ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு (டிப்டெரா: குலிசிடே) எதிராக லார்விசைடல் மற்றும் வயது வந்தோருக்கான தீர்வாக தாவர அத்தியாவசிய எண்ணெய்களை அடிப்படையாகக் கொண்ட டெர்பீன் கலவைகளின் கலவை

Nature.com ஐப் பார்வையிட்டதற்கு நன்றி.நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவியின் பதிப்பு குறைந்த CSS ஆதரவைக் கொண்டுள்ளது.சிறந்த முடிவுகளுக்கு, உங்கள் உலாவியின் புதிய பதிப்பைப் பயன்படுத்துமாறு பரிந்துரைக்கிறோம் (அல்லது Internet Explorer இல் பொருந்தக்கூடிய பயன்முறையை முடக்கவும்).இதற்கிடையில், தற்போதைய ஆதரவை உறுதிப்படுத்த, ஸ்டைலிங் அல்லது ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் தளத்தைக் காண்பிக்கிறோம்.
தாவரத்திலிருந்து பெறப்பட்ட பூச்சிக்கொல்லி சேர்மங்களின் சேர்க்கைகள் பூச்சிகளுக்கு எதிராக ஒருங்கிணைந்த அல்லது விரோதமான தொடர்புகளை வெளிப்படுத்தலாம்.ஏடிஸ் கொசுக்களால் பரவும் நோய்களின் விரைவான பரவல் மற்றும் பாரம்பரிய பூச்சிக்கொல்லிகளுக்கு ஏடிஸ் கொசுக்களின் எண்ணிக்கை அதிகரித்து வருவதால், தாவர அத்தியாவசிய எண்ணெய்களின் அடிப்படையில் டெர்பீன் கலவைகளின் இருபத்தெட்டு கலவைகள் உருவாக்கப்பட்டு ஏடிஸ் ஈஜிப்டியின் லார்வா மற்றும் வயதுவந்த நிலைகளுக்கு எதிராக சோதிக்கப்பட்டது.ஐந்து தாவர அத்தியாவசிய எண்ணெய்கள் (EO கள்) ஆரம்பத்தில் அவற்றின் லார்விசைடல் மற்றும் வயதுவந்தோர் பயன்பாட்டு செயல்திறனுக்காக மதிப்பீடு செய்யப்பட்டன, மேலும் GC-MS முடிவுகளின் அடிப்படையில் ஒவ்வொரு EO விலும் இரண்டு முக்கிய கலவைகள் அடையாளம் காணப்பட்டன.முக்கியமாக அடையாளம் காணப்பட்ட சேர்மங்கள் வாங்கப்பட்டன, அதாவது டயல் டிசல்பைட், டயல்ல் ட்ரைசல்பைட், கார்வோன், லிமோனென், யூஜெனால், மெத்தில் யூஜெனோல், யூகலிப்டால், யூடெஸ்மால் மற்றும் கொசு ஆல்பா-பினென்.இந்த சேர்மங்களின் பைனரி சேர்க்கைகள் சப்லெதல் டோஸ்களைப் பயன்படுத்தி தயாரிக்கப்பட்டன மற்றும் அவற்றின் ஒருங்கிணைந்த மற்றும் விரோத விளைவுகள் சோதிக்கப்பட்டு தீர்மானிக்கப்பட்டன.சிறந்த லார்விசைடல் கலவைகள் லிமோனீனை டயல் டிசல்பைடுடன் கலப்பதன் மூலம் பெறப்படுகின்றன, மேலும் சிறந்த முதிர்ச்சியுள்ள கலவைகள் கார்வோனை லிமோனீனுடன் கலப்பதன் மூலம் பெறப்படுகின்றன.வணிக ரீதியாகப் பயன்படுத்தப்படும் செயற்கை லார்விசைட் டெம்போஸ் மற்றும் வயது வந்தோருக்கான மருந்து மாலத்தியான் ஆகியவை தனித்தனியாகவும் டெர்பெனாய்டுகளுடன் பைனரி கலவையாகவும் சோதிக்கப்பட்டன.டெம்போஸ் மற்றும் டயல் டைசல்பைட் மற்றும் மாலத்தியான் மற்றும் யூடெஸ்மால் ஆகியவற்றின் கலவையானது மிகவும் பயனுள்ள கலவையாகும் என்று முடிவுகள் காட்டுகின்றன.இந்த ஆற்றல்மிக்க சேர்க்கைகள் ஏடிஸ் ஈஜிப்டிக்கு எதிராகப் பயன்படுத்துவதற்கான திறனைக் கொண்டுள்ளன.
தாவர அத்தியாவசிய எண்ணெய்கள் (EO கள்) பல்வேறு உயிரியக்கக் கலவைகளைக் கொண்ட இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்றங்கள் மற்றும் செயற்கை பூச்சிக்கொல்லிகளுக்கு மாற்றாக பெருகிய முறையில் முக்கியத்துவம் பெறுகின்றன.அவை சுற்றுச்சூழலுக்கு உகந்தவை மற்றும் பயனர் நட்புடன் மட்டுமல்லாமல், அவை வெவ்வேறு உயிரியக்க கலவைகளின் கலவையாகும், இது மருந்து எதிர்ப்பை வளர்ப்பதற்கான வாய்ப்பைக் குறைக்கிறது1.GC-MS தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தி, ஆராய்ச்சியாளர்கள் பல்வேறு தாவர அத்தியாவசிய எண்ணெய்களின் உட்கூறுகளை ஆய்வு செய்தனர் மற்றும் 17,500 நறுமண தாவரங்களில் இருந்து 3,000 க்கும் மேற்பட்ட கலவைகளை அடையாளம் கண்டுள்ளனர்சில ஆய்வுகள் கலவையின் முக்கிய கூறுகளின் நச்சுத்தன்மை அதன் கச்சா எத்திலீன் ஆக்சைடுக்கு சமமானதாகவோ அல்லது அதிகமாகவோ இருப்பதை எடுத்துக்காட்டுகிறது.ஆனால் இரசாயன பூச்சிக்கொல்லிகளைப் போலவே தனிப்பட்ட சேர்மங்களின் பயன்பாடு மீண்டும் எதிர்ப்பின் வளர்ச்சிக்கு இடமளிக்கலாம்5,6.எனவே, பூச்சிக்கொல்லி செயல்திறனை மேம்படுத்துவதற்கும் இலக்கு பூச்சி மக்கள்தொகையில் எதிர்ப்பின் வாய்ப்பைக் குறைப்பதற்கும் எத்திலீன் ஆக்சைடு-அடிப்படையிலான சேர்மங்களின் கலவைகளைத் தயாரிப்பதில் தற்போதைய கவனம் உள்ளது.EO களில் இருக்கும் தனிப்பட்ட செயலில் உள்ள சேர்மங்கள் EO இன் ஒட்டுமொத்த செயல்பாட்டை பிரதிபலிக்கும் சேர்க்கைகளில் ஒருங்கிணைந்த அல்லது விரோத விளைவுகளை வெளிப்படுத்தலாம், இது முந்தைய ஆராய்ச்சியாளர்களால் நடத்தப்பட்ட ஆய்வுகளில் நன்கு வலியுறுத்தப்பட்டுள்ளது.திசையன் கட்டுப்பாட்டு திட்டத்தில் EO மற்றும் அதன் கூறுகளும் அடங்கும்.அத்தியாவசிய எண்ணெய்களின் கொசுக்கொல்லி செயல்பாடு குலெக்ஸ் மற்றும் அனோபிலஸ் கொசுக்களில் விரிவாக ஆய்வு செய்யப்பட்டுள்ளது.ஒட்டுமொத்த நச்சுத்தன்மையை அதிகரிக்கவும் பக்க விளைவுகளை குறைக்கவும் வணிக ரீதியாக பயன்படுத்தப்படும் செயற்கை பூச்சிக்கொல்லிகளுடன் பல்வேறு தாவரங்களை இணைப்பதன் மூலம் பயனுள்ள பூச்சிக்கொல்லிகளை உருவாக்க பல ஆய்வுகள் முயற்சித்தன.ஆனால் ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிரான இத்தகைய சேர்மங்கள் பற்றிய ஆய்வுகள் அரிதாகவே உள்ளன.மருத்துவ அறிவியலின் முன்னேற்றம் மற்றும் மருந்துகள் மற்றும் தடுப்பூசிகளின் வளர்ச்சி சில திசையன்களால் பரவும் நோய்களை எதிர்த்துப் போராட உதவியது.ஆனால் Aedes aegypti கொசுவால் பரவும் வைரஸின் வெவ்வேறு செரோடைப்கள் இருப்பதால், தடுப்பூசி திட்டங்கள் தோல்வியடைந்தன.எனவே, இது போன்ற நோய்கள் ஏற்படும் போது, ​​நோய் பரவாமல் தடுக்க திசையன் கட்டுப்பாட்டு திட்டங்கள் மட்டுமே ஒரே வழி.தற்போதைய சூழ்நிலையில், டெங்கு காய்ச்சல், ஜிகா, டெங்கு ரத்தக்கசிவு, மஞ்சள் காய்ச்சல் போன்ற பல்வேறு வைரஸ்கள் மற்றும் அவற்றின் செரோடைப்களின் முக்கிய திசையன்களில் ஏடிஸ் எஜிப்டியின் கட்டுப்பாடு மிகவும் முக்கியமானது. மிகவும் குறிப்பிடத்தக்க விஷயம் என்னவென்றால், இந்த எண்ணிக்கை ஏறக்குறைய அனைத்து வெக்டரால் பரவும் ஏடிஸ் மூலம் பரவும் நோய்களின் வழக்குகள் ஒவ்வொரு ஆண்டும் எகிப்தில் அதிகரித்து வருகின்றன மற்றும் உலகம் முழுவதும் அதிகரித்து வருகின்றன.எனவே, இந்தச் சூழலில், ஏடிஸ் ஈஜிப்டி மக்கள்தொகைக்கு சுற்றுச்சூழல் நட்பு மற்றும் பயனுள்ள கட்டுப்பாட்டு நடவடிக்கைகளை உருவாக்குவது அவசரத் தேவையாக உள்ளது.இந்த விஷயத்தில் சாத்தியமான வேட்பாளர்கள் EOக்கள், அவற்றின் தொகுதி கலவைகள் மற்றும் அவற்றின் சேர்க்கைகள்.எனவே, பூச்சிக்கொல்லி பண்புகளைக் கொண்ட ஐந்து தாவரங்களிலிருந்து (அதாவது புதினா, புனித துளசி, யூகலிப்டஸ் ஸ்பாட், அல்லியம் சல்பர் மற்றும் மெலலூகா) ஏடிஸ் ஈஜிப்டிக்கு எதிராக முக்கிய தாவர EO கலவைகளின் பயனுள்ள ஒருங்கிணைந்த கலவைகளை அடையாளம் காண இந்த ஆய்வு முயற்சித்தது.
தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட அனைத்து EO களும் 0.42 முதல் 163.65 ppm வரையிலான 24-h LC50 உடன் Aedes aegypti க்கு எதிராக சாத்தியமான லார்விசைடல் செயல்பாட்டை வெளிப்படுத்தின.24 மணிநேரத்தில் 0.42 பிபிஎம் என்ற LC50 மதிப்புடன் மிளகுக்கீரை (எம்பி) EO க்கு அதிக லார்விசைடல் செயல்பாடு பதிவு செய்யப்பட்டது, அதைத் தொடர்ந்து பூண்டு (As) LC50 மதிப்பு 16.19 பிபிஎம் 24 மணிநேரத்தில் (அட்டவணை 1).
Ocimum Saintum, Os EO தவிர, மற்ற நான்கு திரையிடப்பட்ட EOக்களும் வெளிப்படையான ஒவ்வாமை விளைவுகளைக் காட்டின, LC50 மதிப்புகள் 24 மணி நேர வெளிப்பாடு காலத்தில் 23.37 முதல் 120.16 ppm வரை இருக்கும்.வெளிப்பட்ட 24 மணி நேரத்திற்குள் எல்சி50 மதிப்பு 23.37 பிபிஎம் கொண்ட பெரியவர்களைக் கொல்வதில் தைமோபிலஸ் ஸ்ட்ரைட்டா (சிஎல்) ஈஓ மிகவும் பயனுள்ளதாக இருந்தது, அதைத் தொடர்ந்து யூகலிப்டஸ் மாகுலேட்டா (எம்) எல்சி50 மதிப்பு 101.91 பிபிஎம் (அட்டவணை 1) இருந்தது.மறுபுறம், Os க்கான LC50 மதிப்பு இன்னும் தீர்மானிக்கப்படவில்லை, ஏனெனில் அதிகபட்ச இறப்பு விகிதம் 53% அதிகபட்ச டோஸில் பதிவு செய்யப்பட்டுள்ளது (துணை படம் 3).
என்ஐஎஸ்டி நூலக தரவுத்தள முடிவுகள், ஜிசி குரோமடோகிராம் பகுதி சதவீதம் மற்றும் எம்எஸ் ஸ்பெக்ட்ரா முடிவுகள் (அட்டவணை 2) ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் ஒவ்வொரு ஈஓவிலும் உள்ள இரண்டு முக்கிய கூறு கலவைகள் அடையாளம் காணப்பட்டு தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன.EO ஐப் பொறுத்தவரை, அடையாளம் காணப்பட்ட முக்கிய சேர்மங்கள் டயல் டிசல்பைட் மற்றும் டயல் ட்ரைசல்பைட் ஆகும்;EO Mpக்கு கார்வோன் மற்றும் லிமோனீன் ஆகியவை அடையாளம் காணப்பட்ட முக்கிய சேர்மங்கள், EO Em க்கு அடையாளம் காணப்பட்ட முக்கிய கலவைகள் யூடெஸ்மால் மற்றும் யூகலிப்டால்;EO Osக்கு, யூஜெனோல் மற்றும் மெத்தில் யூஜெனோல் ஆகியவை அடையாளம் காணப்பட்டன, மேலும் EO Cl க்கு, யூஜெனால் மற்றும் α-pinene ஆகியவை அடையாளம் காணப்பட்ட முக்கிய சேர்மங்கள் (படம் 1, துணைப் புள்ளிவிவரங்கள் 5-8, துணை அட்டவணை 1-5).
தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட அத்தியாவசிய எண்ணெய்களின் முக்கிய டெர்பெனாய்டுகளின் மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரியின் முடிவுகள் (ஏ-டயல் டைசல்பைட்; பி-டயல்ல் ட்ரைசல்பைட்; சி-யூஜெனால்; டி-மெத்தில் யூஜெனால்; ஈ-லிமோனென்; எஃப்-அரோமேடிக் செப்பரோன்; ஜி-α-பினீன்; எச்-சினியோல் R-eudamol).
மொத்தம் ஒன்பது சேர்மங்கள் (டயல் டிசல்பைட், டயல்ல் ட்ரைசல்பைட், யூஜெனால், மீதில் யூஜெனால், கார்வோன், லிமோனீன், யூகலிப்டால், யூடெஸ்மால், α-பினீன்) பயனுள்ள சேர்மங்களாக அடையாளம் காணப்பட்டன, அவை EO இன் முக்கிய கூறுகளாக உள்ளன மற்றும் அவை தனித்தனியாக Aedes aegy valpti க்கு எதிராக பயோசேஸ் செய்யப்பட்டன. நிலைகள்..யூடெஸ்மால் கலவையானது 24 மணிநேர வெளிப்பாட்டிற்குப் பிறகு LC50 மதிப்பு 2.25 பிபிஎம் உடன் அதிக லார்விசைடல் செயல்பாட்டைக் கொண்டிருந்தது.10-20 பிபிஎம் வரம்பில் சராசரி சப்லெதல் டோஸ்களுடன், டயல்ல் டிசல்பைடு மற்றும் டயல்ல் ட்ரைசல்பைடு ஆகிய சேர்மங்களும் சாத்தியமான லார்விசைடு விளைவுகளைக் கொண்டிருப்பதாகக் கண்டறியப்பட்டுள்ளது.எல்சி50 மதிப்புகள் 63.35 பிபிஎம், 139.29 பிபிஎம் உடன் யூஜெனால், லிமோனென் மற்றும் யூகலிப்டால் கலவைகளுக்கு மிதமான லார்விசைடல் செயல்பாடு மீண்டும் காணப்பட்டது.மற்றும் 181.33 பிபிஎம் முறையே 24 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு (அட்டவணை 3).இருப்பினும், அதிக அளவுகளில் கூட மெத்தில் யூஜெனால் மற்றும் கார்வோனின் குறிப்பிடத்தக்க லார்விசைடல் திறன் கண்டறியப்படவில்லை, எனவே LC50 மதிப்புகள் கணக்கிடப்படவில்லை (அட்டவணை 3).டெமிஃபோஸ் என்ற செயற்கை புழுக்கொல்லியானது, 24 மணி நேர வெளிப்பாடுகளில் ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிராக சராசரியாக 0.43 பிபிஎம் என்ற கொடிய செறிவைக் கொண்டிருந்தது (அட்டவணை 3, துணை அட்டவணை 6).
பயனுள்ள EO இன் முக்கிய சேர்மங்களாக ஏழு சேர்மங்கள் (டயல் டிசல்பைட், டயல்ல் ட்ரைசல்பைட், யூகலிப்டால், α-பினீன், யூடெஸ்மால், லிமோனீன் மற்றும் கார்வோன்) அடையாளம் காணப்பட்டு, வயது வந்த எகிப்திய ஏடிஸ் கொசுக்களுக்கு எதிராக தனித்தனியாக சோதிக்கப்பட்டது.ப்ரோபிட் பின்னடைவு பகுப்பாய்வின்படி, யூடெஸ்மால் எல்சி50 மதிப்பான 1.82 பிபிஎம் உடன் அதிக திறன் கொண்டதாகக் கண்டறியப்பட்டது, அதைத் தொடர்ந்து யூகலிப்டால் எல்சி50 மதிப்பு 17.60 பிபிஎம் 24 மணி நேர வெளிப்பாடு நேரத்தில் உள்ளது.மீதமுள்ள ஐந்து கலவைகள் 140.79 முதல் 737.01 பிபிஎம் (அட்டவணை 3) வரையிலான LC50s கொண்ட பெரியவர்களுக்கு மிதமான தீங்கு விளைவிக்கும்.செயற்கையான ஆர்கனோபாஸ்பரஸ் மாலத்தியான் யூடெஸ்மாலை விட குறைவான ஆற்றல் கொண்டது மற்றும் மற்ற ஆறு சேர்மங்களை விட அதிகமாக இருந்தது, 24-மணிநேர வெளிப்பாடு காலத்தில் LC50 மதிப்பு 5.44 பிபிஎம் (அட்டவணை 3, துணை அட்டவணை 6).
1:1 விகிதத்தில் அவற்றின் LC50 அளவுகளின் பைனரி சேர்க்கைகளை உருவாக்க ஏழு சக்திவாய்ந்த ஈய கலவைகள் மற்றும் ஆர்கனோபாஸ்பரஸ் டேம்போசேட் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன.மொத்தம் 28 பைனரி சேர்க்கைகள் தயாரிக்கப்பட்டு ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிராக அவற்றின் லார்விசிடல் செயல்திறனுக்காக சோதிக்கப்பட்டது.ஒன்பது சேர்க்கைகள் சினெர்ஜிஸ்டிக் என்று கண்டறியப்பட்டது, 14 சேர்க்கைகள் விரோதமானவை, ஐந்து சேர்க்கைகள் லார்விசைடு அல்ல.சினெர்ஜிஸ்டிக் கலவைகளில், டயல் டிசல்பைட் மற்றும் டெமோஃபோல் ஆகியவற்றின் கலவையானது மிகவும் பயனுள்ளதாக இருந்தது, 24 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு 100% இறப்பு காணப்பட்டது (அட்டவணை 4).இதேபோல், டயலில் டிசல்பைடுடன் லிமோனீன் மற்றும் தைமெட்பாஸுடன் யூஜெனோலின் கலவைகள் 98.3% (அட்டவணை 5) கவனிக்கப்பட்ட லார்வா இறப்புடன் நல்ல ஆற்றலைக் காட்டின.மீதமுள்ள 4 சேர்க்கைகள், அதாவது யூடெஸ்மால் பிளஸ் யூகலிப்டால், யூடெஸ்மால் பிளஸ் லிமோனீன், யூகலிப்டால் பிளஸ் ஆல்பா-பினீன், ஆல்பா-பினீன் பிளஸ் டெமெஃபோஸ் ஆகியவையும் குறிப்பிடத்தக்க லார்விசைடல் செயல்திறனைக் காட்டின, இறப்பு விகிதங்கள் 90% ஐத் தாண்டின.எதிர்பார்க்கப்படும் இறப்பு விகிதம் 60-75%க்கு அருகில் உள்ளது.(அட்டவணை 4).இருப்பினும், α-பினீன் அல்லது யூகலிப்டஸுடன் லிமோனீனின் கலவையானது எதிர்விளைவுகளைக் காட்டியது.அதேபோல், யூஜெனோல் அல்லது யூகலிப்டஸ் அல்லது யூடெஸ்மால் அல்லது டயல்ல் ட்ரைசல்பைடு ஆகியவற்றுடன் டெமிஃபோஸின் கலவைகள் எதிர்விளைவுகளைக் கொண்டிருப்பது கண்டறியப்பட்டுள்ளது.அதேபோல, டயாலில் டிசல்பைடு மற்றும் டயாலில் ட்ரைசல்பைடு ஆகியவற்றின் கலவையும், யூடெஸ்மால் அல்லது யூஜெனோலுடன் இந்த சேர்மங்கள் இரண்டின் கலவையும் அவற்றின் லார்விசைடு செயலில் முரண்படுகின்றன.eugenol அல்லது α-pinene உடன் eudesmol கலவையுடன் முரண்பாடும் பதிவாகியுள்ளது.
வயது வந்தோருக்கான அமில செயல்பாட்டிற்காக சோதிக்கப்பட்ட அனைத்து 28 பைனரி கலவைகளில், 7 கலவைகள் ஒருங்கிணைந்தவை, 6 எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தவில்லை, மேலும் 15 விரோதமானவை.யூகலிப்டஸுடன் யூடெஸ்மால் மற்றும் கார்வோனுடன் லிமோனீன் கலவைகள் மற்ற சினெர்ஜிஸ்டிக் கலவைகளை விட மிகவும் பயனுள்ளதாக இருப்பது கண்டறியப்பட்டது, இறப்பு விகிதம் முறையே 76% மற்றும் 100% (அட்டவணை 5).லிமோனீன் மற்றும் டயல் ட்ரைசல்பைடு தவிர அனைத்து சேர்மங்களின் கலவையுடன் மாலத்தியான் ஒரு ஒருங்கிணைந்த விளைவை வெளிப்படுத்துகிறது.மறுபுறம், டயலில் டிசல்பைடு மற்றும் டயல் ட்ரைசல்பைடு மற்றும் யூகலிப்டஸ், அல்லது யூகலிப்டால், அல்லது கார்வோன் அல்லது லிமோனீன் ஆகியவற்றுடன் இரண்டின் கலவையும் இடையே முரண்பாடு கண்டறியப்பட்டுள்ளது.இதேபோல், யூடெஸ்மால் அல்லது லிமோனீனுடன் α-பினீன், கார்வோன் அல்லது லிமோனீனுடன் யூகலிப்டால் மற்றும் யூடெஸ்மால் அல்லது மாலத்தியனுடன் லிமோனீன் ஆகியவற்றின் கலவையானது விரோதமான லார்விசிடல் விளைவுகளைக் காட்டியது.மீதமுள்ள ஆறு சேர்க்கைகளுக்கு, எதிர்பார்க்கப்பட்ட மற்றும் கவனிக்கப்பட்ட இறப்புக்கு இடையே குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடு இல்லை (அட்டவணை 5).
சினெர்ஜிஸ்டிக் விளைவுகள் மற்றும் சப்லெதல் டோஸ்களின் அடிப்படையில், அதிக எண்ணிக்கையிலான ஏடிஸ் எஜிப்டி கொசுக்களுக்கு எதிரான அவற்றின் லார்விசைடல் நச்சுத்தன்மை இறுதியில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டு மேலும் சோதிக்கப்பட்டது.யூஜெனோல்-லிமோனீன், டயலில் டைசல்பைட்-லிமோனீன் மற்றும் டயல் டிசல்பைட்-டைம்ஃபோஸ் ஆகிய பைனரி சேர்க்கைகளைப் பயன்படுத்தி கவனிக்கப்பட்ட லார்வா இறப்பு 100% என்று முடிவுகள் காட்டுகின்றன, அதே நேரத்தில் எதிர்பார்க்கப்படும் லார்வா இறப்பு முறையே 76.48%, 72.16% மற்றும் 63.4% ஆகும் (அட்டவணை 6)..லிமோனீன் மற்றும் யூடெஸ்மால் ஆகியவற்றின் கலவையானது ஒப்பீட்டளவில் குறைவான செயல்திறன் கொண்டது, 88% லார்வா இறப்பு 24-மணிநேர வெளிப்பாடு காலத்தில் காணப்பட்டது (அட்டவணை 6).சுருக்கமாக, தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட நான்கு பைனரி சேர்க்கைகள் பெரிய அளவில் பயன்படுத்தப்படும்போது ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிராக சினெர்ஜிஸ்டிக் லார்விசைடல் விளைவுகளையும் வெளிப்படுத்தியது (அட்டவணை 6).
வயது வந்த ஏடிஸ் ஈஜிப்டியின் பெரிய மக்களைக் கட்டுப்படுத்த, அடல்டோசிடல் பயோசேக்காக மூன்று சினெர்ஜிஸ்டிக் கலவைகள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன.பெரிய பூச்சி காலனிகளில் சோதனை செய்ய சேர்க்கைகளைத் தேர்ந்தெடுக்க, நாங்கள் முதலில் இரண்டு சிறந்த சினெர்ஜிஸ்டிக் டெர்பீன் சேர்க்கைகளில் கவனம் செலுத்தினோம், அதாவது கார்வோன் பிளஸ் லிமோனீன் மற்றும் யூகலிப்டால் பிளஸ் யூடெஸ்மால்.இரண்டாவதாக, செயற்கை ஆர்கனோபாஸ்பேட் மாலத்தியான் மற்றும் டெர்பெனாய்டுகளின் கலவையிலிருந்து சிறந்த சினெர்ஜிஸ்டிக் கலவை தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டது.மாலத்தியான் மற்றும் யூடெஸ்மால் ஆகியவற்றின் கலவையானது பெரிய பூச்சிக் காலனிகளில் சோதனைக்கு சிறந்த கலவையாகும் என்று நாங்கள் நம்புகிறோம், ஏனெனில் அதிக இறப்பு மற்றும் வேட்பாளர் கூறுகளின் மிகக் குறைந்த LC50 மதிப்புகள்.மாலத்தியான் α-பினீன், டயலில் டைசல்பைட், யூகலிப்டஸ், கார்வோன் மற்றும் யூடெஸ்மால் ஆகியவற்றுடன் இணைந்து சினெர்ஜிசத்தை வெளிப்படுத்துகிறது.ஆனால் LC50 மதிப்புகளைப் பார்த்தால், Eudesmol மிகக் குறைந்த மதிப்பைக் கொண்டுள்ளது (2.25 ppm).மாலத்தியான், α-பைனீன், டயல் டைசல்பைட், யூகலிப்டால் மற்றும் கார்வோன் ஆகியவற்றின் கணக்கிடப்பட்ட LC50 மதிப்புகள் 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 மற்றும் 140.79 பிபிஎம் ஆகும்.முறையே.இந்த மதிப்புகள் மாலத்தியான் மற்றும் யூடெஸ்மால் ஆகியவற்றின் கலவையானது மருந்தளவு அடிப்படையில் உகந்த கலவையாகும் என்பதைக் குறிக்கிறது.முடிவுகள் 61% முதல் 65% வரை எதிர்பார்க்கப்படும் இறப்புடன் ஒப்பிடும்போது கார்வோன் பிளஸ் லிமோனீன் மற்றும் யூடெஸ்மால் மற்றும் மாலத்தியான் ஆகியவற்றின் கலவையானது 100% இறப்பு விகிதத்தைக் கொண்டிருந்தது.மற்றொரு கலவையான யூடெஸ்மால் பிளஸ் யூகலிப்டால், 60% இறப்பு விகிதத்துடன் ஒப்பிடும்போது, ​​24 மணிநேர வெளிப்பாடுக்குப் பிறகு 78.66% இறப்பு விகிதத்தைக் காட்டியது.தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட மூன்று சேர்க்கைகளும் வயது வந்த ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிராக பெரிய அளவில் பயன்படுத்தப்பட்டாலும் கூட ஒருங்கிணைந்த விளைவுகளை வெளிப்படுத்தின (அட்டவணை 6).
இந்த ஆய்வில், தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட தாவர EOகளான Mp, As, Os, Em மற்றும் Cl ஆகியவை ஏடிஸ் ஈஜிப்டியின் லார்வா மற்றும் வயதுவந்த நிலைகளில் நம்பிக்கைக்குரிய ஆபத்தான விளைவுகளைக் காட்டின.Mp EO ஆனது LC50 மதிப்பு 0.42 ppm உடன் அதிக லார்விசைடு செயல்பாட்டைக் கொண்டிருந்தது, அதைத் தொடர்ந்து As, Os மற்றும் Em EOக்கள் 24 மணிநேரத்திற்குப் பிறகு 50 ppm க்கும் குறைவான LC50 மதிப்பைக் கொண்டிருந்தன.இந்த முடிவுகள் கொசுக்கள் மற்றும் பிற டிப்டெரஸ் ஈக்கள் 10,11,12,13,14 பற்றிய முந்தைய ஆய்வுகளுடன் ஒத்துப்போகின்றன.24 மணிநேரத்திற்குப் பிறகு 163.65 பிபிஎம் என்ற LC50 மதிப்புடன், Cl இன் லார்விசைடல் ஆற்றல் மற்ற அத்தியாவசிய எண்ணெய்களைக் காட்டிலும் குறைவாக இருந்தாலும், 24 மணிநேரத்திற்குப் பிறகு 23.37 ppm என்ற LC50 மதிப்புடன் அதன் வயது வந்தோருக்கான திறன் அதிகமாக உள்ளது.Mp, As மற்றும் Em EOக்கள் LC50 மதிப்புகளுடன் 24 மணிநேர வெளிப்பாட்டில் 100-120 ppm வரம்பில் நல்ல ஒவ்வாமைத் திறனைக் காட்டின, ஆனால் அவற்றின் லார்விசைடல் செயல்திறனை விட ஒப்பீட்டளவில் குறைவாக இருந்தன.மறுபுறம், EO Os மிக உயர்ந்த சிகிச்சை அளவிலும் கூட மிகக் குறைவான ஒவ்வாமை விளைவைக் காட்டியது.எனவே, தாவரங்களுக்கு எத்திலீன் ஆக்சைட்டின் நச்சுத்தன்மை கொசுக்களின் வளர்ச்சி நிலையைப் பொறுத்து மாறுபடும் என்று முடிவுகள் குறிப்பிடுகின்றன15.இது பூச்சியின் உடலில் EO களின் ஊடுருவலின் வீதம், குறிப்பிட்ட இலக்கு நொதிகளுடனான அவற்றின் தொடர்பு மற்றும் ஒவ்வொரு வளர்ச்சி நிலையிலும் கொசுவின் நச்சு நீக்கும் திறன் ஆகியவற்றையும் சார்ந்துள்ளது.எத்திலீன் ஆக்சைட்டின் உயிரியல் செயல்பாட்டில் முக்கிய கூறு கலவை ஒரு முக்கிய காரணியாகும் என்று ஏராளமான ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன, ஏனெனில் இது மொத்த சேர்மங்களின் பெரும்பகுதியைக் கொண்டுள்ளது.எனவே, ஒவ்வொரு EO விலும் இரண்டு முக்கிய சேர்மங்களைக் கருதினோம்.GC-MS முடிவுகளின் அடிப்படையில், டயல் டிசல்பைடு மற்றும் டயல் டிரைசல்பைடு ஆகியவை EO As இன் முக்கிய சேர்மங்களாக அடையாளம் காணப்பட்டன, இது முந்தைய அறிக்கைகள்19,20,21 உடன் ஒத்துப்போகிறது.மெந்தோல் அதன் முக்கிய சேர்மங்களில் ஒன்று என்று முந்தைய அறிக்கைகள் சுட்டிக்காட்டினாலும், கார்வோன் மற்றும் லிமோனென் மீண்டும் MP EO22,23 இன் முக்கிய சேர்மங்களாக அடையாளம் காணப்பட்டன.Os EO இன் கலவை சுயவிவரம் யூஜெனால் மற்றும் மெத்தில் யூஜெனால் ஆகியவை முக்கிய சேர்மங்கள் என்பதைக் காட்டுகிறது, இது முந்தைய ஆராய்ச்சியாளர்களின் கண்டுபிடிப்புகளைப் போன்றது.Eucalyptol மற்றும் eucalyptol ஆகியவை Em இலை எண்ணெயில் உள்ள முக்கிய சேர்மங்களாகப் பதிவாகியுள்ளன, இது சில ஆராய்ச்சியாளர்களின் கண்டுபிடிப்புகளுடன் ஒத்துப்போகிறது. ஆனால் Olalade et al.27.சினியோல் மற்றும் α-பினீனின் ஆதிக்கம் மெலலூகா அத்தியாவசிய எண்ணெயில் காணப்பட்டது, இது முந்தைய ஆய்வுகளைப் போன்றது28,29.வெவ்வேறு இடங்களில் ஒரே தாவர இனங்களில் இருந்து பிரித்தெடுக்கப்பட்ட அத்தியாவசிய எண்ணெய்களின் கலவை மற்றும் செறிவு ஆகியவற்றில் உள்ள வித்தியாசமான வேறுபாடுகள் பதிவாகியுள்ளன, மேலும் அவை புவியியல் தாவர வளர்ச்சி நிலைமைகள், அறுவடை நேரம், வளர்ச்சி நிலை அல்லது தாவர வயது ஆகியவற்றால் பாதிக்கப்படுகின்றன.வேதியியல் வகைகளின் தோற்றம், முதலியன.22,30,31,32.அடையாளம் காணப்பட்ட முக்கிய சேர்மங்கள் பின்னர் வாங்கப்பட்டு அவற்றின் லார்விசைடல் விளைவுகள் மற்றும் வயது வந்த ஏடிஸ் எஜிப்டி கொசுக்கள் மீதான விளைவுகளுக்காக சோதிக்கப்பட்டன.டயல் டிசல்பைட்டின் லார்விசைடு செயல்பாடு கச்சா EO As உடன் ஒப்பிடத்தக்கது என்று முடிவுகள் காட்டுகின்றன.ஆனால் டயல் ட்ரைசல்பைட்டின் செயல்பாடு EO As ஐ விட அதிகமாக உள்ளது.இந்த முடிவுகள் கிம்பாரிஸ் மற்றும் பலர் பெற்றதைப் போன்றது.Culex philippines இல் 33.இருப்பினும், இந்த இரண்டு சேர்மங்களும் இலக்கு கொசுக்களுக்கு எதிராக நல்ல தன்னியக்க செயல்பாட்டைக் காட்டவில்லை, இது Tenebrio molitor இல் Plata-Rueda et al 34 இன் முடிவுகளுடன் ஒத்துப்போகிறது.ஓஸ் ஈஓ ஏடிஸ் ஈஜிப்டியின் லார்வா நிலைக்கு எதிராக பயனுள்ளதாக இருக்கும், ஆனால் வயது வந்தோருக்கு எதிராக அல்ல.முக்கிய தனிப்பட்ட சேர்மங்களின் லார்விசைடல் செயல்பாடு கச்சா Os EO ஐ விட குறைவாக உள்ளது என்று நிறுவப்பட்டுள்ளது.இது கச்சா எத்திலீன் ஆக்சைடில் மற்ற சேர்மங்கள் மற்றும் அவற்றின் தொடர்புகளுக்கு ஒரு பங்கைக் குறிக்கிறது.மெத்தில் யூஜெனால் மட்டும் மிகக் குறைவான செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது, அதேசமயம் யூஜெனால் மட்டும் மிதமான லார்விசைடல் செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது.இந்த முடிவு ஒருபுறம், 35,36 என்பதை உறுதிப்படுத்துகிறது, மறுபுறம், முந்தைய ஆராய்ச்சியாளர்களின் முடிவுகளுக்கு முரணாக உள்ளது37,38.யூஜெனோல் மற்றும் மெத்திலுஜெனோலின் செயல்பாட்டுக் குழுக்களில் உள்ள வேறுபாடுகள் ஒரே இலக்கு பூச்சிக்கு வெவ்வேறு நச்சுத்தன்மையை ஏற்படுத்தக்கூடும்.லிமோனீனில் மிதமான லார்விசைடல் செயல்பாடு இருப்பது கண்டறியப்பட்டது, அதே சமயம் கார்வோனின் விளைவு அற்பமானது.இதேபோல், வயதுவந்த பூச்சிகளுக்கு லிமோனீனின் ஒப்பீட்டளவில் குறைந்த நச்சுத்தன்மை மற்றும் கார்வோனின் அதிக நச்சுத்தன்மை ஆகியவை முந்தைய சில ஆய்வுகளின் முடிவுகளை ஆதரிக்கின்றன, ஆனால் மற்றவற்றுடன் முரண்படுகின்றன.இன்ட்ராசைக்ளிக் மற்றும் எக்ஸோசைக்ளிக் நிலைகளில் இரட்டைப் பிணைப்புகள் இருப்பதால், இந்த சேர்மங்களின் பலன்களை லார்விசைடுகள் 3,41 ஆக அதிகரிக்கலாம், அதே சமயம் கார்வோன், நிறைவுறா ஆல்பா மற்றும் பீட்டா கார்பன்கள் கொண்ட கீட்டோன், பெரியவர்களில் நச்சுத்தன்மைக்கான அதிக திறனை வெளிப்படுத்தலாம்.இருப்பினும், லிமோனீன் மற்றும் கார்வோனின் தனிப்பட்ட பண்புகள் மொத்த EO Mp (அட்டவணை 1, அட்டவணை 3) விட மிகக் குறைவு.பரிசோதிக்கப்பட்ட டெர்பெனாய்டுகளில், 2.5 ppm க்கும் குறைவான LC50 மதிப்புடன் யூடெஸ்மால் மிகப்பெரிய லார்விசைடல் மற்றும் வயது வந்தோருக்கான செயல்பாட்டைக் கொண்டிருப்பது கண்டறியப்பட்டது, இது ஏடிஸ் கொசுக்களைக் கட்டுப்படுத்துவதற்கான ஒரு நம்பிக்கைக்குரிய கலவையாகும்.அதன் செயல்திறன் முழு EO Em-ஐ விட சிறப்பாக உள்ளது, இருப்பினும் இது செங் மற்றும் பலர்.40 இன் கண்டுபிடிப்புகளுடன் ஒத்துப்போகவில்லை.யூடெஸ்மால் என்பது யூகலிப்டஸ் போன்ற ஆக்ஸிஜனேற்றப்பட்ட மோனோடெர்பீன்களைக் காட்டிலும் குறைவான ஆவியாகும் தன்மை கொண்ட இரண்டு ஐசோபிரீன் அலகுகளைக் கொண்ட ஒரு செஸ்கிடர்பீன் ஆகும், எனவே பூச்சிக்கொல்லியாக அதிக ஆற்றலைக் கொண்டுள்ளது.யூக்கலிப்டால், லார்விசிடல் செயல்பாட்டை விட அதிக வயது வந்தவர்களைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் முந்தைய ஆய்வுகளின் முடிவுகள் இதை ஆதரிக்கின்றன மற்றும் மறுக்கின்றன37,43,44.முழு EO Cl இன் செயல்பாடு மட்டுமே கிட்டத்தட்ட ஒப்பிடத்தக்கது.மற்றொரு மிதிவண்டி மோனோடெர்பீன், α-பினீன், ஈடிஸ் ஈஜிப்டியில் வயது வந்தோருக்கான தாக்கத்தை ஒரு லார்விசைடல் விளைவைக் காட்டிலும் குறைவாகவே கொண்டுள்ளது, இது முழு EO Cl இன் விளைவுக்கு எதிரானது.டெர்பெனாய்டுகளின் ஒட்டுமொத்த பூச்சிக்கொல்லி செயல்பாடு அவற்றின் லிபோபிலிசிட்டி, ஏற்ற இறக்கம், கார்பன் கிளைகள், ப்ரொஜெக்ஷன் பகுதி, மேற்பரப்பு பகுதி, செயல்பாட்டு குழுக்கள் மற்றும் அவற்றின் நிலைகள் 45,46 ஆகியவற்றால் பாதிக்கப்படுகிறது.இந்த சேர்மங்கள் செல் திரட்சியை அழிப்பதன் மூலம் செயல்படலாம், சுவாச செயல்பாட்டை தடுப்பது, நரம்பு தூண்டுதலின் பரிமாற்றத்தை குறுக்கிடுவது போன்றவை. உதலா48.செயற்கை ஆர்கனோபாஸ்பரஸ் மாலத்தியனின் வயது வந்தோர் செயல்பாடு 5.44 பிபிஎம்மில் பதிவாகியுள்ளது.இந்த இரண்டு ஆர்கனோபாஸ்பேட்டுகளும் Aedes aegypti இன் ஆய்வக விகாரங்களுக்கு எதிராக சாதகமான பதில்களைக் காட்டினாலும், இந்த கலவைகளுக்கு கொசு எதிர்ப்பு உலகின் பல்வேறு பகுதிகளில் பதிவாகியுள்ளது49.இருப்பினும், மூலிகை மருந்துகளுக்கு எதிர்ப்பின் வளர்ச்சியைப் பற்றிய ஒத்த அறிக்கைகள் எதுவும் கண்டறியப்படவில்லை.எனவே, வெக்டார் கட்டுப்பாட்டு திட்டங்களில் இரசாயன பூச்சிக்கொல்லிகளுக்கு சாத்தியமான மாற்றாக தாவரவியல் கருதப்படுகிறது.
தைமெட்ஃபோஸுடன் கூடிய சக்திவாய்ந்த டெர்பெனாய்டுகள் மற்றும் டெர்பெனாய்டுகளிலிருந்து தயாரிக்கப்பட்ட 28 பைனரி சேர்க்கைகளில் (1:1) லார்விசைடல் விளைவு சோதிக்கப்பட்டது, மேலும் 9 சேர்க்கைகள் சினெர்ஜிஸ்டிக், 14 எதிரிடை மற்றும் 5 விரோதமானவை என கண்டறியப்பட்டது.விளைவு இல்லை.மறுபுறம், வயது வந்தோருக்கான ஆற்றல் உயிரியலில், 7 சேர்க்கைகள் சினெர்ஜிஸ்டிக் என்றும், 15 சேர்க்கைகள் விரோதமானவை என்றும், 6 சேர்க்கைகள் எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தவில்லை என்றும் தெரிவிக்கப்பட்டது.சில சேர்க்கைகள் ஒரு சினெர்ஜிஸ்டிக் விளைவை உருவாக்குவதற்கான காரணம் வெவ்வேறு முக்கியமான பாதைகளில் ஒரே நேரத்தில் தொடர்பு கொள்ளும் வேட்பாளர் சேர்மங்கள் அல்லது ஒரு குறிப்பிட்ட உயிரியல் பாதையின் வெவ்வேறு முக்கிய நொதிகளின் வரிசைமுறை தடுப்பு காரணமாக இருக்கலாம்.சிறிய மற்றும் பெரிய அளவிலான பயன்பாடுகளில் (அட்டவணை 6) டயலில் டிசல்பைட், யூகலிப்டஸ் அல்லது யூஜெனோலுடன் லிமோனீனின் கலவையானது ஒருங்கிணைந்ததாகக் கண்டறியப்பட்டது, அதே சமயம் யூகலிப்டஸ் அல்லது α-பினீனுடன் அதன் கலவையானது லார்வாக்களுக்கு விரோதமான விளைவுகளை ஏற்படுத்துவது கண்டறியப்பட்டது.சராசரியாக, லிமோனீன் ஒரு நல்ல சினெர்ஜிஸ்டாகத் தோன்றுகிறது, ஒருவேளை மெத்தில் குழுக்கள் இருப்பதால், ஸ்ட்ராட்டம் கார்னியத்தில் நல்ல ஊடுருவல் மற்றும் செயல்பாட்டின் வேறுபட்ட வழிமுறை52,53.லிமோனீன் பூச்சி வெட்டுக்களில் ஊடுருவி (தொடர்பு நச்சுத்தன்மை), செரிமான அமைப்பை (ஆண்டிஃபீடண்ட்) அல்லது சுவாச மண்டலத்தை (புமிகேஷன் செயல்பாடு) பாதிப்பதன் மூலம் நச்சு விளைவுகளை ஏற்படுத்தக்கூடும் என்று முன்னர் தெரிவிக்கப்பட்டது. எனவே, பல்வேறு செயல்பாட்டு வழிமுறைகள் கொண்ட கலவைகளின் கலவையானது கலவையின் ஒட்டுமொத்த மரண விளைவை அதிகரிக்கலாம்.யூகலிப்டால் டயாலில் டைசல்பைடு, யூகலிப்டஸ் அல்லது α-பினீனுடன் ஒருங்கிணைந்ததாகக் கண்டறியப்பட்டது, ஆனால் மற்ற சேர்மங்களுடனான பிற சேர்க்கைகள் லார்விசைடு அல்லாதவை அல்லது விரோதமானவை.ஆரம்பகால ஆய்வுகள் யூகலிப்டால் அசிடைல்கொலினெஸ்டெரேஸ் (AChE) மற்றும் ஆக்டமைன் மற்றும் GABA ஏற்பிகளில் தடுப்புச் செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது என்பதைக் காட்டுகிறது.சுழற்சி மோனோடெர்பீன்கள், யூகலிப்டால், யூஜெனோல் போன்றவை அவற்றின் நியூரோடாக்ஸிக் செயல்பாட்டின் அதே பொறிமுறையைக் கொண்டிருக்கக்கூடும் என்பதால், பரஸ்பர தடுப்பு மூலம் அவற்றின் ஒருங்கிணைந்த விளைவுகளை குறைக்கிறது.அதேபோல், டயலில் டிசல்பைட், α-பினீன் மற்றும் லிமோனீன் ஆகியவற்றுடன் டெமெஃபோஸின் கலவையானது ஒருங்கிணைந்ததாகக் கண்டறியப்பட்டது, இது மூலிகைப் பொருட்கள் மற்றும் செயற்கை ஆர்கனோபாஸ்பேட்டுகளுக்கு இடையேயான ஒருங்கிணைந்த விளைவைப் பற்றிய முந்தைய அறிக்கைகளை ஆதரிக்கிறது.
யூடெஸ்மால் மற்றும் யூகலிப்டால் ஆகியவற்றின் கலவையானது ஏடிஸ் ஈஜிப்டியின் லார்வா மற்றும் வயதுவந்த நிலைகளில் ஒருங்கிணைந்த விளைவைக் கொண்டிருப்பது கண்டறியப்பட்டது, அவற்றின் வெவ்வேறு வேதியியல் கட்டமைப்புகள் காரணமாக அவற்றின் வெவ்வேறு செயல்பாட்டு முறைகள் காரணமாக இருக்கலாம்.யூடெஸ்மால் (ஒரு செஸ்கிடர்பீன்) சுவாச மண்டலத்தை பாதிக்கலாம் 59 மற்றும் யூகலிப்டால் (ஒரு மோனோடர்பீன்) அசிடைல்கொலினெஸ்டெரேஸ் 60 ஐ பாதிக்கலாம்.இரண்டு அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட இலக்கு தளங்களுக்கு உட்பொருட்களின் இணை வெளிப்பாடு கலவையின் ஒட்டுமொத்த மரண விளைவை அதிகரிக்கலாம்.வயது வந்தோருக்கான பொருள் உயிரியக்க ஆய்வுகளில், மாலத்தியான் கார்வோன் அல்லது யூகலிப்டால் அல்லது யூகலிப்டால் அல்லது டயலில் டைசல்பைட் அல்லது α-பினீன் ஆகியவற்றுடன் ஒருங்கிணைந்ததாகக் கண்டறியப்பட்டது, இது லிமோனீன் மற்றும் டை சேர்ப்பதன் மூலம் ஒருங்கிணைந்ததாக இருப்பதைக் குறிக்கிறது.அல்லைல் ட்ரைசல்பைடைத் தவிர்த்து, டெர்பீன் சேர்மங்களின் முழு போர்ட்ஃபோலியோவிற்கும் நல்ல சினெர்ஜிஸ்டிக் ஒவ்வாமை வேட்பாளர்கள்.தங்கம் மற்றும் கதிரேசன்61 ஆகியோரும் மூலிகைச் சாற்றுடன் மாலத்தியனின் ஒருங்கிணைந்த விளைவின் இதே போன்ற முடிவுகளைப் புகாரளித்தனர்.மாலத்தியான் மற்றும் பைட்டோ கெமிக்கல்களின் கூட்டு நச்சு விளைவுகள் பூச்சிகளை நச்சு நீக்கும் நொதிகள் மீது ஏற்படுத்துவதால் இந்த ஒத்திசைவு எதிர்வினை ஏற்படலாம்.மாலத்தியான் போன்ற ஆர்கனோபாஸ்பேட்டுகள் பொதுவாக சைட்டோக்ரோம் பி450 எஸ்ட்ரேஸ்கள் மற்றும் மோனோஆக்சிஜனேஸ்கள்62,63,64 ஆகியவற்றைத் தடுப்பதன் மூலம் செயல்படுகின்றன.எனவே, மாலத்தியனை இந்த செயல்பாட்டின் வழிமுறைகள் மற்றும் டெர்பென்களை வெவ்வேறு செயல்பாட்டு வழிமுறைகளுடன் இணைப்பது கொசுக்கள் மீதான ஒட்டுமொத்த மரண விளைவை அதிகரிக்கலாம்.
மறுபுறம், தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட சேர்மங்கள் ஒவ்வொரு சேர்மத்தையும் விட கலவையில் குறைவாக செயல்படுகின்றன என்பதை விரோதம் குறிக்கிறது.உறிஞ்சுதல், விநியோகம், வளர்சிதை மாற்றம் அல்லது வெளியேற்றம் ஆகியவற்றின் விகிதத்தை மாற்றுவதன் மூலம் ஒரு கலவை மற்ற சேர்மத்தின் நடத்தையை மாற்றியமைப்பதே சில சேர்க்கைகளில் விரோதத்திற்கான காரணம்.ஆரம்பகால ஆராய்ச்சியாளர்கள் இது மருந்து சேர்க்கைகளில் விரோதத்திற்கு காரணம் என்று கருதினர்.மூலக்கூறுகள் சாத்தியமான பொறிமுறை 65. அதேபோன்று, பகைமைக்கான சாத்தியமான காரணங்கள் ஒரே மாதிரியான செயல்பாட்டின் வழிமுறைகள், அதே ஏற்பி அல்லது இலக்கு தளத்திற்கான தொகுதி கலவைகளின் போட்டி ஆகியவற்றுடன் தொடர்புடையதாக இருக்கலாம்.சில சந்தர்ப்பங்களில், இலக்கு புரதத்தின் போட்டியற்ற தடுப்பும் ஏற்படலாம்.இந்த ஆய்வில், இரண்டு ஆர்கனோசல்ஃபர் சேர்மங்கள், டயல் டிசல்பைடு மற்றும் டயல்ல் ட்ரைசல்பைடு, ஒரே இலக்கு தளத்திற்கான போட்டியின் காரணமாக, எதிர்விளைவு விளைவுகளைக் காட்டியது.அதேபோல், இந்த இரண்டு கந்தக சேர்மங்களும் முரண்பாடான விளைவுகளைக் காட்டியது மற்றும் யூடெஸ்மால் மற்றும் α-பினீனுடன் இணைந்தபோது எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தவில்லை.Eudesmol மற்றும் alpha-pinene ஆகியவை சுழற்சி இயல்புடையவை, அதேசமயம் diallyl disulfide மற்றும் diallyl trisulfide ஆகியவை அலிபாடிக் இயல்புடையவை.வேதியியல் கட்டமைப்பின் அடிப்படையில், இந்த சேர்மங்களின் கலவையானது ஒட்டுமொத்த மரணத்தின் செயல்பாட்டை அதிகரிக்க வேண்டும், ஏனெனில் அவற்றின் இலக்கு தளங்கள் பொதுவாக வேறுபட்டவை34,47, ஆனால் சோதனை ரீதியாக நாம் விரோதத்தைக் கண்டறிந்தோம், இது விவோவில் சில அறியப்படாத உயிரினங்களில் இந்த சேர்மங்களின் பங்கு காரணமாக இருக்கலாம்.தொடர்புகளின் விளைவாக அமைப்புகள்.இதேபோல், சினியோல் மற்றும் α-பினீன் ஆகியவற்றின் கலவையானது முரண்பாடான பதில்களை உருவாக்கியது, இருப்பினும் ஆராய்ச்சியாளர்கள் முன்னர் இரண்டு சேர்மங்களும் செயல்பாட்டின் வெவ்வேறு இலக்குகளைக் கொண்டிருப்பதாக அறிவித்தனர்.இரண்டு சேர்மங்களும் சுழற்சி மோனோடெர்பீன்கள் என்பதால், சில பொதுவான இலக்கு தளங்கள் பிணைக்க போட்டியிடலாம் மற்றும் ஆய்வு செய்யப்பட்ட கூட்டு ஜோடிகளின் ஒட்டுமொத்த நச்சுத்தன்மையை பாதிக்கலாம்.
LC50 மதிப்புகள் மற்றும் கவனிக்கப்பட்ட இறப்பு ஆகியவற்றின் அடிப்படையில், இரண்டு சிறந்த சினெர்ஜிஸ்டிக் டெர்பீன் சேர்க்கைகள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன, அதாவது கார்வோன் + லிமோனென் மற்றும் யூகலிப்டால் + யூடெஸ்மால், அத்துடன் டெர்பீன்களுடன் செயற்கை ஆர்கனோபாஸ்பரஸ் மாலத்தியான்.மாலத்தியான் + யூடெஸ்மால் கலவைகளின் உகந்த ஒருங்கிணைப்பு கலவையானது வயதுவந்த பூச்சிக்கொல்லி உயிரியலில் சோதிக்கப்பட்டது.இந்த பயனுள்ள சேர்க்கைகள் அதிக எண்ணிக்கையிலான நபர்களுக்கு எதிராக ஒப்பீட்டளவில் பெரிய வெளிப்பாடு இடைவெளிகளில் செயல்பட முடியுமா என்பதை உறுதிப்படுத்த பெரிய பூச்சி காலனிகளை குறிவைக்கவும்.இந்த கலவைகள் அனைத்தும் பூச்சிகளின் பெரிய திரள்களுக்கு எதிராக ஒரு ஒருங்கிணைந்த விளைவை நிரூபிக்கின்றன.ஏடிஸ் ஈஜிப்டி லார்வாக்களின் அதிக மக்கள்தொகைக்கு எதிராக சோதிக்கப்பட்ட உகந்த சினெர்ஜிஸ்டிக் லார்விசைடல் கலவைக்கு இதே போன்ற முடிவுகள் பெறப்பட்டன.எனவே, தாவர EO சேர்மங்களின் பயனுள்ள சினெர்ஜிஸ்டிக் லார்விசைடல் மற்றும் அடல்டிசைடல் கலவையானது தற்போதுள்ள செயற்கை இரசாயனங்களுக்கு எதிராக வலுவான வேட்பாளராக உள்ளது என்றும் மேலும் ஏடிஸ் ஈஜிப்டி மக்கள்தொகையைக் கட்டுப்படுத்தப் பயன்படுத்தலாம் என்றும் கூறலாம்.அதேபோல, கொசுக்களுக்கு அளிக்கப்படும் தைமெட்பாஸ் அல்லது மாலத்தியான் அளவைக் குறைக்க செயற்கை லார்விசைடுகள் அல்லது டெர்பீன்களுடன் கூடிய அடல்லிசைடுகளின் பயனுள்ள சேர்க்கைகளும் பயன்படுத்தப்படலாம்.இந்த ஆற்றல்மிக்க சினெர்ஜிஸ்டிக் கலவைகள் ஏடிஸ் கொசுக்களில் மருந்து எதிர்ப்பின் பரிணாம வளர்ச்சி குறித்த எதிர்கால ஆய்வுகளுக்கு தீர்வுகளை வழங்கலாம்.
Aedes aegypti இன் முட்டைகள், திப்ருகரில் உள்ள பிராந்திய மருத்துவ ஆராய்ச்சி மையம், இந்திய மருத்துவ ஆராய்ச்சி கவுன்சிலில் இருந்து சேகரிக்கப்பட்டு, கௌஹாத்தி பல்கலைக்கழகத்தின் விலங்கியல் துறையில் கட்டுப்பாட்டு வெப்பநிலை (28 ± 1 °C) மற்றும் ஈரப்பதம் (85 ± 5%) ஆகியவற்றின் கீழ் வைக்கப்பட்டன. பின்வரும் நிபந்தனைகள்: அறிவொளி விவரிக்கப்பட்டது மற்றும் பலர்.குஞ்சு பொரித்த பிறகு, லார்வாக்களுக்கு லார்வா உணவு (நாய் பிஸ்கட் தூள் மற்றும் ஈஸ்ட் 3:1 விகிதத்தில்) மற்றும் பெரியவர்களுக்கு 10% குளுக்கோஸ் கரைசல் கொடுக்கப்பட்டது.தோன்றிய 3 வது நாளில் இருந்து, வயது வந்த பெண் கொசுக்கள் அல்பினோ எலிகளின் இரத்தத்தை உறிஞ்சுவதற்கு அனுமதிக்கப்பட்டன.வடிகட்டி காகிதத்தை ஒரு கிளாஸில் தண்ணீரில் ஊறவைத்து முட்டையிடும் கூண்டில் வைக்கவும்.
தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட தாவர மாதிரிகள் அதாவது யூகலிப்டஸ் இலைகள் (மிர்டேசி), புனித துளசி (லாமியாசி), புதினா (லாமியாசி), மெலலூகா (மைர்டேசி) மற்றும் அல்லியம் பல்புகள் (அமரிலிடேசி).கவுகாத்தியில் இருந்து சேகரிக்கப்பட்டு, கவுகாத்தி பல்கலைக்கழகத்தின் தாவரவியல் துறையால் அடையாளம் காணப்பட்டது.சேகரிக்கப்பட்ட தாவர மாதிரிகள் (500 கிராம்) 6 மணி நேரம் க்ளெவெஞ்சர் கருவியைப் பயன்படுத்தி ஹைட்ரோடிஸ்டில்லேஷனுக்கு உட்படுத்தப்பட்டன.பிரித்தெடுக்கப்பட்ட EO சுத்தமான கண்ணாடி குப்பிகளில் சேகரிக்கப்பட்டு மேலும் ஆய்வுக்காக 4 ° C இல் சேமிக்கப்பட்டது.
லார்விசைடல் நச்சுத்தன்மையை சிறிது மாற்றியமைக்கப்பட்ட நிலையான உலக சுகாதார அமைப்பின் நடைமுறைகளைப் பயன்படுத்தி ஆய்வு செய்யப்பட்டது 67 .DMSO ஐ ஒரு குழம்பாக்கியாகப் பயன்படுத்தவும்.ஒவ்வொரு EO செறிவும் ஆரம்பத்தில் 100 மற்றும் 1000 ppm இல் சோதிக்கப்பட்டது, ஒவ்வொரு பிரதியிலும் 20 லார்வாக்களை வெளிப்படுத்துகிறது.முடிவுகளின் அடிப்படையில், ஒரு செறிவு வரம்பு பயன்படுத்தப்பட்டது மற்றும் இறப்பு 1 மணிநேரம் முதல் 6 மணிநேரம் வரை (1 மணிநேர இடைவெளியில்), மற்றும் சிகிச்சையின் பின்னர் 24 மணிநேரம், 48 மணிநேரம் மற்றும் 72 மணிநேரங்களில் பதிவு செய்யப்பட்டது.24, 48 மற்றும் 72 மணிநேர வெளிப்பாட்டிற்குப் பிறகு சப்லெதல் செறிவுகள் (LC50) தீர்மானிக்கப்பட்டது.ஒவ்வொரு செறிவும் ஒரு எதிர்மறை கட்டுப்பாடு (தண்ணீர் மட்டும்) மற்றும் ஒரு நேர்மறை கட்டுப்பாடு (DMSO- சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட நீர்) ஆகியவற்றுடன் மூன்று மடங்காக மதிப்பிடப்பட்டது.பியூப்பேஷன் ஏற்பட்டு, கட்டுப்பாட்டுக் குழுவின் லார்வாக்களில் 10% க்கும் அதிகமானவை இறந்துவிட்டால், சோதனை மீண்டும் செய்யப்படுகிறது.கட்டுப்பாட்டு குழுவில் இறப்பு விகிதம் 5-10% க்கு இடையில் இருந்தால், அபோட் திருத்தம் சூத்திரம் 68 ஐப் பயன்படுத்தவும்.
ராமர் மற்றும் பலர் விவரித்த முறை.69 அசிட்டோனை கரைப்பானாகப் பயன்படுத்தி ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிரான ஒரு வயதுவந்த உயிரியலுக்குப் பயன்படுத்தப்பட்டது.ஒவ்வொரு EOவும் ஆரம்பத்தில் 100 மற்றும் 1000 ppm செறிவுகளில் வயது வந்த ஏடிஸ் எஜிப்டி கொசுக்களுக்கு எதிராக சோதிக்கப்பட்டது.வாட்மேன் எண்ணில் தயாரிக்கப்பட்ட ஒவ்வொரு கரைசலையும் 2 மில்லி பயன்படுத்தவும்.வடிகட்டி காகிதத்தின் 1 துண்டு (அளவு 12 x 15 செமீ2) மற்றும் அசிட்டோனை 10 நிமிடங்களுக்கு ஆவியாக விடவும்.2 மில்லி அசிட்டோனைக் கொண்டு வடிகட்டிய காகிதம் ஒரு கட்டுப்பாட்டாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது.அசிட்டோன் ஆவியாகிய பிறகு, சிகிச்சை வடிகட்டி காகிதம் மற்றும் கட்டுப்பாட்டு வடிகட்டி காகிதம் ஒரு உருளை குழாயில் (10 செமீ ஆழம்) வைக்கப்படுகின்றன.பத்து 3 முதல் 4 நாள் வயதுடைய இரத்தம் ஊட்டாத கொசுக்கள் ஒவ்வொரு செறிவின் மும்மடங்காக மாற்றப்பட்டன.பூர்வாங்க சோதனைகளின் முடிவுகளின் அடிப்படையில், தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட எண்ணெய்களின் பல்வேறு செறிவுகள் சோதிக்கப்பட்டன.கொசு வெளியேறிய 1 மணி நேரம், 2 மணி நேரம், 3 மணி நேரம், 4 மணி நேரம், 5 மணி நேரம், 6 மணி நேரம், 24 மணி நேரம், 48 மணி நேரம் மற்றும் 72 மணி நேரத்தில் இறப்பு பதிவு செய்யப்பட்டது.24 மணிநேரம், 48 மணிநேரம் மற்றும் 72 மணிநேர வெளிப்பாடு நேரங்களுக்கான LC50 மதிப்புகளைக் கணக்கிடுங்கள்.கட்டுப்பாட்டு இடத்தின் இறப்பு விகிதம் 20% ஐ விட அதிகமாக இருந்தால், முழு சோதனையையும் மீண்டும் செய்யவும்.அதேபோல், கட்டுப்பாட்டு குழுவில் இறப்பு விகிதம் 5% ஐ விட அதிகமாக இருந்தால், அபோட்டின் சூத்திரத்தைப் பயன்படுத்தி சிகிச்சை மாதிரிகளுக்கான முடிவுகளை சரிசெய்யவும்.
காஸ் குரோமடோகிராபி (அஜிலன்ட் 7890A) மற்றும் மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரி (Accu TOF GCv, Jeol) ஆகியவை தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட அத்தியாவசிய எண்ணெய்களின் கலவை கலவைகளை பகுப்பாய்வு செய்ய நிகழ்த்தப்பட்டன.GC ஆனது FID டிடெக்டர் மற்றும் கேபிலரி நெடுவரிசையுடன் (HP5-MS) பொருத்தப்பட்டிருந்தது.கேரியர் வாயு ஹீலியம், ஓட்ட விகிதம் 1 மிலி/நிமி.GC நிரல் Allium sativum ஐ 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M எனவும், Ocimum Saintum ஐ 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280 எனவும் அமைக்கிறது, புதினா 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, யூகலிப்டஸ் 20.60-1M-10-200-3M-30-280, மற்றும் சிவப்புக்கு ஆயிரம் அடுக்குகள் அவை 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
ஜிசி குரோமடோகிராம் மற்றும் மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரி முடிவுகள் (என்ஐஎஸ்டி 70 தரநிலை தரவுத்தளத்தில் குறிப்பிடப்பட்டுள்ளது) ஆகியவற்றிலிருந்து கணக்கிடப்பட்ட பகுதி சதவீதத்தின் அடிப்படையில் ஒவ்வொரு EO இன் முக்கிய சேர்மங்களும் அடையாளம் காணப்பட்டன.
ஒவ்வொரு EO விலும் உள்ள இரண்டு முக்கிய சேர்மங்கள் GC-MS முடிவுகளின் அடிப்படையில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டு, மேலும் உயிரியல் ஆய்வுகளுக்காக 98-99% தூய்மையில் சிக்மா-ஆல்ட்ரிச்சிலிருந்து வாங்கப்பட்டது.மேலே விவரிக்கப்பட்டுள்ளபடி ஏடிஸ் எஜிப்டிக்கு எதிராக லார்விசைடல் மற்றும் வயது வந்தோருக்கான செயல்திறனுக்காக கலவைகள் சோதிக்கப்பட்டன.மிகவும் பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் செயற்கை லார்விசைடுகளான டேம்போசேட் (சிக்மா ஆல்ட்ரிச்) மற்றும் வயது வந்தோருக்கான மருந்து மாலத்தியான் (சிக்மா ஆல்ட்ரிச்) ஆகியவை அதே நடைமுறையைப் பின்பற்றி, தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட EO கலவைகளுடன் அவற்றின் செயல்திறனை ஒப்பிட்டுப் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன.
தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட டெர்பீன் சேர்மங்கள் மற்றும் டெர்பீன் சேர்மங்களின் பைனரி கலவைகள் மற்றும் வணிக ஆர்கனோபாஸ்பேட்டுகள் (டைல்ஃபோஸ் மற்றும் மாலத்தியான்) 1:1 விகிதத்தில் ஒவ்வொரு வேட்பாளர் சேர்மத்தின் LC50 அளவைக் கலந்து தயாரிக்கப்பட்டன.தயாரிக்கப்பட்ட கலவைகள் மேலே விவரிக்கப்பட்டுள்ளபடி ஏடிஸ் ஈஜிப்டியின் லார்வா மற்றும் வயதுவந்த நிலைகளில் சோதிக்கப்பட்டன.ஒவ்வொரு உயிரியலும் ஒவ்வொரு கலவைக்கும் மும்மடங்காகவும், ஒவ்வொரு கலவையிலும் இருக்கும் தனிப்பட்ட சேர்மங்களுக்கு மும்மடங்காகவும் செய்யப்பட்டது.இலக்கு பூச்சிகளின் இறப்பு 24 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு பதிவு செய்யப்பட்டது.பின்வரும் சூத்திரத்தைப் பயன்படுத்தி பைனரி கலவையின் எதிர்பார்க்கப்படும் இறப்பு விகிதத்தைக் கணக்கிடுங்கள்.
இதில் ஈ = ஏடிஸ் ஈஜிப்டி கொசுக்களின் இறப்பு விகிதம் பைனரி கலவைக்கு பதில், அதாவது இணைப்பு (A + B).
ஒவ்வொரு பைனரி கலவையின் விளைவும் பாவ்லா 52 விவரித்த முறையால் கணக்கிடப்பட்ட χ2 மதிப்பின் அடிப்படையில் சினெர்ஜிஸ்டிக், விரோதம் அல்லது விளைவு இல்லை என பெயரிடப்பட்டது.பின்வரும் சூத்திரத்தைப் பயன்படுத்தி ஒவ்வொரு சேர்க்கைக்கும் χ2 மதிப்பைக் கணக்கிடவும்.
கணக்கிடப்பட்ட χ2 மதிப்பு, தொடர்புடைய அளவு சுதந்திரத்திற்கான அட்டவணை மதிப்பை விட அதிகமாக இருக்கும் போது (95% நம்பிக்கை இடைவெளி) மற்றும் அனுசரிக்கப்படும் இறப்பு எதிர்பார்த்த இறப்பு விகிதத்தை விட அதிகமாக இருப்பது கண்டறியப்பட்டால், கலவையின் விளைவு ஒருங்கிணைந்ததாக வரையறுக்கப்படுகிறது.இதேபோல், எந்தவொரு சேர்க்கைக்கான கணக்கிடப்பட்ட χ2 மதிப்பு சில அளவு சுதந்திரத்துடன் அட்டவணை மதிப்பை விட அதிகமாக இருந்தால், ஆனால் கவனிக்கப்பட்ட இறப்பு எதிர்பார்க்கப்படும் இறப்பு விகிதத்தை விட குறைவாக இருந்தால், சிகிச்சை முரண்பாடாக கருதப்படுகிறது.மேலும் ஏதேனும் ஒரு கலவையில் χ2 இன் கணக்கிடப்பட்ட மதிப்பு, தொடர்புடைய சுதந்திரத்தின் அளவுகளில் உள்ள அட்டவணை மதிப்பை விடக் குறைவாக இருந்தால், கலவை எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தாது என்று கருதப்படுகிறது.
அதிக எண்ணிக்கையிலான பூச்சிகளுக்கு எதிராக சோதனை செய்வதற்காக மூன்று முதல் நான்கு சாத்தியமான ஒருங்கிணைந்த சேர்க்கைகள் (100 லார்வாக்கள் மற்றும் 50 லார்விசைடல் மற்றும் வயதுவந்த பூச்சி செயல்பாடு) தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன.பெரியவர்கள்) மேலே சொன்னபடி தொடரவும்.கலவைகளுடன், தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட கலவைகளில் இருக்கும் தனிப்பட்ட சேர்மங்களும் சம எண்ணிக்கையிலான ஏடிஸ் ஈஜிப்டி லார்வாக்கள் மற்றும் பெரியவர்கள் மீது சோதிக்கப்பட்டன.சேர்க்கை விகிதம் ஒரு வேட்பாளர் கலவையின் ஒரு பகுதி LC50 டோஸ் மற்றும் மற்ற உறுப்பு கலவையின் பகுதி LC50 டோஸ் ஆகும்.வயது வந்தோருக்கான உயிரியல் ஆய்வில், தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட கலவைகள் கரைப்பான் அசிட்டோனில் கரைக்கப்பட்டு, 1300 செமீ3 உருளை வடிவ பிளாஸ்டிக் கொள்கலனில் மூடப்பட்ட வடிகட்டி காகிதத்தில் பயன்படுத்தப்பட்டன.அசிட்டோன் 10 நிமிடங்களுக்கு ஆவியாகி, பெரியவர்கள் விடுவிக்கப்பட்டனர்.இதேபோல், லார்விசைடல் பயோஅசேயில், LC50 கேண்டிடேட் சேர்மங்களின் அளவுகள் முதலில் DMSO இன் சம அளவுகளில் கரைக்கப்பட்டு, பின்னர் 1300 cc பிளாஸ்டிக் கொள்கலன்களில் சேமிக்கப்பட்ட 1 லிட்டர் தண்ணீரில் கலக்கப்பட்டு, லார்வாக்கள் வெளியிடப்பட்டன.
எல்சி50 மதிப்புகளைக் கணக்கிட SPSS (பதிப்பு 16) மற்றும் மினிடாப் மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி 71 பதிவுசெய்யப்பட்ட இறப்பு தரவுகளின் நிகழ்தகவு பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது.