் கொண்டுள்ளது. யூகலிப்டால் லார்விசைடல் செயல்பாட்டை விட அதிக வயதுவந்தோரின் செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் முந்தைய ஆய்வுகளின் முடிவுகள் இதை ஆதரிக்கின்றன மற்றும் மறுக்கின்றன37,43,44. இந்த செயல்பாடு மட்டும் கிட்டத்தட்ட முழு EO Cl உடன் ஒப்பிடத்தக்கது. மற்றொரு பைசைக்ளிக் மோனோடெர்பீன், α-பினீன், லார்விசைடல் விளைவை விட ஏடிஸ் எஜிப்டியில் வயதுவந்தோரின் விளைவைக் குறைவாகக் கொண்டுள்ளது, இது முழு EO Cl இன் விளைவுக்கு எதிரானது. டெர்பெனாய்டுகளின் ஒட்டுமொத்த பூச்சிக்கொல்லி செயல்பாடு அவற்றின் லிப்போபிலிசிட்டி, நிலையற்ற தன்மை, கார்பன் கிளைத்தல், ப்ரொஜெக்ஷன் பகுதி, மேற்பரப்பு பகுதி, செயல்பாட்டுக் குழுக்கள் மற்றும் அவற்றின் நிலைகள்45,46 ஆகியவற்றால் பாதிக்கப்படுகிறது. இந்த சேர்மங்கள் செல் குவிப்புகளை அழிப்பதன் மூலமும், சுவாச செயல்பாட்டைத் தடுப்பதன் மூலமும், நரம்பு தூண்டுதலின் பரவலைத் தடுப்பதன் மூலமும் செயல்படலாம். 47 செயற்கை ஆர்கனோபாஸ்பேட் டெமெபோஸ் 0.43 பிபிஎம் என்ற LC50 மதிப்புடன் செயல்படக்கூடும், இது லெக்கின் தரவுகளுடன் ஒத்துப்போகிறது -உட்டாலா48. செயற்கை ஆர்கனோபாஸ்பரஸ் மாலத்தியனின் வயதுவந்தோரின் செயல்பாடு 5.44 பிபிஎம் என பதிவாகியுள்ளது. இந்த இரண்டு ஆர்கனோபாஸ்பேட்டுகளும் ஏடிஸ் எஜிப்டியின் ஆய்வக விகாரங்களுக்கு எதிராக சாதகமான பதில்களைக் காட்டினாலும், இந்த சேர்மங்களுக்கு கொசு எதிர்ப்பு உலகின் பல்வேறு பகுதிகளில் பதிவாகியுள்ளது49. இருப்பினும், மூலிகை மருந்துகளுக்கு எதிர்ப்பு வளர்ச்சியின் ஒத்த அறிக்கைகள் எதுவும் கண்டறியப்படவில்லை50. இதனால், நோய்க்கிருமி கட்டுப்பாட்டு திட்டங்களில் வேதியியல் பூச்சிக்கொல்லிகளுக்கு சாத்தியமான மாற்றாக தாவரவியல் கருதப்படுகிறது.
தைமெட்பாஸுடன் கூடிய சக்திவாய்ந்த டெர்பெனாய்டுகள் மற்றும் டெர்பெனாய்டுகளிலிருந்து தயாரிக்கப்பட்ட 28 பைனரி சேர்க்கைகளில் (1:1) லார்விசைடல் விளைவு சோதிக்கப்பட்டது, மேலும் 9 சேர்க்கைகள் சினெர்ஜிஸ்டிக், 14 விரோதமான மற்றும் 5 விரோதமானவை என்று கண்டறியப்பட்டது. எந்த விளைவும் இல்லை. மறுபுறம், வயதுவந்தோர் ஆற்றல் உயிரியல் பகுப்பாய்வில், 7 சேர்க்கைகள் சினெர்ஜிஸ்டிக், 15 சேர்க்கைகள் விரோதமானவை, மற்றும் 6 சேர்க்கைகள் எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தவில்லை என்று தெரிவிக்கப்பட்டது. சில சேர்க்கைகள் சினெர்ஜிஸ்டிக் விளைவை உருவாக்குவதற்கான காரணம், வெவ்வேறு முக்கியமான பாதைகளில் ஒரே நேரத்தில் தொடர்பு கொள்ளும் வேட்பாளர் சேர்மங்கள் அல்லது ஒரு குறிப்பிட்ட உயிரியல் பாதையின் வெவ்வேறு முக்கிய நொதிகளின் தொடர்ச்சியான தடுப்பு காரணமாக இருக்கலாம். டயல்லைல் டைசல்பைடு, யூகலிப்டஸ் அல்லது யூஜெனோலுடன் லிமோனீனின் கலவை சிறிய மற்றும் பெரிய அளவிலான பயன்பாடுகளில் சினெர்ஜிஸ்டிக் என்று கண்டறியப்பட்டது (அட்டவணை 6), அதே நேரத்தில் யூகலிப்டஸ் அல்லது α-பினீனுடன் அதன் கலவை லார்வாக்களில் விரோதமான விளைவுகளை ஏற்படுத்துவதாகக் கண்டறியப்பட்டது. சராசரியாக, லிமோனீன் ஒரு நல்ல சினெர்ஜிஸ்டாகத் தோன்றுகிறது, ஒருவேளை மீதில் குழுக்கள் இருப்பது, ஸ்ட்ராட்டம் கார்னியத்தில் நல்ல ஊடுருவல் மற்றும் செயல்பாட்டின் வேறுபட்ட வழிமுறை காரணமாக இருக்கலாம்52,53. பூச்சிகளின் வெட்டுக்காயங்களை ஊடுருவி (தொடர்பு நச்சுத்தன்மை), செரிமான அமைப்பை (ஆன்டிஃபீடன்ட்) அல்லது சுவாச அமைப்பை (ஃபியூமிகேஷன் செயல்பாடு) பாதிப்பதன் மூலம் லிமோனீன் நச்சு விளைவுகளை ஏற்படுத்தக்கூடும் என்று முன்னர் தெரிவிக்கப்பட்டது, 54 அதே நேரத்தில் யூஜெனால் போன்ற ஃபீனைல்புரோபனாய்டுகள் வளர்சிதை மாற்ற நொதிகளை பாதிக்கலாம் 55. எனவே, வெவ்வேறு செயல்பாட்டு வழிமுறைகளுடன் கூடிய சேர்மங்களின் சேர்க்கைகள் கலவையின் ஒட்டுமொத்த மரண விளைவை அதிகரிக்கக்கூடும். யூகலிப்டால் டயல் டைசல்பைடு, யூகலிப்டஸ் அல்லது α-பினீனுடன் சினெர்ஜிஸ்டிக் என்று கண்டறியப்பட்டது, ஆனால் மற்ற சேர்மங்களுடன் பிற சேர்க்கைகள் லார்விசைடல் அல்லாதவை அல்லது விரோதமானவை. யூகலிப்டால் அசிடைல்கொலினெஸ்டரேஸ் (AChE), ஆக்டாமைன் மற்றும் GABA ஏற்பிகள்56 ஆகியவற்றில் தடுப்பு செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது என்று ஆரம்பகால ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன. சுழற்சி மோனோடெர்பீன்கள், யூகலிப்டால், யூஜெனால் போன்றவை அவற்றின் நியூரோடாக்ஸிக் செயல்பாட்டின் அதே செயல்பாட்டு பொறிமுறையைக் கொண்டிருக்கலாம், [57] இதன் மூலம் பரஸ்பர தடுப்பு மூலம் அவற்றின் ஒருங்கிணைந்த விளைவுகளைக் குறைக்கிறது. அதேபோல், டயல்லைல் டைசல்பைடு, α-பினீன் மற்றும் லிமோனீனுடன் டெமெஃபோஸின் கலவையானது ஒருங்கிணைந்ததாகக் கண்டறியப்பட்டது, இது மூலிகைப் பொருட்கள் மற்றும் செயற்கை ஆர்கனோபாஸ்பேட்டுகளுக்கு இடையில் ஒரு ஒருங்கிணைந்த விளைவு பற்றிய முந்தைய அறிக்கைகளை ஆதரிக்கிறது58.
யூடெஸ்மால் மற்றும் யூகலிப்டால் ஆகியவற்றின் கலவையானது ஏடிஸ் எஜிப்டியின் லார்வா மற்றும் வயதுவந்த நிலைகளில் ஒரு ஒருங்கிணைந்த விளைவைக் கொண்டிருப்பதாகக் கண்டறியப்பட்டது, இது அவற்றின் வெவ்வேறு வேதியியல் கட்டமைப்புகள் காரணமாக அவற்றின் வெவ்வேறு செயல்பாட்டு முறைகள் காரணமாக இருக்கலாம். யூடெஸ்மால் (ஒரு செஸ்குவிடர்பீன்) சுவாச அமைப்பை பாதிக்கலாம் 59 மற்றும் யூகலிப்டால் (ஒரு மோனோடெர்பீன்) அசிடைல்கொலினெஸ்டரேஸை பாதிக்கலாம் 60 . இரண்டு அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட இலக்கு தளங்களுக்கு பொருட்களை இணைந்து வெளிப்படுத்துவது கலவையின் ஒட்டுமொத்த மரண விளைவை அதிகரிக்கக்கூடும். வயதுவந்த பொருள் உயிரியல் பகுப்பாய்வுகளில், மாலதியான் கார்வோன் அல்லது யூகலிப்டால் அல்லது யூகலிப்டால் அல்லது டயல் டைசல்பைடு அல்லது α-பினீனுடன் ஒருங்கிணைந்ததாகக் கண்டறியப்பட்டது, இது லிமோனீன் மற்றும் டை ஆகியவற்றைச் சேர்ப்பதன் மூலம் ஒருங்கிணைந்ததாகக் குறிக்கிறது. அல்லில் ட்ரைசல்பைடைத் தவிர, டெர்பீன் சேர்மங்களின் முழு போர்ட்ஃபோலியோவிற்கும் நல்ல ஒருங்கிணைந்த ஒவ்வாமை எதிர்ப்பு வேட்பாளர்கள். தங்கம் மற்றும் கதிரேசன்61 மூலிகைச் சாறுகளுடன் மாலதியனின் ஒருங்கிணைந்த விளைவின் ஒத்த முடிவுகளைப் புகாரளித்தனர். இந்த ஒருங்கிணைந்த பதில், பூச்சி நச்சு நீக்கும் நொதிகளில் மாலதியான் மற்றும் பைட்டோ கெமிக்கல்களின் ஒருங்கிணைந்த நச்சு விளைவுகளால் ஏற்படலாம். மாலதியான் போன்ற ஆர்கனோபாஸ்பேட்டுகள் பொதுவாக சைட்டோக்ரோம் P450 எஸ்டெரேஸ்கள் மற்றும் மோனோஆக்ஸிஜனேஸ்கள்62,63,64 ஆகியவற்றைத் தடுப்பதன் மூலம் செயல்படுகின்றன. எனவே, மாலதியான் இந்த செயல்பாட்டு வழிமுறைகளுடன் மற்றும் டெர்பீன்களை வெவ்வேறு செயல்பாட்டு வழிமுறைகளுடன் இணைப்பது கொசுக்கள் மீதான ஒட்டுமொத்த ஆபத்தான விளைவை அதிகரிக்கக்கூடும்.
மறுபுறம், தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட சேர்மங்கள் தனித்தனியாக ஒவ்வொரு சேர்மத்தையும் விட குறைவான செயலில் உள்ளன என்பதை விரோதம் குறிக்கிறது. சில சேர்க்கைகளில் விரோதத்திற்கான காரணம், ஒரு சேர்மம் உறிஞ்சுதல், விநியோகம், வளர்சிதை மாற்றம் அல்லது வெளியேற்ற விகிதத்தை மாற்றுவதன் மூலம் மற்றொரு சேர்மத்தின் நடத்தையை மாற்றியமைக்கிறது. ஆரம்பகால ஆராய்ச்சியாளர்கள் இதை மருந்து சேர்க்கைகளில் விரோதத்திற்கான காரணமாகக் கருதினர். மூலக்கூறுகள் சாத்தியமான வழிமுறை 65. இதேபோல், விரோதத்திற்கான சாத்தியமான காரணங்கள் ஒத்த செயல்பாட்டு வழிமுறைகளுடன் தொடர்புடையதாக இருக்கலாம், அதே ஏற்பி அல்லது இலக்கு தளத்திற்கான தொகுதி சேர்மங்களின் போட்டி. சில சந்தர்ப்பங்களில், இலக்கு புரதத்தின் போட்டியற்ற தடுப்பும் ஏற்படலாம். இந்த ஆய்வில், இரண்டு ஆர்கனோசல்பர் சேர்மங்கள், டயல்ல் டைசல்பைடு மற்றும் டயல்ல் ட்ரைசல்பைடு, விரோத விளைவுகளைக் காட்டின, ஒருவேளை ஒரே இலக்கு தளத்திற்கான போட்டி காரணமாக இருக்கலாம். அதேபோல், இந்த இரண்டு சல்பர் சேர்மங்களும் விரோத விளைவுகளைக் காட்டின, மேலும் யூட்ஸ்மால் மற்றும் α-பினீனுடன் இணைந்தால் எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தவில்லை. யூடெஸ்மால் மற்றும் ஆல்பா-பினீன் ஆகியவை சுழற்சி இயல்புடையவை, அதேசமயம் டயாலில் டைசல்பைடு மற்றும் டயாலில் ட்ரைசல்பைடு ஆகியவை அலிபாடிக் தன்மை கொண்டவை. வேதியியல் கட்டமைப்பின் அடிப்படையில், இந்த சேர்மங்களின் கலவையானது ஒட்டுமொத்த மரண செயல்பாட்டை அதிகரிக்க வேண்டும், ஏனெனில் அவற்றின் இலக்கு தளங்கள் பொதுவாக வேறுபட்டவை34,47, ஆனால் சோதனை ரீதியாக நாங்கள் விரோதத்தைக் கண்டறிந்தோம், இது விவோவில் சில அறியப்படாத உயிரினங்களில் இந்த சேர்மங்களின் பங்கு காரணமாக இருக்கலாம். தொடர்புகளின் விளைவாக அமைப்புகள். இதேபோல், சினியோல் மற்றும் α-பினீனின் கலவையானது எதிரெதிர் பதில்களை உருவாக்கியது, இருப்பினும் ஆராய்ச்சியாளர்கள் முன்பு இரண்டு சேர்மங்களும் வெவ்வேறு செயல்பாட்டு இலக்குகளைக் கொண்டுள்ளன47,60 என்று தெரிவித்தனர். இரண்டு சேர்மங்களும் சுழற்சி மோனோடெர்பீன்கள் என்பதால், பிணைப்புக்காக போட்டியிடக்கூடிய மற்றும் ஆய்வு செய்யப்பட்ட கூட்டு ஜோடிகளின் ஒட்டுமொத்த நச்சுத்தன்மையை பாதிக்கக்கூடிய சில பொதுவான இலக்கு தளங்கள் இருக்கலாம்.
LC50 மதிப்புகள் மற்றும் கவனிக்கப்பட்ட இறப்பு விகிதத்தின் அடிப்படையில், இரண்டு சிறந்த ஒருங்கிணைந்த டெர்பீன் சேர்க்கைகள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன, அதாவது கார்வோன் + லிமோனீன் மற்றும் யூகலிப்டால் + யூடெஸ்மால் ஜோடிகள், அதே போல் டெர்பீன்களுடன் செயற்கை ஆர்கனோபாஸ்பரஸ் மாலத்தியான். மாலத்தியான் + யூடெஸ்மால் சேர்மங்களின் உகந்த ஒருங்கிணைந்த கலவையானது ஒரு வயதுவந்த பூச்சிக்கொல்லி உயிரியல் பரிசோதனையில் சோதிக்கப்பட்டது. இந்த பயனுள்ள சேர்க்கைகள் ஒப்பீட்டளவில் பெரிய வெளிப்பாடு இடங்களில் அதிக எண்ணிக்கையிலான நபர்களுக்கு எதிராக செயல்பட முடியுமா என்பதை உறுதிப்படுத்த பெரிய பூச்சி காலனிகளை குறிவைக்கவும். இந்த சேர்க்கைகள் அனைத்தும் பூச்சிகளின் பெரிய கூட்டங்களுக்கு எதிராக ஒரு ஒருங்கிணைந்த விளைவைக் காட்டுகின்றன. ஏடிஸ் எஜிப்டி லார்வாக்களின் பெரிய மக்கள்தொகைக்கு எதிராக சோதிக்கப்பட்ட உகந்த ஒருங்கிணைந்த லார்விசைடல் சேர்க்கைக்கு இதே போன்ற முடிவுகள் பெறப்பட்டன. எனவே, தாவர EO சேர்மங்களின் பயனுள்ள ஒருங்கிணைந்த லார்விசைடல் மற்றும் வயதுவந்தோர் கொல்லி கலவையானது ஏற்கனவே உள்ள செயற்கை இரசாயனங்களுக்கு எதிராக ஒரு வலுவான வேட்பாளர் என்றும், ஏடிஸ் எஜிப்டி மக்களைக் கட்டுப்படுத்த மேலும் பயன்படுத்தப்படலாம் என்றும் கூறலாம். அதேபோல், கொசுக்களுக்கு நிர்வகிக்கப்படும் தைமெட்போஸ் அல்லது மாலத்தியான் அளவைக் குறைக்க செயற்கை லார்விசைடுகள் அல்லது டெர்பீன்களுடன் கூடிய வயதுவந்தோர் கொல்லிகளின் பயனுள்ள சேர்க்கைகளையும் பயன்படுத்தலாம். இந்த சக்திவாய்ந்த ஒருங்கிணைந்த சேர்க்கைகள், ஏடிஸ் கொசுக்களில் மருந்து எதிர்ப்பின் பரிணாமம் குறித்த எதிர்கால ஆய்வுகளுக்கு தீர்வுகளை வழங்கக்கூடும்.
ஏடிஸ் எகிப்தி முட்டைகள், இந்திய மருத்துவ ஆராய்ச்சி கவுன்சிலின் திப்ருகரில் உள்ள பிராந்திய மருத்துவ ஆராய்ச்சி மையத்திலிருந்து சேகரிக்கப்பட்டு, கௌஹாத்தி பல்கலைக்கழகத்தின் விலங்கியல் துறையில் கட்டுப்படுத்தப்பட்ட வெப்பநிலை (28 ± 1 °C) மற்றும் ஈரப்பதம் (85 ± 5%) கீழ் பின்வரும் நிபந்தனைகளின் கீழ் வைக்கப்பட்டன: அரிவோலி மற்றும் பலர் விவரிக்கப்பட்டனர். குஞ்சு பொரித்த பிறகு, லார்வாக்கள் லார்வா உணவு (நாய் பிஸ்கட் பவுடர் மற்றும் ஈஸ்ட் 3:1 விகிதத்தில்) மற்றும் பெரியவர்களுக்கு 10% குளுக்கோஸ் கரைசல் வழங்கப்பட்டது. தோன்றிய 3 வது நாளில் தொடங்கி, வயது வந்த பெண் கொசுக்கள் அல்பினோ எலிகளின் இரத்தத்தை உறிஞ்ச அனுமதிக்கப்பட்டன. வடிகட்டி காகிதத்தை ஒரு கிளாஸில் தண்ணீரில் ஊறவைத்து, முட்டையிடும் கூண்டில் வைக்கவும்.
தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட தாவர மாதிரிகள், அதாவது யூகலிப்டஸ் இலைகள் (மிர்டேசியே), புனித துளசி (லாமியாசியே), புதினா (லாமியாசியே), மெலலூகா (மிர்டேசியே) மற்றும் அல்லியம் பல்புகள் (அமரில்லிடேசியே). குவஹாத்தியில் இருந்து சேகரிக்கப்பட்டு, குவஹாத்தி பல்கலைக்கழகத்தின் தாவரவியல் துறையால் அடையாளம் காணப்பட்டது. சேகரிக்கப்பட்ட தாவர மாதிரிகள் (500 கிராம்) கிளெவெஞ்சர் கருவியைப் பயன்படுத்தி 6 மணி நேரம் நீர் வடிகட்டலுக்கு உட்படுத்தப்பட்டன. பிரித்தெடுக்கப்பட்ட EO சுத்தமான கண்ணாடி குப்பிகளில் சேகரிக்கப்பட்டு மேலும் ஆய்வுக்காக 4°C இல் சேமிக்கப்பட்டது.
உலக சுகாதார அமைப்பின் சற்று மாற்றியமைக்கப்பட்ட நிலையான நடைமுறைகளைப் பயன்படுத்தி லார்விசைடல் நச்சுத்தன்மை ஆய்வு செய்யப்பட்டது 67. DMSO ஐ ஒரு குழம்பாக்கியாகப் பயன்படுத்துங்கள். ஒவ்வொரு EO செறிவும் ஆரம்பத்தில் 100 மற்றும் 1000 ppm இல் சோதிக்கப்பட்டது, ஒவ்வொரு பிரதியிலும் 20 லார்வாக்களை வெளிப்படுத்தியது. முடிவுகளின் அடிப்படையில், ஒரு செறிவு வரம்பு பயன்படுத்தப்பட்டது மற்றும் இறப்பு 1 மணி நேரம் முதல் 6 மணி நேரம் வரை (1 மணி நேர இடைவெளியில்), மற்றும் சிகிச்சைக்குப் பிறகு 24 மணி நேரம், 48 மணி நேரம் மற்றும் 72 மணி நேரத்தில் பதிவு செய்யப்பட்டது. 24, 48 மற்றும் 72 மணிநேர வெளிப்பாட்டிற்குப் பிறகு சப்லெத்தல் செறிவுகள் (LC50) தீர்மானிக்கப்பட்டன. ஒவ்வொரு செறிவும் ஒரு எதிர்மறை கட்டுப்பாடு (தண்ணீர் மட்டும்) மற்றும் ஒரு நேர்மறை கட்டுப்பாடு (DMSO- சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட நீர்) ஆகியவற்றுடன் மும்மடங்காக மதிப்பிடப்பட்டது. கூட்டுப்புழு ஏற்பட்டு கட்டுப்பாட்டு குழுவின் லார்வாக்களில் 10% க்கும் அதிகமானவை இறந்தால், பரிசோதனை மீண்டும் செய்யப்படுகிறது. கட்டுப்பாட்டு குழுவில் இறப்பு விகிதம் 5-10% க்கு இடையில் இருந்தால், அபோட் திருத்த சூத்திரம் 68 ஐப் பயன்படுத்தவும்.
ராமர் மற்றும் பலர் விவரித்த முறை, அசிட்டோனை கரைப்பானாகப் பயன்படுத்தி ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிரான வயதுவந்த உயிரியல் பகுப்பாய்விற்குப் பயன்படுத்தப்பட்டது. ஒவ்வொரு EOவும் ஆரம்பத்தில் 100 மற்றும் 1000 ppm செறிவுகளில் வயதுவந்த ஏடிஸ் எஜிப்டி கொசுக்களுக்கு எதிராக சோதிக்கப்பட்டது. தயாரிக்கப்பட்ட ஒவ்வொரு கரைசலிலும் 2 மில்லி வாட்மேன் எண்ணில் தடவவும். 1 துண்டு வடிகட்டி காகிதம் (அளவு 12 x 15 செ.மீ2) மற்றும் அசிட்டோன் 10 நிமிடங்கள் ஆவியாகட்டும். 2 மில்லி அசிட்டோனுடன் மட்டுமே சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட வடிகட்டி காகிதம் ஒரு கட்டுப்பாட்டாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. அசிட்டோன் ஆவியாகிய பிறகு, சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட வடிகட்டி காகிதம் மற்றும் கட்டுப்பாட்டு வடிகட்டி காகிதம் ஒரு உருளைக் குழாயில் (10 செ.மீ ஆழம்) வைக்கப்படுகின்றன. 3 முதல் 4 நாட்கள் வயதுடைய இரத்தம் ஊட்டாத பத்து கொசுக்கள் ஒவ்வொரு செறிவின் மும்மடங்குகளுக்கு மாற்றப்பட்டன. ஆரம்ப சோதனைகளின் முடிவுகளின் அடிப்படையில், தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட எண்ணெய்களின் பல்வேறு செறிவுகள் சோதிக்கப்பட்டன. கொசு வெளியான 1 மணிநேரம், 2 மணிநேரம், 3 மணிநேரம், 4 மணிநேரம், 5 மணிநேரம், 6 மணிநேரம், 24 மணிநேரம், 48 மணிநேரம் மற்றும் 72 மணிநேரங்களில் இறப்பு பதிவு செய்யப்பட்டது. 24 மணிநேரம், 48 மணிநேரம் மற்றும் 72 மணிநேர வெளிப்பாடு நேரங்களுக்கு LC50 மதிப்புகளைக் கணக்கிடுங்கள். கட்டுப்பாட்டு இடத்தின் இறப்பு விகிதம் 20% ஐ விட அதிகமாக இருந்தால், முழு சோதனையையும் மீண்டும் செய்யவும். அதேபோல், கட்டுப்பாட்டு குழுவில் இறப்பு விகிதம் 5% ஐ விட அதிகமாக இருந்தால், அபோட்டின் சூத்திரத்தைப் பயன்படுத்தி சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மாதிரிகளுக்கான முடிவுகளை சரிசெய்யவும்68.
தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட அத்தியாவசிய எண்ணெய்களின் கூறு சேர்மங்களை பகுப்பாய்வு செய்ய வாயு குரோமடோகிராபி (அஜிலன்ட் 7890A) மற்றும் நிறை நிறமாலை அளவீடு (Accu TOF GCv, ஜியோல்) ஆகியவை செய்யப்பட்டன. GC ஒரு FID டிடெக்டர் மற்றும் ஒரு கேபிலரி நெடுவரிசை (HP5-MS) உடன் பொருத்தப்பட்டிருந்தது. கேரியர் வாயு ஹீலியம், ஓட்ட விகிதம் 1 மிலி/நிமிடமாக இருந்தது. GC நிரல் அல்லியம் சாடிவத்தை 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M ஆகவும், ஓசிமம் செயிண்டமை 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280 ஆகவும், புதினாவுக்கு 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280 ஆகவும், யூகலிப்டஸுக்கு 20.60-1M-10-200-3M-30-280 ஆகவும், சிவப்புக்கு ஆயிரம் அடுக்குகளுக்கு அவை 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M ஆகவும் அமைக்கிறது.
ஒவ்வொரு EO-வின் முக்கிய சேர்மங்களும் GC குரோமடோகிராம் மற்றும் நிறை நிறமாலையியல் முடிவுகளிலிருந்து கணக்கிடப்பட்ட பரப்பளவு சதவீதத்தின் அடிப்படையில் அடையாளம் காணப்பட்டன (NIST 70 தரநிலை தரவுத்தளத்தில் குறிப்பிடப்பட்டுள்ளது).
ஒவ்வொரு EO-விலும் உள்ள இரண்டு முக்கிய சேர்மங்கள் GC-MS முடிவுகளின் அடிப்படையில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன, மேலும் உயிரியல் பரிசோதனைகளுக்காக 98–99% தூய்மையுடன் சிக்மா-ஆல்ட்ரிச்சிலிருந்து வாங்கப்பட்டன. மேலே விவரிக்கப்பட்டுள்ளபடி, ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிரான லார்விசைடல் மற்றும் வயதுவந்தோரின் செயல்திறனுக்காக இந்த சேர்மங்கள் சோதிக்கப்பட்டன. பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் செயற்கை லார்விசைடுகள் டேம்போசேட் (சிக்மா ஆல்ட்ரிச்) மற்றும் வயதுவந்தோரின் மருந்து மாலத்தியான் (சிக்மா ஆல்ட்ரிச்) ஆகியவை தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட EO சேர்மங்களுடன் அவற்றின் செயல்திறனை ஒப்பிட்டுப் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன, அதே நடைமுறையைப் பின்பற்றின.
தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட டெர்பீன் சேர்மங்கள் மற்றும் டெர்பீன் சேர்மங்கள் மற்றும் வணிக ஆர்கனோபாஸ்பேட்டுகள் (டைல்ஃபோஸ் மற்றும் மாலத்தியான்) ஆகியவற்றின் பைனரி கலவைகள், ஒவ்வொரு வேட்பாளர் சேர்மத்தின் LC50 அளவை 1:1 விகிதத்தில் கலப்பதன் மூலம் தயாரிக்கப்பட்டன. தயாரிக்கப்பட்ட சேர்க்கைகள் மேலே விவரிக்கப்பட்டபடி ஏடிஸ் எஜிப்டியின் லார்வா மற்றும் வயதுவந்த நிலைகளில் சோதிக்கப்பட்டன. ஒவ்வொரு உயிரியல் பகுப்பாய்வும் ஒவ்வொரு சேர்க்கைக்கும் மும்மடங்காகவும், ஒவ்வொரு கலவையிலும் உள்ள தனிப்பட்ட சேர்மங்களுக்கு மும்மடங்காகவும் செய்யப்பட்டது. இலக்கு பூச்சிகளின் இறப்பு 24 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு பதிவு செய்யப்பட்டது. பின்வரும் சூத்திரத்தைப் பயன்படுத்தி ஒரு பைனரி கலவைக்கான எதிர்பார்க்கப்படும் இறப்பு விகிதத்தைக் கணக்கிடுங்கள்.
இங்கு E = பைனரி சேர்க்கைக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக ஏடிஸ் எஜிப்டி கொசுக்களின் எதிர்பார்க்கப்படும் இறப்பு விகிதம், அதாவது இணைப்பு (A + B).
ஒவ்வொரு பைனரி கலவையின் விளைவும், பாவ்லா52 விவரித்த முறையால் கணக்கிடப்பட்ட χ2 மதிப்பின் அடிப்படையில் சினெர்ஜிஸ்டிக், எதிரெதிர் அல்லது விளைவு இல்லாதது என பெயரிடப்பட்டது. பின்வரும் சூத்திரத்தைப் பயன்படுத்தி ஒவ்வொரு சேர்க்கைக்கும் χ2 மதிப்பைக் கணக்கிடுங்கள்.
கணக்கிடப்பட்ட χ2 மதிப்பு தொடர்புடைய சுதந்திர அளவுகளுக்கான அட்டவணை மதிப்பை விட அதிகமாக இருக்கும்போது (95% நம்பிக்கை இடைவெளி) ஒரு கலவையின் விளைவு சினெர்ஜிஸ்டிக் என வரையறுக்கப்பட்டது, மேலும் கவனிக்கப்பட்ட இறப்பு எதிர்பார்க்கப்படும் இறப்பை விட அதிகமாக இருப்பது கண்டறியப்பட்டது. இதேபோல், எந்தவொரு சேர்க்கைக்கும் கணக்கிடப்பட்ட χ2 மதிப்பு சில சுதந்திர அளவுகளுடன் அட்டவணை மதிப்பை விட அதிகமாக இருந்தால், ஆனால் கவனிக்கப்பட்ட இறப்பு எதிர்பார்க்கப்படும் இறப்பை விடக் குறைவாக இருந்தால், சிகிச்சையானது முரண்பாடாகக் கருதப்படுகிறது. மேலும் எந்தவொரு கலவையிலும் χ2 இன் கணக்கிடப்பட்ட மதிப்பு தொடர்புடைய சுதந்திர அளவுகளில் அட்டவணை மதிப்பை விடக் குறைவாக இருந்தால், கலவை எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தாது என்று கருதப்படுகிறது.
அதிக எண்ணிக்கையிலான பூச்சிகளுக்கு எதிராக சோதனை செய்ய மூன்று முதல் நான்கு சாத்தியமான ஒருங்கிணைந்த சேர்க்கைகள் (100 லார்வாக்கள் மற்றும் 50 லார்விசைடல் மற்றும் வயது வந்த பூச்சி செயல்பாடு) தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன. பெரியவர்கள்) மேலே குறிப்பிட்டபடி தொடரவும். கலவைகளுடன், தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட கலவைகளில் உள்ள தனிப்பட்ட சேர்மங்கள் சம எண்ணிக்கையிலான ஏடிஸ் எஜிப்டி லார்வாக்கள் மற்றும் பெரியவர்கள் மீது சோதிக்கப்பட்டன. சேர்க்கை விகிதம் ஒரு வேட்பாளர் சேர்மத்தின் ஒரு பங்கு LC50 டோஸ் மற்றும் மற்றொரு கூறு சேர்மத்தின் ஒரு பகுதி LC50 டோஸ் ஆகும். வயது வந்தோர் செயல்பாட்டு உயிரியல் பகுப்பாய்வில், தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட சேர்மங்கள் கரைப்பான் அசிட்டோனில் கரைக்கப்பட்டு 1300 செ.மீ 3 உருளை பிளாஸ்டிக் கொள்கலனில் சுற்றப்பட்ட வடிகட்டி காகிதத்தில் பயன்படுத்தப்பட்டன. அசிட்டோன் 10 நிமிடங்களுக்கு ஆவியாகி, பெரியவர்கள் வெளியிடப்பட்டனர். இதேபோல், லார்விசைடல் உயிரியல் பகுப்பாய்வில், LC50 வேட்பாளர் சேர்மங்களின் அளவுகள் முதலில் சம அளவு DMSO இல் கரைக்கப்பட்டு, பின்னர் 1300 cc பிளாஸ்டிக் கொள்கலன்களில் சேமிக்கப்பட்ட 1 லிட்டர் தண்ணீரில் கலக்கப்பட்டன, மேலும் லார்வாக்கள் வெளியிடப்பட்டன.
LC50 மதிப்புகளைக் கணக்கிட SPSS (பதிப்பு 16) மற்றும் மினிடாப் மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி பதிவுசெய்யப்பட்ட 71 இறப்பு தரவுகளின் நிகழ்தகவு பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது.